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1、无脊椎动物的采集、培养与固定保存 发布日期：2010 年 7 月 21 日浏览次数：22 来源：网络 草履虫一、草履虫的采集与培养1.采集草履虫多生活在湖沼、池塘、水田以及城市生活用水的下水沟中。以细菌、藻类和其他腐 败的有机物为食。在水底沉渣表面浮有灰白色絮状物的有机物质丰富的水中，有大量草履 虫。将广口瓶系上绳，沉人水底连同沉渣一块捞起。2.培养常用稻草培养液。取 10g 稻草。剪成 3cm 的小段，用水清洗后，加人 1000ml 水,煮沸约 20min，注意补充蒸发掉的水分，冷却过夜。接人野外采集的水样，培养 5.d 左右(视接种 量和室温而定)，可见在培养液的表面有一层浮膜，周缘有白色
2、的环带，这是草履虫在聚集 觅食。此时。此处草履虫密度大且较纯，用滴管吸取，可直接用于一般的教学实验。为保持草履虫高速繁殖的理想环境，培养液应保持 p 日 6.57.0.(可加入 1%碳酸氢钠)也可 加人少量的小麦粉、玉米粉、昆虫尸体、肝脏碎片等以维持草履虫的密度。3.纯培养由于外来水样除含有草靥虫外，还有其他小生物，如钟形虫、眼虫、轮虫和藻类;又由于稻 草培养液是以在煮沸中未死的杂细菌孢子萌发和环境中的杂菌在稻草液中繁殖后，成为草履虫的食物，来培养草履虫的。在此过程中也会滋生一些其他小生物等;因此，做研究实验 就须将草履虫与其他小生物分离，进行纯培养。分离草履虫。常用方法是在体视显徽镜下，用毛
3、细吸管逐个吸取草履虫，放于草履虫生活 过的经过滤和高压灭菌的培养水中清洗。反复吸取并更换清洗液 23 次即可去除杂物，得 到纯的草履虫。将稻草培养液经 O.1MPa 灭菌 20.min,冷却后按无菌操作要求，接种已确定种类的细菌(如产 气杆菌)，置于 27培养，当稻草培养液由较清澈逐渐变为混浊时。及时接种已纯化的草 履虫，并置于 25培养。几天后可得到大量纯草履虫。如只取 1 个草履虫并按上述方法培养，可获得由 1 个草履虫繁殖的纯的种群。二、水螅的采集与培养1.采集水螅一般生活在少污染、水草丰富、清澈缓流的湖塘、小河中，以水蚤、剑水蚤等为食。 水螅喜附着在水草的茎叶、水底的石块上。在水中身体
4、伸展时体色较淡。遇剌激或离水时 会收蟾缩浅灰褐色的小粒状体。紧粘在附着物上，仔细观察才能看见。水蚤和水草肉眼易 见，是寻找水螅的标志。采集时将水螅连同水草和水带回实验室，放人玻璃容器中，静置 数小时，水螅体舒展开后即清晰可见。2.培养培养水螅应用清洁的湖塘水。如用自来水培养，须把自来水放置几天。经阳光直接曝晒过 的更好。将水螅连同水草放人培养缸的水中。培养温度以 15 20为适宜，超过 30不 利于生长;过低则繁殖缓慢或停止。每周投食活水蚤 12 次。如欲加速繁殖，应增加投食 量。当水螅体上的芽体有 3 个左右时，投食量为适宜。注意及时用虹吸管吸去水底的死水 蚤、沉渣和一些陈旧缸水，再补充新水
5、。如欲获得带精巢或卵巢的水螅。可把水温降到8左右，停止投食。水螅体壁上会长出精巢或卵巢。长期保种培养水螅最好是建 1 个小的生态系统。用较大的培养缸(容水量 80L 左右或更大) 注人净并置于窗下，控制每日直射光照 2h 即可。取一瓦钵装人菜园土，种上水草后放入培 养缸。引入细菌、藻类、原生动物、轮虫、螺和水蚤，再将水螅接种进去。在这一相对平 衡的生态系统中，只需对食物链进行调整性管理。水草翠绿、水质清亮、活水蚤数量稳定、 水螅体态正常则为适宜状态。越夏过冬要注意养护，夏天应把培养缸放在通风阴凉处。保 持水的清洁，减少水螅密度，保种越夏。冬天水螅因有性生殖，其胚熟落到水底，注意不 要吸去底层残
6、渣。来年春天胚胎会发育成小水螅。该系统一般不用换水，只需补足挥发失 去的水分。三、涡虫的采集与培养1.采集涡虫喜生活在较清澈、流动的溪流、水沟中，以活或死的小型蠕虫、甲壳类动物及昆虫的 幼虫等为食。涡虫避强光，昼间潜伏于石块、落叶下。发现有涡虫时，可将新鲜动物肝脏 (或肌肉)切成小块。系上细绳吊放入水中。12h 后会诱来较多的涡虫附着在肝脏上，提起 诱饵放人装有水的广口瓶中，涮下涡虫。可同时在附近多设几处诱饵。采到更多涡虫。2.培养培养涡虫最好是用洁净的池塘水、井水和泉水，如用自来水培养，须把自来水放置几天， 经阳光直接曝晒过的更好。培养缸内可放些瓦块、卵石便于涡虫隐蔽。涡虫喜欢的水温是 16
7、18，温度过高时会自行解体，所以夏季应特别注意降温。食物以动物肝脏或肌肉、 熟蛋白等为主。如需涡虫加快生长，可每周投食 3 次;如保种，则 2 周或更长时间投食 1 次， 因涡虫有较强的耐饥饿能力。注意每次投食几小时后应将剩余的食物移出，以免水质变坏。 换水时间视水质的清、浊来定。当缸水有点混浊时，用毛笔将缸内的水旋转搅动。使沉渣 泛起、涡虫卷缩下沉，倾去上部陈水，再充进新水。如用稍大些的培养缸，种植少量水生 植物，会有利于保护水质。四、蛔虫的采集与圃定保存1.采集蛔虫寄生在人、畜、禽等动物体内。猪蛔虫是寄生于猪小肠中的蛔虫，和寄生于人体内的 蛔虫在形态上十分相似，故常被用作实验材料。一般是到
8、屠宰场采集，从猪小肠中取出蛔 虫，用水稍冲洗，放入冰瓶带回实验室。2.固定保存方法一：用 0.7%生理盐水洗净蛔虫，再放入 30%-50%乙醇溶液中，慢慢加热至 6.0-7.0， 将蛔虫杀死并使虫体伸直，然后用 70%乙醇固定，最后保存于含 5%甘油的 75%80%乙 醇中。方法二：向已洗净的蛔虫体内注射含 2%甘油的 70%乙醇溶液。注射量以使虫体伸直即可， 然后平放在瓷盘中，用 l0.%福尔马林溶液固定过夜，最后保存于 5%的福尔马林溶液中。五、蚯蚓的采集与固定保存1.采集蚯蚓生活在腐殖质丰富的土壤中，以腐烂的植物和土壤为食。蚯蚓白昼穴居泥土内，夜间 到地面上摄食，粪便排在地面上。一般在树
9、林、草丛、菜园等土壤肥沃潮湿处、蚓粪多的 地方能挖掘到。大雨过后因土壤渗水过多，蚯蚓会爬行于地面即能拾得。2.固定保存蚯蚓洗净后，浸于水中，逐渐加入 95%乙醇，至乙醇浓度达到 8%10%为止。待数分钟蚯 蛔全部麻醉后，移人 50%、70%、95%乙醇内各浸 1d。最后保存于 80%乙醇或 5.%福尔马 林溶液中。如为个体较大的种类。应在麻醉后，立即注射福尔马林乙醇混合液(4.%福尔马 林 12 份，95%的乙醇 30 份，甘油 2 份及水 60 份)后再保存。六、河蚌的采集与固定保存1.采集河蚌生长在湖、塘、河底的淤泥中，用带铁丝网兜的耙从水底捞取，夏季可潜入水底摸取。 从市场或珍珠养殖场也
10、可购买到。2.固定保存河蚌洗去污泥，放在清水中养几天后，放入温水中并徐徐加热，河蚌壳会张开。蚌足慢慢 从壳缝中伸出。继续加热到 50，再放到 50%70%的乙醇中固定几天。然后固定保存于 10%福尔马林溶液或 90%的乙醇中。如个体较大，应向内脏团中注射 10%福尔马林固定液。如欲保持贝壳的光泽，最好用 90% 乙醇固定保存。七、螯虾的采集与固定保存1.采集螯虾喜穴居在田沟、池塘和溪流中。属底栖动物。可用动物内脏和肌肉等诱捕。2.固定保存为防止螯虾附肢脱落。应将螯虾放入密闭的容器中，用乙醚或氯仿麻醉。也可浸于 10%乙 醇中麻醉。麻醉完全后，最好向体内注射含 2%甘油的 70%乙醇溶液或 10
11、%福尔马林溶液 之后，固定保存于 70%80%乙醇中或 10%甘油与 7%福尔马林(1：1)混合液中。八、昆虫的采集与固定保存1.采集用具(1)采集网 依各种昆虫生活的场所、取食方式和个体大小等不同。应采用不同的网。捕网：用来捕捉能飞善跳的昆虫。网袋用轻便通风的纱布制成，直径约 30cm，袋深约 65 cm，略呈圆锥形，底部稍圆，开口可做成结扎的，便于取虫。网柄长约 1m。扫网：主要适用于草丛中扫荡隐藏在枝叶下的昆虫。网袋要用较结实的布制作，直径和 袋潦比捕网略小，其他与捕网基本相同。水网：用来被捉水生昆虫。网袋需用坚固不怕浸水的尼龙、亚麻咸金属纱制作，且要根 据虫体大小选取不同孔径的纱。网袋
12、直径约 30cm, 袋底做成平底或瓢形底，网柄要适当放 长。(2)毒瓶 用来收集和迅速杀死昆虫。常用 500mL 玻璃广口瓶做成。简便方法是在瓶底铺 1 层脱脂棉。再铺 2 层滤纸，采集之前倒入适量乙醚或乙酸乙酯或三氧甲烷，盖紧盖子备用。 因这几种试剂易挥发，要注意添加，以保持麻醉效果。如用氰化钾(或氰化钠)毒虫，应将 其(约 50g)置于瓶底，上铺 1 层锯末。浇上石膏浆，稍硬化时用针扎些小孔。面上再铺一层 滤纸，待石膏完全于后，盖好盖子备用。氰化钾(或氰化钠)是剧毒品，使用时应特别小心。 制作毒瓶也可用捣碎的植物组织，如桃仁、桃树皮和肉桂树等，效果亦行，且经济安全。(3)诱虫灯 利用夜间多
13、种昆虫特别是蛾类的趋光性来诱捕它们。要求诱虫灯光的射程远。 诱来的昆虫落进灯下的容器中不易逃脱，或使昆虫停息在白色的幕布上任人捕捉。(4)其他 采集袋、采集箱、采集伞、白色的幕布、挖土工具、折好的三角纸袋、镊子、剪 刀、小刀、放大镜、玻璃指管、毛笔、记录本、标签纸、笔、70%乙醇等。2.采集方法昆虫种类繁多，分布很广，生活习性各异。因此要先掌握昆虫的有关知识，了解昆虫生活 的季节、时间、地点和环境，才能确定采用何种采集方法。(1)网捕法 是最常使用的采集方法。对善于飞翔的昆虫，如蝶、蝗、蜂和蜻蜓等可用捕网。 使用时先把飞虫兜人网内，然后迅速把网口转叠以封住网口，再将已打开盖子的毒瓶送到 网底，
14、把虫赶入瓶内。有底部开口的网，可打开结扎，将虫送入毒瓶中。具蛰刺的蜂类入 网后，应用镊子、毒虫夹取虫，或应先隔着网弹晕虫后再放入毒瓶中。对栖息在杂草、灌 木丛中的昆虫，应采用较结实的扫网。使用时边上下左右振动扫网，边向前移动网，将昆 虫集中到网底连同碎枝叶一起倒入毒瓶中，待毒死后再倒出来挑选。采集水生昆虫，应根 据虫体的大小及所处水域环境，选用不同用途的水网捕虫。(2)诱虫法 利用许多昆虫有趋光性的特点，在夜间用诱虫灯诱捕。利用昆虫的趋食性，把 马粪、杂草、糖渣、酒糟堆放在田间，会诱来地老虎、蝼蛄等。把糖、醋、蜜、酒等有甜 酸发酵气味的浆液涂洒在木板、草堆上或用腐肉、烂瓜果能诱来蛾、蝇等多种昆
15、虫。还可 利用昆虫的趋化性、趋异性等，有选择性地诱捕某种昆虫。(3)击落法 针对许多昆虫有假死性的特点，或当昆虫专心取食时，趁其不备，猛然震动寄 主植物，昆虫会被击落下来。配合使用采集伞、网和布单效杲更好。可采到梨步曲、槐尺 蠖等鳞翅目幼虫和金龟子、象甲及一些半翅目种类。有的昆虫虽不会被击落，但受震动后 会爬动或解除拟态而被发现。(4)搜寻法 有许多昆虫能发出声音，有些昆虫会在它们生活的地方留下种种踪迹，如被啃 食的植物叶片、排泄物、虫瘿等。据此可在附近的植物上、泥土中、砖石下、树洞里等昆 虫可能栖居的地方，搜索到多种昆虫。注童捕到的昆虫要投人毒瓶里杀死。毒死的昆虫不应在毒瓶中久放，以免虫体变
16、色。鳞翅 目昆虫不能和其他昆虫混放，以免弄坏翅和鳞片。瓶里可放些纸条减少虫体摩擦。毒死的 昆虫应分别包在三角纸包里，要注明名称、采集地点、时间、日期和采集人姓名等。3.固定保存微小的昆虫，如小蜂类、蚊类、蚜虫以及鳞翅目和鞘翅目的幼虫等，可直接放人 70%乙醇 中保存。昆虫的许多成虫，大都制作成干燥标本保存。如用于解剖，需做成浸制标本。一 般是将昆虫直接投入 70%乙醇中杀死固定，12d 后移入同浓度的新乙醇或 5%福尔马林溶 液中保存，虫体较大的需向体内注射 5%福尔马林溶液。如需昆虫内部组织有较好的固定，可采用 80% 乙醇 l5 份、福尔马林 5 份和冰醋酸 1 份的 混合液保存。如需在一定时间内保护昆虫的体色，可采用冰醋酸 5mL、白糖 5g、福尔马林 5ml 和蒸馏水 100ml 的混合液保存。本文来自马博士教育网，转载请标明出处： http:/
