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1、家兔尿生成的调节家兔尿生成的调节设计者：梁泽铠，周建鸿，杨沛，陈升金，王洁设计者：梁泽铠，周建鸿，杨沛，陈升金，王洁班别：班别：20112011 级级 10 10 班班指导老师：李蓉指导老师：李蓉【目的要求目的要求】1.学习用输尿管插管法记录尿量的方法及经动脉插管法测血压的方法。 。2.在急性实验条件下通过施加不同的处理因素，观察尿量及其成分的变化，分析各因素对尿生成的影响。【立题依据立题依据】1、王玢，左明雪主编人体及动物生理学（第二版）. 北京: 高等教育出版社,2001：3313592、解景田，赵静主编.生理学实验（第二版）. 北京: 高等教育出版社,2001：144145【基本原理基本
2、原理】尿生成的过程主要包括：肾小球的滤过作用，肾小管和集合管的重吸收作用以及肾小管和集合管的分泌作用，凡对这些过程有影响的因素都可影响尿的生成而引起尿量的变化。如静脉快速注入大量生理盐水，因为血浆蛋白被稀释，血浆胶体渗透压下降，肾小球有效滤过压增加，加之肾小球血浆流量也增加，滤过率增加，所以尿液生成增加。近端小管对葡萄糖的重吸收有一定限度，称为肾糖阈（160180mg/ml）。当葡萄糖的注射量超过肾小管的吸收极限，小管液中就会有葡萄糖，进而小管液的溶质浓度增加，渗透压增加，妨碍了肾小管特别是近端小管对水的重吸收，小管液中的 Na+浓度被稀释而降低，故 Na+的重吸收也减少，NaCl 及水的排出
3、均增加，所以尿量增加。肾上腺素能使肾血管收缩，肾血流量减少，从而使肾小球毛细血管血压降低，有效滤过压降低，肾小球滤过率减小，尿的生成减少。Na2SO4作为一种溶质可以透过肾小球滤过膜进入肾小管，家兔的肾小管的溶质浓度增加，渗透压增加，妨碍了肾小管特别是近球小管对水的重吸收，小管液中的 Na+浓度被稀释而降低，故 Na+的重吸收也减少，NaCl 及水的排出均增加，所以尿量增加。迷走神经属于混合神经，其中内脏运动神经纤维有分支分布于心肌，而内脏感觉神经纤维则终止于延髓的孤束核，而后者又有纤维与延髓内侧的“减压区”联系。当迷走神经的内脏运动神经纤维兴奋时，导致心脏活动的抑制，具体表现为心肌兴奋性降低
4、，心率明显减慢,血压下降，血流量减少，从而使肾小球毛细血管血压降低，这时有效滤过压降低，肾小球滤过率减小，尿的生成减少，尿量减少。垂体后叶素（抗利尿激素），它的主要作用是提高远曲小管和集合管上皮细胞对水的通透性，从而增加对水的重吸收，使尿液浓缩，尿量减少。此外，抗利尿激素也能增加髓袢升支粗段对氯化钠的主动重吸收和内髓部集合管对尿素的通透性，从而增加髓质组织间液的溶质浓度，提高髓质组织间液的渗透浓度，有利于尿液浓缩。【实验方案实验方案】实验对象：实验对象： 家兔 实验材料：实验材料： Medlab 生物信号采集系统、压力换能器、电子刺激器、刺激电 极、计滴器、哺乳类动物手术器械一套、兔手术台、动
5、脉夹、动脉插管、膀 胱漏斗、输尿管插管、丝线、铁支架、培养皿、试管、酒精灯、注射器 （1ml、20ml）、静脉滴注管、生理盐水、20葡萄糖、110000 去甲肾上 腺素、0.5肝素生理盐水、3戊巴比妥钠、1呋噻米、垂体后叶素、酚红 和班氏试剂。 实验步骤：实验步骤： 1.实验计算机参数设计。打开计算机，启动 Medlab 生物信号采集处理系统， 直接选择“动脉血压记录”定制实验。 2麻醉与固定 称家兔体重，沿耳缘静脉注入 3戊巴比妥钠 1ml/kg。动物 麻醉后，将它仰卧固定在手术台上，剪去颈部、左腰背部和下腹部的毛。 3.手术 （1）颈部手术 沿颈正中线切开皮肤 810 厘米，钝性分离皮下组
6、织和肌肉，暴露气管。 在气管下方穿一条丝线备用，寻找甲状软骨，在其尾端 23cm 处作一倒“T”形切口，插入气管插管，用线将其结扎固定。在气管的两侧，分离出右侧迷走神经和左侧颈总动脉，穿线备用。把充满肝素生理盐水的动脉插 管插到颈总动脉内，结扎固定，记录血压的变化。手术结束后，用温生理 盐水纱布覆盖创面。动脉插管通过血压传感器连于 Medlab 系统的通道 1。 （2）腹部手术 自耻骨联合上缘向上沿正中线作 4 厘米长皮肤切口，再沿腹白线剪开 腹壁及腹膜，找到膀胱，将膀胱翻至体外。再于膀胱底部找出两侧输尿管， 认清两侧输尿管在膀胱开口的部位。小心地从两侧输尿管下方穿一丝线， 将膀胱上翻，结扎尿
7、道。然后在膀胱顶部血管较少处剪一小口，插入膀胱 漏斗，用线结扎固定，漏斗口应对着输尿管开口处并紧贴膀胱壁。膀胱漏斗另一端用导管连接至记滴器。 （3）分离股动脉，股静脉及静脉插管在左腹股沟处切开皮肤 4cm，分离出股动脉，在动脉下方穿两条线备 用；在右腹股沟处切开皮肤 4cm，分离出股静脉，结扎固定，旋动滴注管 活塞，观察管内的生理盐水能否顺利流入静脉。 4.安装好装置后，接通计算机通道，记录给药前的血压，尿量的指标。 5. 观察项目 5.1 股静脉插管注射 38生理盐水 25ml， （速度稍快些） ，观察血压及尿量的变化。 5.2 待尿量平稳后，股静脉插管注射 l：10000 的肾上腺素 0.
8、5ml，观察血 压及尿量变化。5.3 待尿量平稳后，股静脉插管注射 20%葡萄糖 15ml，观察血压及尿量的变化5.4 待尿量平稳后，股静脉插管注射硫酸钠 2ml，观察血压及尿量的变化。5.5 待尿量平稳后，结扎并剪断右侧迷走神经，用中等强度的脉冲电流刺激其外周端 2030s， ，观察血压及尿量的变化。 5.6 待尿量平稳后，股静脉插管注射垂体后叶素 0.4ml，观察血压及尿量的变化。6.将实验结果记录于表 1 中。实验后处理实验后处理按照表 1 记录数据 表 1：家兔血压和尿生成记录表 实验项目血压(mmHg)尿量（滴/分） 正常对照静脉注射生理盐水 （20ml） 静脉注射 20葡萄糖 （5
9、ml） 肾上腺素（0.3ml）注射硫酸钠（2ml）刺激右侧迷走神经外 周端 静脉注射垂体后叶素 （3U）【实验预测结果实验预测结果】1 耳缘静脉快速注射生理盐水后，尿量增加。静脉快速注入大量生理盐水，家兔的尿量增加，这是因为血浆蛋白被稀释，血浆胶体渗透压下降，肾小球有效滤过压增加，加之肾小球血浆流量也增加，滤过率增加，尿液生成增加。2 静脉注射葡萄糖，尿量增加。静脉注入葡萄糖，家兔的尿量增加。近端小管对葡萄糖的重吸收有一定限度，称为肾糖阈（160180mg/ml）。实验中葡萄糖的注射量已经超过肾小管的吸收极限，小管液中就会有葡萄糖，进而小管液的溶质浓度增加，渗透压增加，妨碍了肾小管特别是近端小
10、管对水的重吸收，小管液中的 Na+浓度被稀释而降低，故 Na+的重吸收也减少，氯化钠及水的排出均增加，尿量增加。3 静脉注射肾上腺素，尿量减少。注射肾上腺素，家兔的尿量减少。这是因为，肾上腺素能使肾血管收缩，肾血流量减少，从而使肾小球毛细血管血压降低，有效滤过压降低，肾小球滤过率减小，尿的生成减少，尿量减少。4 注射硫酸钠溶液，尿量增多。家兔在注射硫酸钠溶液，尿量增多。因为向家兔的体内注入硫酸钠后，家兔的肾小管的溶质浓度增加，渗透压增加，妨碍了肾小管特别是近球小管对水的重吸收，小管液中的 Na+浓度被稀释而降低，故 Na+的重吸收也减少，氯化钠及水的排出均增加，尿量增加。5 剪断右侧迷走神经，
11、刺激外周端，尿量减少。家兔被剪断右侧迷走神经，刺激外周端，尿量减少。这是因为迷走神经属于混合神经，其中内脏运动神经纤维有分支分布于心肌，而内脏感觉神经纤维则终止于延髓的孤束核，而后者又有纤维与延髓内侧的“减压区”联系。当迷走神经的内脏运动神经纤维兴奋时，导致心脏活动的抑制，具体表现为心肌兴奋性降低，心率明显减慢,血压下降，血流量减少，从而使肾小球毛细血管血压降低，这时有效滤过压降低，肾小球滤过率减小，尿的生成减少，尿量减少。6 静脉注射垂体后叶素，尿量减少。静脉注射垂体后叶素，尿量减少。因为垂体后叶素（抗利尿激素），它的主要作用是提高远曲小管和集合管上皮细胞对水的通透性，从而增加对水的重吸收，
12、使尿液浓缩，尿量减少。此外，抗利尿激素也能增加髓袢升支粗段对氯化钠的主动重吸收和内髓部集合管对尿素的通透性，从而增加髓质组织间液的溶质浓度，提高髓质组织间液的渗透浓度，有利于尿液浓缩。【注意事项注意事项】1.实验前要做好压力换能器的定标工作，这对正确读数非常重要。动脉插管前， 要先用肝素生理盐水液充盈压力换能器，进行“零点设置”，然后再插管。实 验过程中不要再随意进行“零点设置”。 2.分离迷走神经和颈总动脉时小心不要戳破动脉。 3.压力换能器放置的位置与动物心脏要保持在同一水平。 4.注意每种药物的使用顺序及用量，注射器不能混淆使用。 5.掌握好每次给药时间，每种药物给药前要等血压稳定。【创新点创新点】1.本实验通过股静脉插管给药代替耳缘静脉给药，避免了多次耳缘静脉给药导 致耳朵水肿影响下次给药的问题。 2.本实验所需动物模型建立容易且有助于临床研究。 3.本实验通过多种药物对家兔尿生成的影响，复习肾脏尿生成知识。
