常见病原微生物的病原学和实验诊断

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1、常见病原微生物的病原学和实验诊断几个相关的基本概念 (一)两类传染病 1新发现传染病( EID,emergine disease ):1975年起至今,人或畜间由 新种、新型的病原微生物侵入机体后,或现有病原微生物感染范围扩大 或变异引发的一类疾病,并造成一定的公共卫生问题。(全球200种, 中国 120种人兽共患病)全球共有42种新发的传染病,病毒病22 种, 细菌性 12 种,寄生虫 7种,朊毒体 1 种。 2再出现传染病( REID):近 20 来年,过去曾经猖獗一时的传染病,由 于采取措施,得到了控制,可又回升的一类传染病。世界上共20余 种,肺结核为其中典型的疾病,此外还有疟疾、血吸

2、虫。1981年准备宣布肺结核消灭,可5年后发现抬头,改为脊髓灰质炎。 目前有 1/3 的,现患 2000万,死 300多万,中国 5 乙人口感染, 600 1000万感染,每年新发100万,死 2530万。 美国 CDC 装备强; SARS 是坏事,也是好事。 (二)微生物与病原微生物及其分类 1微生物 特点:小、结构简单、肉眼看不见、低等生物。 分类: a.非细胞型微生物:没有细胞结构及没有独立的酶代谢系统,寄生在 宿主的细胞或组织中。如病毒。b.原核细胞型微生物:有基本的细胞结构、不完整、有原始核、无核 膜无核仁、不能进行有丝分裂、无完整的细胞器、一般有核糖体。如鼠疫 菌、布氏等细菌、立克

3、体、衣原体、支原体、埃立克体等。c. 真核细胞型微生物:完整细胞结构、有核仁、核膜、能进行有丝分 裂、有完整的细胞器等。如真菌等。 2病原微生物 能引起人和脊椎动物病理改变的、引起病理损伤或出现临床表现的微生物。 (人体在出生后 46 小时内是无菌的) 种类: a病毒:人类认识的晚,种群多,还在不断出现新的,现出现亚病毒 (比病毒还小的物体)。病毒结构简单。遗传物质为核算(DNA/RNA )、单 一核酸、有伴随蛋白(衣壳)、包膜(为宿主的细胞内物质与病毒相结合所形 成的)。比病毒小的物质:以前叫亚病毒,现认识为三类:卫星病毒(如丁肝 病毒:只有核酸与衣壳,包膜与乙肝病毒公用)、类病毒(植物病毒

4、:无包 膜)、朊病毒(或称朊毒体:无核酸、只是一个感染蛋白颗粒,2930KD 澳 大利亚以前的一个族fice 族库鲁病、柯雅氏病、疯牛病、羊瘙痒病、雪雕脑 病、猫脑病等 是人和动物的一种正常蛋白质,正常情况下为3335KD,由正 常体细胞产生,立体结构后改变成感染性的,类似二分列方式繁殖)b细菌:是原核细胞型微生物、无完整核膜核仁、无完整细胞器。衣 原体、支原体、立克氏体等都有类似结构,是广义上的细菌。狭义上的细菌为:具备广义的特点,且能在人工培养基培养,且有细胞壁的微生物。(支原 体能够培养)麻风杆菌虽不能培养,但是作为细菌的一种特殊对待。c真菌。霉菌,皮肤真菌病厉害。 毒力(或称致病力):

5、产生毒素的能力,侵袭力及粘附力、以及机体的生 存力。如钩端螺旋体的侵袭力强。膜的粘附力研究比较流行。布菌有十几种抗 氧化酶能力,因此具有在机体的生存能力。(三)传染病监测1968年 21界 WHO 世界卫生大会定义的,对疾病的动态分布及其影响因 素进行长期的、细致的、连续的、有计划的观察和收集资料信息,并进行分 析、综合判断、反馈给有关部门,制定控制计划、策略和措施,提供依据。 几个容易混淆的概念:控制:已经发生,如何压下该病,重点是控制 (1、核实、 2、简单措施、 3、现场流调、 4、大规模控制措施);预防:未发 生传染病时候的措施,有条不紊宣传、打苗等等;防治:预防与治疗;防制: 预防与

6、控制。一、采样、保存和运送 (附红细胞体病) (一)采样 注意事项: 1时间性:及时、适时(采集的时间要在合适的时候)2 针对性:目的明确的采样(肺结核采痰)、不明确的采样(比较 难,面需要广一些:包括人群和采样的东西)3防护和消毒:4无菌操作:5标记: (二)保存和运输 冷藏、包装、专人护送。小心溶血和变性。二、病原学实验室诊断 (一)样品 (二)处理 几个过程: 1洗脱(PBS/肉汤等) 2提取 3浓缩(使增殖达到最小感染量) 4抗杂菌 (三)细菌 经过以上几个过程后,进行1 分离培养,总体说比病毒简单(能看见,能在培 养基上培养),由于不同细菌需要不同的营养物,因此也不是很容易培养。羊

7、血清与牛血清是不同的。稳定性差,容易变异(至少光滑型变成粗糙型SR) 2鉴定:初步鉴定:确定属(若深入则到种)包括:形态学(菌落:如布菌为露 滴状、半透明;染色:显色方法、暗视野)、阳性血清(混和)、初裂? (噬菌体)、 G+C比例(各种生物的GC比是不一样的,比如布菌病的GC 比为 56或 58)、DNA 同源性测定(经过变性解链单体混和若能够 结合成双螺旋,则提示有同源性) 最终鉴定:生化鉴定(包括:糖代谢、蛋白氨基酸、嗜盐、毒理试验 等) (四)病毒 经过相同的几步后,需要 1培养:动物、传代、鸡胚 2鉴定:初步鉴定: 非实验室: 1材料(包括取材部位等) 2 症状 3 流行病学特征 实

8、验室: 5氟脱氧尿苷:敏感DNA,不敏感 RNA. 乙醚: 红血球:狂犬鹅血球 流感及腮腺炎各种血球都能疑集(绵 羊、猴等)最终鉴定:血清反应是最终鉴定(与已知的病毒进行反应进行印记反应 或者与抗病毒血清反应、中和试验)四、血清学诊断 (一)特异性:一种抗原对一种抗体(抗原抗体电荷相反、结构互补)、(海 地例子以及) (二)可逆性:抗原抗体的结合是可逆的。 (三)阶段性:第一阶段:抗原抗体结合 第二阶段:电介质作用为第二阶段。第一阶段后的产物(免疫 复合物)电介质(盐)聚合物 (四)比例性:需要合适的比例,抗原抗体才能产生最好的反应。等价带反 应量最强是一个类似正态分布的曲线:抗原过剩带等价带抗体过剩带。

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