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1、实验二、敌百虫半数致死量的测定【目的和原理】掌握药物半数致死量（LD 50）的测定方法；掌握简化机率单位法的计算方法；了解急性毒性实验的相关内容及新药安全性评价的内容。药物的急性毒性常以 LD50 来表示，即能够引起试验动物半死亡的剂量。在实验设计合理并严格掌握实验技术的条件下，药物致死量的对数大多在半数致死量的上下形成常态分布。通过计算可求出 LD50。【实验对象】小白鼠，体重 18 22 g，雌雄各半【实验药品】4 %敌百虫溶液、苦味酸溶液【实验器材】注射器、鼠笼、天平【实验方法】简化机率单位法1、探索剂量范围：取小白鼠 12 15 只，以 3 只为一组，分为 4-5 组，选择一系列剂量，
2、分别按组腹腔注射敌百虫溶液，观察出现的症状并记录死亡动物数，找出引起 10 %和 90 %死亡率剂量的所在范围。2、正式实验在预备实验所获得的 10 %和 90 %致死量的范围内，选用几个等比级剂量，0.10 mL /10g、0.12 mL /10g、0.14 mL /10g，0.17 mL /10g、0.20 mL /10g、0.24 mL /10g (剂量间的比例一般用 1：0.7 1：0.85)，使一半组数死亡率在 10 % 50 %，另一半组数死亡率在 50 % 90 %之间，各组的动物数应相等，一般每组可用 10 20 只，动物的体重和性别要均匀分配。完成动物分组和剂量计算后按组腹腔
3、注射给药。3、给药后观察并记录中毒症状，60 分钟后清点各组动物的死亡数，计算敌百虫的LD50、LD 50 的可信限和可信限率。【实验结果】将给药剂量（需将剂量单位换算为 mg/kg） 、动物死亡数及死亡率等填入下表，然后根据下述公式计算 LD50 值、LD 50 可信限及可信限率。组别剂量D对数剂量 X 死亡数 死亡率机率单位Y权重系数Wc权重W12345用两个剂量时=log-1 KLD2112IXYIK）（SLDK = 21)(3.IWYK2114）（）（用三个剂量时=log-1 KLD2132XYIK）（SLDK = 213)(6.4IWY2136）（）（用四个剂量时=log-1 + K
4、LD231430XYYIK）（）（ ）（ ISLDK = 2314)(2LI）（ WYYK23142 380）（）（）（用五个剂量时=log-1 KLD3241520XYYIK）（）（ ）（SLDK = 2415)(3LDI）（ WYYK24152 50）（）（）（LDK 的可信限 =LDK1.96SLDK (P =0.95)=LDK2.58 SLDK (P =0.99)LDK 的可信限率= (P =0.95)KLDS96.1= (P =0.99) L58.2X1、X 2：剂量的对数，从小剂量到大剂量P1、P 2：各剂量组的动物死亡率Y1、Y 2：各剂量组的动物死亡率转换成机率单位Wc：权重系
5、数W：权重 W = n Wc（各组动物数权重系数）n：各组动物数 N：组数I：剂量间比值的对数例：某批胆碱酯酶复活剂 DMO4-Cl2 腹腔注射给予小白鼠后，观察 14 天内的死亡率，试计算其半数致死量和可信限。剂量 D mg/kg对数剂量 X 死亡数 死亡率 机率单位 Y权重系数Wc权重 W100 125 156 2.00002.09692.19371/106/109/1010%60%90%3.725.256.280.3430.6210.3433.436.213.43 15.25 13.07I=log =2.0969-2.0000=0.0969102508.3.NY=log-1 50LD2132XYIK）（= log-1096.7.8659.= log-1(2.0969-0.0061) = log-12.0908 =123.2 mg / kgSLD50 = 213)(6.4YLDIKWY21326）（）（= 2)7.86(09. 07.86.522）（）（= =8.3790.7096 = 5.94653.1409.LD50 的可信限=123.2 1.965.946 =123.211.6 mg / kg (P =0.95)LDK 的可信限率 = =0.094 =9.4% 2.16【注意事项】给药剂量要准确；实验室尽量保持安静；注意观察给药后的各种反应。（韩冬云，贾建辉）
