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1、常用固定液的配制1. 福尔马林 -醋酸 -酒精固定液 (FAA) 50%或 70%酒精 90ml + 冰醋酸 5ml + 福尔马林 (37%40% 甲醛 )5ml 可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。幼嫩材料用 50%酒精代替70%酒精，可防止材料收缩。若材料坚硬，可略减冰醋酸，略增福尔马林。若材料易收缩，可稍增加冰醋酸。久置时另加入5ml 甘油以防蒸发和材料变硬。此液又可作保存液。固定时间最多10h。如果用在植物胚胎的材料上，改用下面的配方，效果较好： 50%酒精 89ml + 冰醋酸 6ml + 福尔马林5ml 2. 福尔马林 -丙酸 -酒精固定液（
2、FPA）福尔马林5ml + 丙酸 5ml + 70% 酒精 90ml 固定一般的植物组织，通常固定824h，可长久保存。3. 酒精 -醋酸 -氯仿固定液（卡诺固定液，Carnoy fixative ）配方：纯酒精3 份 + 乙酸 1 份配方：纯酒精6 份 +乙酸 1 份 + 氯仿 3 份配方：甲醇6 份 +乙酸 1 份 + 氯仿 3份适用于植物组织和细胞学材料，为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。固定时间不宜过久。4. 酒精 -福尔马林固定液福尔马林26（610） ml + 70% 酒精 100ml 固定植物一般组织，尤其适用于萌发的花粉管的固定。通常固定24h，亦可长久保存。5. 酒精 -福
3、尔马林 -甘油固定液95%酒精 150ml + 5% 福尔马林100ml + 甘油 50ml 此液也可长期储存材料。6. 铬酸 -醋酸固定液根据固定对象的不同，可分为强、中、弱3 种配方：（1）弱液配方：10%铬酸 2.5ml + 10% 醋酸 5ml + 蒸馏水 92.5ml （2）中液配方：10%铬酸 7ml + 10% 醋酸 10ml + 蒸馏水 83ml （3）强液配方：10%铬酸 10ml + 10% 醋酸 30ml + 蒸馏水 60ml 弱液配方用在固定较柔软的材料，如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。固定时间较短，一般为数小时，最长可固定1224h，但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至
4、1h。中液配方用于固定根尖、茎尖、未成熟子房和胚珠等。为了易于渗透，可在此液中加入2%的麦芽糖或尿素。固定时间1224h。强液配方用于固定木质根、茎、成熟子房等。为了易于渗透，可在此液中加入2%的麦芽糖或尿素。固定时间1224h 或更长。7. 铬酸 -醋酸 -福尔马林混合液这 3 种药品混合在一起所配成的各种固定液，通常称纳瓦申固定液（Nawashin fixative ） ，简称 Craf。配方见下表：常备液纳瓦申原液 (ml) 纳瓦申固定液(ml) 桑弗利斯液(ml) 甲液1%铬酸40 40 40 10%铬酸15 8 10 13 铬酸15 20 20 60 70 冰醋酸10 8 蒸馏水75
5、 45 40 40 32 20 79 乙液福尔马林40 10 10 10 20 30 64 蒸馏水60 90 90 80 80 70 36 甲、乙两液均为贮备液，使用之前才将二者混合。适用于组织学和细胞学的研究材料。柔嫩而含水多的材料，可选用或固定，坚韧而成熟的材料，可用高浓度的或，一般材料多用。制作染色体和有丝分裂的纺锤体标本时，常用桑弗利斯固定液。、固定液的固定时间为1248h，桑弗利斯液固定时间为46h。8. 铬酸 -锇酸 -醋酸固定液（ Flemming fixative ）强液：10%铬酸水溶液3.1ml + 2% 锇酸的铬酸（2%） 水溶液 12ml + 10% 醋酸水溶液30ml
6、 + 蒸馏水11.9ml 中液： 10%铬酸水溶液0.33ml + 2% 锇酸的铬酸 （2%）水溶液 0.62ml + 10% 醋酸水溶液3ml + 蒸馏水 6.27ml 弱液： 10%铬酸水溶液1.5ml + 2%锇酸的铬酸 （2%）水溶液 5ml + 10% 醋酸水溶液1ml + 蒸馏水 96.5ml 此固定液需现用现配。固定2348h。可用于各种植物组织的固定。9.Lichents固定液1%铬酸水溶液15ml + 冰醋酸 5ml +福尔马林80ml 此固定液适用于固定丝状藻类和真菌1. 番红水溶液番红 0.1g 溶入蒸馏水 ,定溶至 100ml 。用前过滤。2. 番红乙醇溶液番红 1g
7、溶入 50%（或 95%）酒精 ,定溶至 100ml。用前过滤。3. 固绿染液固绿 0.1g 溶入 95%酒精，定溶至100ml 。4. 碘-碘化钾染液碘化钾溶入100ml 蒸馏水，再加入1g 碘，溶解后即可使用。5. 苏丹（或）染液将 0.1g 苏丹或溶解在50ml 丙酮中，再加入70%酒精 50ml。6.改良苯酚品红染液原液 A：将 3g 碱性品红溶入100ml 70%酒精，此液可长期保存。原液 B：将 10mlA 液加入到90ml 5%苯酚水溶液中。原液 C：将 55mlB 液加入到6ml 的冰醋酸和6ml 的 38%的甲醛中。染色液：取C 液 20ml，加 45%冰醋酸 80ml，充分
8、混匀，再加入1g 山梨醇，放置14 天后使用，可保存3 年。7. 间苯三酚染液将 5g 间苯三酚溶入100ml 95% 酒精（若溶液呈黄色，即为失效）。8. 中性红染液将 0.1g 中性红溶入100ml 蒸馏水，用时稀释10 倍。9. 钌红染液将 510mg 钌红溶入2550ml 蒸馏水，现用现配。10.龙胆紫染液将 0.2g 龙胆紫溶入100ml 蒸馏水。现常用结晶紫代替。必要时可将医用紫药水稀释5 倍后代用。11.铁醋酸洋红染液先将 100ml 45%醋酸水溶液置入200ml 的锥形瓶中煮沸，移去火苗， 然后慢慢地分多次加入1g 洋红粉末（切记不可一次倒入）。待全部倒入后，再煮沸12min
9、 ，并悬入一生锈的小铁钉于染液中，过1min 后取出，使染色剂略含铁质，以增加染色性能。静置12h 后过滤于棕色瓶中备用（置于避光处）。12.苏木精染液苏木精的配方很多，常用的有如下3 种：配方：苏木精水溶液0.5g 苏木精溶入100ml 煮沸的蒸馏水中，静置24h 后可使用。配方：代氏苏木精（Delarfields haematoxylin）甲液：苏木精1g + 无水酒精6ml 乙液：硫酸铝铵（铵矾）10g + 蒸馏水 100ml 丙液：甘油25ml + 甲醇 25ml 分别配制甲、乙两液，将甲液一滴滴地加入乙液中，充分搅拌后，放入广口瓶中用纱布蒙住瓶口，置于温暖和光线充足处710 天，再加
10、入丙液，混匀后静置12 月，至颜色变为深紫色后，过滤备用，可长期保存。配方：爱氏苏木精（Ehrlich s haematoxylin）苏木精 1g + 无水或 95%酒精 50ml + 蒸馏水 50ml + 甘油 50ml + 冰醋酸 5ml + 硫酸铝钾（钾矾） 35g。配制时，先将苏木精溶于酒精中，然后依次加入蒸馏水、甘油和冰醋酸，最后加入研细的钾矾， 边加边搅拌，直到瓶底出现钾矾结晶为止。混合后溶液颜色呈淡红色，放入广口瓶中， 用纱布封口， 自然氧化12 月，至颜色变为深红色时即可过滤备用，可长期保存。13.席夫试剂（ Schiff s regent）将 0.5g 碱性品红溶入煮沸的蒸馏
11、水，搅拌使其充分溶解。冷却至50时，过滤于棕色细口瓶中，加入10ml1mol/L 盐酸。冷却至25左右，加入1g 偏亚硫酸钾或钠（Na2S2O5 或K2S2O5） ，振荡使其溶解，密封瓶口，置于黑暗低温处过夜。次日检查，若染色液透明无色或呈淡茶色，即可使用。若染色较深，可加入少量优质活性炭（0.52g） ，振荡 1min，置于4冰箱中过夜，过滤使用。此液配好后，应塞紧瓶塞，外包黑纸，贮藏于冰箱中。14.硫堇染液将 0.25g 硫堇粉末，溶于100ml 蒸馏水中，即可使用。使用此液时。需用微碱性自来水封片或用 1%NaHCO3 水溶液封片，能产生多色反应。15.亚甲基蓝染液0.1g 亚甲基蓝溶入
12、100ml 蒸馏水即可。16.詹纳斯绿B（Janus green B）染液5.18g 詹纳斯绿溶入100ml 蒸馏水， 配成饱和水溶液。用时需稀释， 稀释倍数应视材料而异。17.苏木精 -曙红 (HE) 染液曙红（ Eosin） ，酸性染料，为最优良的动物细胞染料，与苏木精配合使用（复染）对动物组织进行对比染色。苏木精的染液的配方同上。曙红有以下配制方法：配方：曙红0.5g + 95%酒精 100ml 配方：曙红0.5g + 蒸馏水 100ml 配方：曙红0.5g + 95%酒精 25ml + 蒸馏水 75ml 18蛋白胶亦称梅氏蛋白的制作将鸡蛋一个打破让蛋清流入烧杯内，用筷子充分条大雪花状泡
13、沫，然后将它用双层纱布过滤到量筒中， 经数小时或一夜，过滤出透明的蛋白液，此时再加入等量的甘油，稍稍振摇使两者混合，最后加入麝香草酚（thymol ） （ 1:100）做防腐作用，可保存几个月到一年（4冰箱中） 。载玻片和盖玻片的清洗方法新载玻片的洗涤可分别将载玻片逐片投入到洗液中浸泡数小时，取出后先用自来水冲洗干净洗液，然后再用蒸馏水清洗两遍，最后投入95酒精中备用，用时取出在玻片用干净的纱布擦干即可。陈旧的切片标本，如再用其载玻片，可将其浸泡在肥皂水中煮30min 左右，然后在热水中洗去残留的树胶及浆糊等，用清水冲洗干净放入洗液中浸1h，然后自来水冲洗干净洗液，再用蒸馏水清洗两遍，最后投入95酒精中备用。
