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1、P21 蛋 白 在 人 肺 癌 中 表 达 及 意 义病 理 学 教 研 室 (046000) 王 翠 莲 杨 建 斌 贾 翠 玲中 国 医 科 大 学 李 宗 铉摘 要 采 用 免 疫 组 织 化 学 方 法 , 研 究 ras- P21 蛋 白 在 86 例 肺 癌 中 的 表 达 。 结 果 表 明 : P21蛋 白 表 达 总 阳 性 率 为 73. 5% , 其 中 鳞 癌 为 76. 5% , 在 腺 癌 中 表 达 为 64. 6% , 提 示 P21 蛋 白 是 肺癌 的 一 个 较 好 的 标 志 物 。 在 鳞 癌 和 腺 癌 之 间 以 及 肺 腺 癌 各 亚 型 之 间
2、 , P21 蛋 白 的 表 达 无 明 显 差 异(P 0. 05) , 在 高 、 中 、 低 分 化 肺 癌 之 间 阳 性 率 依 次 降 低 , 但 三 者 无 显 著 性 差 异 。 同 时 P21 蛋 白 表达 与 肿 瘤 大 小 (PT )、 淋 巴 结 转 移 (PN )和 远 处 转 移 (PM )均 无 关 。关 键 词 肺 癌 ; P21 蛋 白 ; 免 疫 组 织 化 学ras 癌 基 因 是 最 早 发 现 的 人 类 癌 基 因 , 其分 子 量 是 21, 000, 故 称 P21 蛋 白 。 正 常 的 ras 基因 变 为 癌 基 因 的 事 件 主 要 是
3、 点 突 变 , 进 而 导 致P21 蛋 白 单 个 氨 基 酸 的 替 换 , P21 蛋 白 的 内 源性 GT P 酶 活 性 丧 失 不 能 恢 复 到 “ 失 活 状 态 ” ,生 长 信 号 不 断 传 入 细 胞 内 , 最 后 使 细 胞 发 生 转化 和 恶 变 1 。 本 研 究 应 用 抗 ras 基 因 产 物 P21蛋 白 的 单 克 隆 抗 体 , 探 讨 P21 蛋 白 在 人 肺 癌 中表 达 及 其 临 床 病 理 意 义 。1 材 料 与 方 法1. 1 材 料 来 源 : 在 蜡 包 埋 肺 癌 组 织 86 例 , 其 中肺 鳞 癌 51 例 、 腺
4、癌 35 例 , 制 成 4 5um 厚 切 片备 用 。 抗 P21 蛋 白 单 克 隆 抗 体 及 S P 试 剂 盆均 购 于 迈 新 生 物 技 术 开 发 公 司 。 染 色 方 法 按 试剂 说 明 和 步 骤 操 作 , 以 0. 01M PBS 代 替 一 抗 为空 白 对 照 。1. 2 结 果 判 定 标 准 : 以 胞 浆 内 出 现 棕 黄 色 颗 粒为 阳 性 , 反 之 为 阴 性 。1. 3 统 计 学 分 析 : 经 卡 方 检 验 。2 结 果P21 蛋 白 阳 性 染 色 定 位 于 胞 浆 , 呈 棕 黄 色 ,空 白 对 照 为 阴 性 。 肺 鳞 癌
5、阳 性 率 较 高 为 76.5%。 (39 51) , 腺 癌 的 阳 性 率 较 低 为 65. 7%(23 35) , 总 阳 性 率 为 72. 1% (62 86)。 经 卡 方检 验 , 鳞 癌 、 腺 癌 以 及 腺 癌 各 型 之 间 , 其 阳 性 率均 无 显 著 差 异 。 (见 表 1、 表 2)表 1 P21 蛋 白 表 达 与 肺 癌 组 织 学 类 型 关 系组 织 学 类 型 例 数 (n) 阳 性 率 (% )鳞 癌 51 76. 5腺 癌 35 65. 7表 2 肺 癌 P21 蛋 白 表 达 与 腺 癌 各 亚 型 之 间 关 系腺 癌 组 织 学 亚 型
6、 例 数 (n) 阳 性 率 (% )腺 泡 状 腺 癌 13 46. 2乳 头 状 腺 癌 17 76. 5肺 泡 细 胞 癌 5 60. 0P21 蛋 白 表 达 在 不 同 程 度 分 化 肺 癌 , 其 阳性 率 不 同 , 随 分 化 降 低 而 阳 性 率 降 低 。 在 高 分 化肺 癌 P21 蛋 白 表 达 为 81. 8 (27 33) ; 中 分 化 为66. 7% (24 36) ; 低 分 化 为 64. 7 (11 17) , 但 三者 间 无 统 计 学 差 异 。 (见 表 3)表 3 P21 蛋 白 表 达 与 肺 癌 分 化 程 度 的 关 系分 化 程 度
7、 例 数 (n) 阳 性 率 (% ) P 值高 分 化 33 81. 83 0. 002中 分 化 36 66. 73 3 0. 012低 分 化 17 64. 73 高 分 化 与 低 分 化 之 比 ; 3 3 中 分 化 与 低 分 化 之 比同 时 P21 蛋 白 表 达 与 术 后 TNM 分 类 的 关系 , 经 对 本 组 51 例 肺 鳞 癌 进 行 术 后 TNM 分类 , 并 进 行 分 析 , 结 果 P21 蛋 白 表 达 阳 性 率 与肿 瘤 大 小 (PT )、 淋 巴 结 转 移 (PN )、 远 处 转 移(PM ) 均 无 关 系 。 PT 1 PT 4 阳
8、 性 率 分 别 为 70.1第 12 卷 第 1 期 长 治 医 学 院 学 报 V o l. 12 N o. 11998 年 3 月 JOU RNAL O F CHAN GZH IM ED ICAL COLL EGE M ar. 19986% (12 17) , 62. 5% (13 17) , P = 0. 335; 淋 巴结 转 移 阳 性 表 达 率 PN 0 PN 2 分 别 为 65. 6%( 21 32)、 100% ( 4 4)、 73. 3% ( 11 15) P = 0.251; 远 处 转 移 PM 0 为 72. 3% ( 34 47 ) ,PM 125% (1 4)
9、 P= 0. 057。3 讨 论ras 癌 基 因 家 族 由 H ras, K ras 和 Nras 组 成 , 这 三 种 基 因 均 编 码 一 种 高 度 同 源 的的 蛋 白 质 。 P21 蛋 白 在 细 胞 浆 内 合 成 , 经 翻 译 修饰 作 用 与 类 脂 结 合 , 再 转 移 至 质 膜 , 定 位 在 细 胞膜 的 内 表 面 , 从 而 发 挥 正 常 的 生 理 功 能 1 。 关 于P21 蛋 白 在 人 肺 癌 中 的 表 达 , 各 家 报 道 的 结 果不 同 , 但 普 遍 认 为 P21 蛋 白 的 表 达 主 要 见 于 非小 细 胞 肺 癌 2
10、, 本 研 究 应 用 H rasP21 蛋 白 在肺 癌 (非 小 细 胞 肺 癌 ) 其 阳 性 率 达 73. 5% , 由 此认 为 P21 蛋 白 是 非 小 细 胞 肺 癌 的 一 个 较 好 标志 物 。本 研 究 结 果 中 肺 癌 P21 蛋 白 的 表 达 在 组织 类 型 、 组 织 分 化 以 及 术 后 分 类 均 无 关 。 但 有 文献 报 道 腺 癌 高 于 鳞 癌 、 乳 头 状 腺 癌 高 于 腺 泡 状腺 癌 2 , 这 可 能 与 各 家 使 用 的 抗 体 特 异 不 同 有关 。 关 于 P21 蛋 白 表 达 与 组 织 分 化 的 关 系 , 有
11、文 献 报 道 在 中 高 分 化 的 肺 癌 其 阳 性 率 和 强 度 明显 高 于 低 分 化 癌 , 提 示 可 能 与 细 胞 的 分 化 有关 3 。 在 胃 癌 、 肝 癌 P21 蛋 白 的 表 达 在 高 分 化 癌中 最 常 见 , 表 达 也 最 强 , 但 在 前 列 腺 癌 中 4 , P21蛋 白 表 达 则 见 于 分 化 低 的 肿 瘤 , 所 以 认 为 P21蛋 白 表 达 与 原 发 器 官 有 关 3 。 本 研 究 肺 癌 P21蛋 白 表 达 随 分 化 程 度 降 低 而 阳 性 率 降 低 , 而 且高 分 化 癌 表 达 明 显 高 于 低 分
12、 化 癌 , 提 示 P21 蛋白 表 达 与 组 织 分 化 度 有 一 定 的 关 系 , 但 尚 需 进一 步 研 究 。本 文 P21 蛋 白 表 达 与 术 后 TNM 分 类 关 系研 究 表 明 之 间 无 关 , 但 有 关 文 献 报 道 , T 1 组 强阳 性 率 明 显 高 于 T 2、 T 3 组 , 认 为 P21 主 要 出 现在 肺 癌 的 早 期 4 。总 之 P21 蛋 白 表 达 在 肿 瘤 诊 断 中 的 意 义 ,已 有 很 多 报 道 , 但 在 肺 癌 中 P21 蛋 白 表 达 是 否特 异 性 标 志 物 , 目 前 尚 无 定 论 , 因 为
13、 缺 乏 相 应 正常 组 织 对 照 染 色 5 。 本 研 究 中 除 了 癌 细 胞 外 , 支气 管 粘 膜 上 皮 也 有 较 弱 着 色 , 与 癌 细 胞 相 比 差别 明 显 。 因 此 , 对 P21 蛋 白 的 表 达 强 度 进 行 定量 分 析 则 是 今 后 的 一 个 发 展 方 向 。参 考 文 献1. Rodenhuis S, Slebo s RJC. C linical significance of ras onco2gene activity in hum an lung cancer. Cancer Res, 1992 (supp l) ,52: 262
14、5- 92. 冯 作 化 , 陈 兆 聪 . P21 蛋 白 的 结 构 与 功 能 . 国 外 医 学 分 子 生 物学 分 册 , 1988, 16 (6) : 272 2753. 胡 勇 , 向 进 敏 , 赵 文 先 . rns 癌 基 因 研 究 进 展 . 中 国 肿 瘤 临 床 ,1991, 18 (3) : 187 904. H arada M , Do saka A k ita H ,M igamo to H , et al. P rogno sticsignificance of the exp ression of ras oncogens p roduct in non
15、-sm all cell lung cancer. Cancer, 1992, 19: 72 75. Gulbis B, Galand P. lmm unodetection of the P21 ras P rod2ucts in hum an no rm al and P reneop lastic tissues and so lid tu2mo rs: a review. H um Patho l 1993, 24: 1271 85(收 稿 : 1997- 10- 05)Sig if icance of P21 Prote in Expression in HumanL ung Can
16、cerD ep a rtm en t of p a thology chang z h i M ed ica l colleg eW ang Cu ilian. et a lAbstract T he exp ression of oncogene p ro tein P21 in 86 cases of lung Cancer w as studiedw ith S- P imm uno stain ing m ethod u sing an ti- P21 p ro tein monoclon an tibody. T he resu t isshow ed that the Po sitive rate w as 76. 4% in squamou s Cell carcinom a, and 64. 6% in adenocar22
