《2017届高考一轮：选修1-2《微生物的培养与应用》ppt课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2017届高考一轮：选修1-2《微生物的培养与应用》ppt课件（70页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、第 2 讲 微生物的培养与应用 基 础 知 识 回 顾 考纲要求 考纲分析 (1)微生物的分离和培育 ( ) (1)主要是无菌技术与培养基的种类及其应用 (2)培养基对微生物的选择作用 ( ) (2)主要是微生物的筛选、分离、纯化、鉴别技术 一、微生物的实验室培养 1 培养基 (1) 概念：人们按照微生物对 的不同需求，配制出供其生长繁殖的 。 (2) 成分：一般都含有 还要满足不同微生物生长对 ，特殊营养物质以及 的需求营养物质 营养基质 水、碳源、氮源、无机盐 氧气 2 将无菌技术的方法、类型和对象连线 3 大肠杆菌的纯化培养 (1) 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基过程：计算 溶化 灭菌 倒平
2、板。 (2) 纯化大肠杆菌的原理：在培养基上将细菌稀释或分散成 ，形成单个菌落，此菌落是由一个细胞繁殖而来的子细胞群体。 (3) 微生物的常用接种方法： 和稀释涂布平板法，接种过程仍然是 操作。 称量 单个细胞 平板划线法 无菌 二、土壤中分解尿素细菌的分离和计数 1 菌种筛选：使用 是唯一氮源的选择培养基培养。 2 统计菌落数目：常用方法有 、显微镜直接计数法。 3 细菌分离与计数的实验流程：土壤取样 微生物的培养与观察 细菌的计数。 尿素 稀释涂布平板法 配制培养基 三、分解纤维素的微生物的分离 1 纤维素酶 (1) 组成：一种 酶，它至少包括三种组分，即 。 (2) 作用：纤维素C 1
3、酶C X 酶 葡萄糖苷酶葡萄糖 复合 纤维二糖 2 筛选方法 (1) 方法：刚果红染色法，即通过是否产生 来筛选纤维素分解菌。 (2) 培养基：以 为唯一碳源的选择培养基。 透明圈 纤维素 3 实验流程 土壤取样：富含 的环境 选择培养：用 培养，以增加纤维素分解菌的数量 梯度稀释 涂布平板：将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落：产生 的菌落周围出现透明圈 纤维素 选择培养基 纤维素酶 一、判断正误 1 根据物理状态的不同，培养基只有液体培养基和固体培养基两种类型 ( ) 答案 2 培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种成分 ( ) 答案 3 在配制培养基 时，除
4、满足营养需求外，还应考虑 O 2 及特殊营养物质的需求 ( ) 答案 4 只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素 ( ) 答案 5 筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的唯一氮源 ( ) 答案 6 统计样品中的活菌一般用平板划线法 ( ) 答案 7 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变蓝，则说明筛选到分解尿素的细菌 ( ) 答案 8 刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物 ( ) 答案 9 纤维素酶只包括三种组分： C 1 酶、 C x 酶和葡萄糖 苷酶 ( ) 答案 10 筛选分解纤维素的微生物的培养基中是以纤维素为唯一碳源的选择培养基 ( ) 答案 二、基础填空题 (20
5、15 南昌模拟 ) 无菌操作是微生物接种技术的关键；传统发酵技术和微生物分离、纯化、应用过程及植物组织培养和动物细胞培养过程中，均要无菌操作。回答下列相关问题。 11 消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理 _ _ 。 皮肤 饮用水 牛奶 注射器 培养皿 接种环 培养基 果汁 酱油 手术刀 A B C D 以上全部 答案 A 12 配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行_ ，接种前要进行 _ ，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。 答案 调整
6、高压蒸汽灭菌 13 右图是利用 _ 法进行大肠杆菌接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。为达到这一目的，操作上应注意： 每次划线前要 _ ； 冷却后从上一区划线末端开始划； 首尾区 _ _ _ 。 答案 平板划线 灼烧接种环 不连接 ( 不重叠 ) 14 利用培养基不仅可以分离培养大肠杆菌，也可以进行植物组织培养。与大肠杆菌培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入 _ 。 答案 植物激素 15 有位同学在家制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素，结果发酵失败，原因可能是_ _ 。 答案 青霉素杀死了乳酸菌 网络要点强化 知识网络 答案 平板划线法 选择培养基 稀释
7、涂布平板法计数 重要语句 1 无菌操作技术包括消毒和灭菌，消毒包括煮沸消毒、巴氏消毒、化学药剂消毒和紫外线消毒等；灭菌包括灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。 2 培养基的制备包括计算、称量、溶化、灭菌、倒平板等步骤，倒置平板的目的是防止培养皿盖上的水滴滴入培养基造成污染。 3 大肠杆菌的纯化包括平板划线法和 稀释涂布平板法。平板划线法要求多次划线，稀释涂布平板法要求菌液要充分地稀释。 4 微生物的计数要求制作多个平板，且每个平板上能长出 30 30 0 个菌落。 5 尿素分解菌和纤维素分解菌的分离都运用了选择培养基，前者所用的培养基中尿素是唯一的氮源，后者所用的培养基中纤维素是唯一的碳源。 考
8、 点 互 动 探 究 考点一 微生物的纯化与计数 1 纯化大肠杆菌 (1) 原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是纯化的细菌菌落。 (2) 纯化微生物的接种 方法 比较项目 平板划线法 稀释涂布平板法 关键操作 接种环在固体平板培养基表面连续划线 一系列的梯度稀释 涂布平板法操作 注意事项 每次划线先后均需灼烧接种环 稀释度要足够高，为确保实验成功可以增加稀释度的范围 菌体获取 在具有显著的菌落特征的区域菌落中挑取菌体 从适宜的稀释度的平板上的菌落中挑取菌体 优点 可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落 既可以获得单细胞菌落，又能对微生物计数 缺点
9、不能对微生物计 数 操作复杂，需要 涂布多个平板 2. 微生物的计数 (1) 两种计数方法的比 较 比较项目 间接计数法 (稀释涂布平板法 ) 直接计数法 (显微计数法 ) 原理 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌 利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量 公式 每克样品中的菌落数：(C V) M C：某稀释度下平板上生长的平均菌落数； V：涂布平板时所用的稀释液的体积 ( M：稀释倍数 每毫升原液所含细菌数：每小格平均细菌数 400 10000 稀释倍数
10、缺点 当两个或多个菌体连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 不能区分细胞死活 结果 比实际值偏小 比实际值偏大 (2) 设置对照和重复 比较项目 对照 重复 目的 排除非测试因素对实验结果的影响 排除偶然因素对实验结果的影响 实例 空白对照：确定培养基制作是否合格 同一稀释度涂布至少 3个平板 (2015 玉溪模拟 ) 炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病，炭疽杆菌两端 截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状，对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊。 细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。 细菌鉴定：实验流程如图所示。 (1) 挑选可疑菌落制片后，用 _ _
11、 观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。 (2) 对配制的液体培养基等需采取 _ 灭菌；实验所用液体培养基的碳源为 _( 填 “ 无机碳 ” 或 “ 有机碳 ” ) 。 (3) 接种可疑菌落后， 35 培养 24 h ，液体培养基变浑浊 ，原因是 _ _ ，对照组试管中应加入 _ _ ，与实验组同时培养 6 h 后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组 _( 填 “ 高 ” 或 “ 低 ” ) ，则可确定疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。 解析 (1) 炭疽杆菌是原核生物，为单细胞生物，观察它的结构应借助显微镜。 (2) 微生物培养基需采用高压蒸汽灭菌。实验所用培养基的碳源应为有机碳，因为炭疽杆菌为
12、异养型微生物。 (3) 35 培养 24 h ，细菌大量繁殖会导致液体培养基变浑浊，对照组不能含有细菌，根据等量原则故应该加入等量的生理盐 水，实验组加入噬菌体液后，由于噬菌体能够使炭疽杆菌死亡，故实验组液体培养基的浑浊度比对照组低。 答案 (1) 显微镜 (2) 高压蒸汽 有机碳 (3) 细菌大量繁殖 等量生理盐水 低 灭菌和消毒的区别 条件 结果 常用方法 应用范围 消毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物 煮沸消毒法 日常用品 巴氏消毒法 不耐高温的液 体 化学药剂消毒法 用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源 灭菌 强烈的理化因素 杀死物体内外所有的微生物，
13、包括芽孢和孢子 灼烧灭菌法 接种工具 干热灭菌法 玻璃器皿、金 属工具 高压蒸汽灭菌法 培养基及容器的灭菌 拓展探究 用稀释涂布法对微生物进行计数时，只得到一个菌落数在 30 30 0 的平板可以吗？若得到 3 个以上平板但菌落数差异较大可以吗？为什么？ 答案 (1) 只得到 1 个菌落数在 30 300 的平 板是错误的。错误的原因是不符合实验的重复原则，易受到偶然因素的影响。 (2) 得到 3 个或 3 个以上菌落数在 30 300 的平板，也不一定正确，这可能有两种情况： 不同平板间差异较大，如得到 3 个平板，菌落数分别为230 、 34 、 240 ，虽然菌落数均在 “ 30 300 ” ，这也是不正确的，因为 “ 34 ” 与 “ 230
