人乳头瘤病毒感染是宫颈癌的主要致病原因之一多数宫颈

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1、检验科开展 HPV 分型(21 个型)检测1人乳头瘤病毒感染是宫颈癌的主要致病原因之一。多数宫颈癌标本中可检测到 HPV 病毒 基因组或基因片段。迄今,已发现 110 余种 HPV,其中 20 余种与人类的宫颈癌相关,并至 少有 7 个基因型在临床上很重要,即 6、11、18、31、33、35 型。其中,6、11 型主要与尖 锐湿疣有关,称为低危型;31、33、35 与介于良性病变及恶性病变之间的损伤有关,称为 中间型;16、18 型与宫颈癌有关,称为高危型。HPV 感染宿主细胞后,可以两种形式存在于 宿主细胞中:即细胞染色体的整合状态和染色体的游离状态。宫颈癌细胞中的 16、18 型 DNA

2、 绝大部分呈整合状态,在浸润性宫颈癌中,则以整合和游离状态共存。 在生殖道病灶中的人乳头瘤病毒(HPV-DNA) ,对宿主、组织和细胞有高度的特异性。他 们引起生殖道的良性和恶性增生性疾病。它们属于早期转录基因组区域,具有重要的调控作 用。其中 HPV-16 型常引起宫颈鳞癌,HPV-18 常引起宫颈腺癌。 PCR 技术用于人乳头瘤病毒 DNA 的检测,是目前 HPV-DNA 主要的检测方法,灵敏度较高, 本院检验科 PCR 室于 2006 年 9 月 1 日获得了卫生部颁发的临床基因检测许可证。利用凯普 导流杂交技术进行 HPV 分型检测,对宫颈肿瘤的初筛、轻微异常和不确定宫颈涂片(如 AS

3、CUS)的 筛选分流、判断宫颈病变可否治愈、是否退出筛查、宫颈上皮内高度病变和癌症治疗后的监 测有很大价值。 标本采集:标本采集: (1)宫颈标本:病人仰卧于检查床上,由医生以窥阴器或阴道张开器暴露宫颈,然后 使用专用的 HPV 采样刷置于宫颈口采集标本;(最好在取样前先用棉签擦去宫颈分泌物) , 将专用宫颈刷置于宫颈口,轻轻搓动宫颈刷使其顺时针旋转 5 圈;慢慢取出宫颈刷,将其放 入标有病人编号的取样管中,取样管内已加有专用细胞保存液,折断其刷头入管中,拧紧瓶 盖。样本一经采集,则应尽可能快的送至检测实验室;如若不能马上送检样本,于 4保存, 在 2 个星期之内进行检测。 (2)疣体样本 :

4、使用专用手术剪刀,剪下疣体组织放入 0.5ML 细胞保存液(或无菌生 理盐水)中。或者使用棉拭子反复摩擦疣体直至疣体出血,然后将棉拭子放入 0.5ML 细胞保 存液中,密闭送检。 (3)男性尿道样本:使用细小的尿道拭子,插入男性尿道 2-4CM,然后捻动尿道拭子, 最后将尿道拭子放入 0.5ML 的细胞保存液中,密闭送检。 (4)女性尿道样本:首先使用无菌生理盐水棉球洗净尿道口,再用棉拭子插入尿道约 2CM,然后捻动拭子,最后将拭子放入 0.5ML 的细胞保存液中,密闭送检。采集尿道样本时, 受检者必须在采集前 2 个小时禁止小便。 项目信息:项目信息:HPV 分型检测,代码 25040300

5、3-27,收费 320 元/次。相关背景资料:相关背景资料: 子宫颈癌是妇科恶性肿瘤之一,发病率在女性恶性肿瘤中居第二位,仅次于乳腺癌,严重 威胁女性生命。据统计,我国每年有 10 万新发病例,每年约 2 万人死于宫颈癌。近年来,子 宫颈癌病因学有了突破性进展,种种资料显示,子宫颈癌的致癌原因是感染人乳头瘤病毒 (HPV) 。 HPV 是一组双股 DNA 病毒,目前确定的 HPV 类型有 110 余种。有关宫颈癌的病因学研究 表明,100%的子宫颈癌患者的高危型 HPV 感染为阳性。 宫颈癌是目前人类所有癌症中唯一病因明确,可以预防、可以治疗、治愈的癌症。要控 制和减少宫颈癌的发生,关键是预防

6、和消除 HPV 感染。当前筛查是主要手段。筛查对象为有 三年以上性行为,或 21 岁以上有性行为的妇女。起始年龄:经济发达地区为 2530 岁,经 济欠发达地区为 3540 岁,高危人群的起始年龄应相应提前,65 岁以上危险性极低。 宫颈癌筛查方法有多种:1、肉眼观察法(VIA) ,此法对筛查绝经后的妇女很少有效, 灵敏度和特异度均较低,VIA 筛出的病例大部分是浸润性癌和早期癌而非癌前病变。2、传统检验科开展 HPV 分型(21 个型)检测2巴氏细胞学涂片,此法为降低宫颈癌危害作出了巨大贡献,但受取材方法、涂片制作、染色 技巧、阅片水平等因素影响,准确度较低,结果不能重复。3、阴道镜检查法,

7、阴道镜可发 现肉眼看不见的亚临床病变,并在可疑病变处定位活检,可以做到早期诊断。但阴道镜的敏感 度和特异度均较低,尤其是特异度,不宜作为筛查的方法。4、薄层液基细胞学技术,液基细 胞学检查改变了原有的取材方法,提高了样本的收集率并使细胞均匀、单层分布在玻片上, 异常细胞容易被发现,明显提高了发现低度(CIN级)和高度病变(CIN-级和原位癌) 的敏感度,从而提高阳性率和诊断的准确率。5、HPV 分型检测,检测方法有斑点印迹法, 荧光原位杂交法,Southern 杂交法,多聚合酶链反应(PCR)法,和杂交捕获法等。 国家卫生部委托中国癌症研究学会,组织全国 20 余位妇科、肿瘤和病理专家,于 2

8、003 年制定了三套宫颈癌筛查方案,在中国不同条件地区使用,其中首选方案是“高危 HPV 检测 +液基细胞学检查” 。薄层液基细胞学检测和 HPV 分型检测均为阴性者,阴性预测值可达 99100%,可将筛查间隔延长到 8-10 年,HPV-DNA 检测+薄层液基细胞学检查是宫颈癌最可 靠和最有效的筛查方法。 大量研究结果显示人乳头瘤病毒(HPV)是宫颈癌的主要病因,研究发现 99%以上的宫颈癌 存在 HPV 感染。HPV DNA 检测能大大改进目前进行的宫颈癌和宫颈上皮内瘤变中细胞学筛查 的有效性。目前被鉴定出的 HPV 类型已有 100 种以上,依其致病性不同将其分为高危和低危 两大类,高危

9、型 HPV 如 HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68 等,与宫 颈癌及宫颈上皮内瘤变的发生相关;低危型 HPV 如 HPV6、11、42、43、44 等,常引起生殖道 湿疣等良性病变。人们已把目光聚焦在高危型 HPV DNA 的检测上,并用于对宫颈上皮内瘤 变筛查。 高危型 HPV DNA 检测可有效地、极大地减少细胞学检查的假阴性结果。传统的宫颈巴氏 涂片检查存在一定比例的假阴性结果,通常达 10%20%甚至更高,以致于造成对 CIN 及宫 颈癌的漏诊。杂交捕获法对高危型 HPV 检测的阴性预测值达 99.7%,可减低或消除由于巴氏 涂片假阴性所

10、造成的漏诊。当 HPV 检测阳性而细胞学涂片正常的妇女,不能被认为是假阳性, 再次阅片时可发现 5%7%有细胞学涂片异常。荷兰的资料显示,从这组人群中有 10%在 4 年 内发展为 CIN,HPV 检测可预测 CIN 发病风险。 作为对细胞学检查提示不典型鳞状细胞(ASCUS)和低度鳞状上皮内病变(LSIL) 的随访分 流,减少阴道镜检查及病理活检率。在宫颈细胞学检查中存在不确定结果,如 ASCUS,大量的 研究结果显示 ASCUS 可能是反应性变化,也可能隐藏着 CIN,对 ASCUS 患者应 46 月后重复 细胞学检查,连续 3 次正常后改为每年定期复查,若细胞学结果阳性立即阴道镜和病理活

11、检。 这其中大约只有 10%20%转变成 CIN,大部分妇女在复查等待中承受着严重的焦虑及精神 压力。美国一项涉及 3488 例 ASCUS 的多中心随机试验结果显示,对于 ASCUS 的妇女,杂交捕 获试验是一种很好的选择,与单纯重复细胞学检查方法比较,对于发现 CIN或宫颈癌有更高 的敏感度和特异性,其检出 CIN 的敏感度比单纯巴氏涂片复查法要高 10%15%,且特异性 没有降低,这将大大减少复查巴氏涂片和阴道镜检查的数量。 HPV DNA 检测与细胞学检查联合进行宫颈癌及宫颈上皮内瘤变的筛查,其筛查效率高于 单独使用细胞学检查。研究结果提示联合两种方法的检测率几乎可达 100 % ,且

12、可延长筛查 间隔,因为从 HPV 感染发展为 CIN 或宫颈癌需经历约 510 年。2003 年卫生部疾病控制司委 托中国癌症研究基金会组织有关专家制定的宫颈癌筛查及早诊早治指南建议,有 3 年以 上性行为或 21 岁以上有性行为的妇女应每年做 1 次细胞学检查,连续两次细胞学正常可改至 3 年后复查;连续 2 次 HPV 检测和细胞学正常可延至 58 年后复查。 作为宫颈病变治疗后的随访指标。由于 HPV 是 CIN 的主要病因,利用 HPV DNA 监测治疗 效果、评价不同治疗方法是可行的。研究表明子宫颈锥切后应用 HPV DNA 检测可预测残余 CIN,并具有很高的灵敏度和阴性预测值,术后 6 月的 HPV 阳性率比细胞学异常结果更具预测 价值。检验科开展 HPV 分型(21 个型)检测3检 验 科 200831

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