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1、 上海交通大学硕士学位论文 1 上海交通大学硕士研究生学位论文 体内研究IL-2基因瘤苗抗肿瘤效应 及安全性检测 The study about ANTI-TUMOR EFFECT AND SAFETY OF IL-2 GENE VACCINE IN VIVO 海 研究生姓名：张某某医学院附属瑞金医院普外科 指导老师：赵老师 学科（专业）：外科学（普通外科学） 培养单位：上海交通大学医学院附属瑞金医院 攻读学位：硕士学位 答辩时间：2008年5月 上海交通大学硕士学位论文 2 上海交通大学 学位论文原创性申明 本人郑重申明:所成交的学位论文，是本人在导师的指导下，独 立进行研究所取得的成果。除
2、文中已经注明引用的内容外，本论文 不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文 的研究做出重要的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人 完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期： 年 月 日 上海交通大学硕士学位论文 3 上海交通大学 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定， 同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版， 允许论文被查阅和借阅。本人授权上海交通大学可以将本学位论文 的全部或部分内容编入有关的数据库进行检索，可以采用影印、缩 印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密 （ ） ， 在
3、年解密后适用本授权书。 本学位论文属于不保密（ ） 。 （请在以上括号内打“” 学位论文作者签名： 指导教师签名： 日期： 年 月 日 日期： 年 月 日 上海交通大学硕士学位论文 I 目录 中文摘要.1 英文摘要.3 引言.6 1 试验材料.9 1.1 细胞株.9 1.2 细胞培养.9 1.3 杂交试验.9 1.4 动物模型.9 1.5 免疫组化.9 2 试验方法.10 2.1 细胞培养.10 2.2 大肠癌基因瘤苗生物活性的鉴定.10 2.3 瘤苗安全性的检测.10 2.4 体内实验检测基因瘤苗的抗肿瘤效应。.11 3 结果.13 3.1 ELISA 检测 IL-2 蛋白水平得表达 .13
4、 3.2 瘤苗细胞的安全性检测结果.13 3.3 体内实验研究瘤苗的抗肿瘤效应.15 4 讨 论.20 5 结论.24 参考文献.25 综述.26 致谢.32 发表论文情况.33 上海交通大学硕士学位论文 1 中文摘要 体内研究IL-2基因瘤苗抗肿瘤效应 及其安全性检测 摘 要 目的:本课题研究转导白细胞介素-2（IL-2）基因的人大肠癌细 胞瘤苗的抗肿瘤效应及其安全性检测。 方法：结肠癌细胞株COLO205采用脂质体法稳定转染IL-2基因，应用 ELISA法检测瘤苗的IL-2的表达，筛选高表达IL-2基因的细 胞克隆作为基因瘤苗。将已构造好的结肠癌裸鼠模型分为两组，采 用瘤体内注射的方法，注
5、射经60Gy 60 Co照射的瘤苗细胞（治疗组） 和PBS缓冲液（对照组）,密切观察肿瘤生长状况，五周后处死所有 裸鼠，取出肿瘤，观察并称重，免疫组化法检测IL-2 基因的表达。 把已制备好的大肠癌基因瘤苗用 60 Co进行照射，将照射瘤苗细胞继 续培养，用苔盼蓝染色法测定细胞的存活率，将照射的瘤苗细胞和 未照射组的瘤苗进行荷瘤试验。 结果: 获得基因瘤苗最高表达为COLO205-H5 量为139.13 ng/110 7 /24h。瘤体内注射瘤苗组的裸鼠肿瘤生长缓慢，较早达到 平台期，而对照组的肿瘤生长迅速，差异有显著性。 （ t=2.7,p0.05）治疗组肿块的重量也明显小于对照组 上海交通
6、大学硕士学位论文 2 （t=7.2，p0.01） 。移植瘤治疗组IL-2免疫组化结果显示阳性，而 对照组为阴性,说明了瘤苗在移植瘤体内存活并分泌IL-2。照射 60Gy 60 Co瘤苗细胞培养在25天内全部死亡，荷瘤试验显示照射后的 瘤苗未能成瘤，而未经照射组均已成瘤。 结论:通过体内实验研究证实了IL-2基因转导结肠癌细胞制备 的瘤苗具有一定的抗肿瘤效应，经60Gy 60 Co照射后能消除其致瘤性， 为肿瘤的治疗提供了一定的实验基础。 关键词:大肠癌,白细胞介素-2,基因瘤苗，移植瘤上海交通大学硕士学位论文 3 英文摘要 The study about ANTI-TUMOR EFFECT AND SAFETY OF IL-2 GENE VACCINE IN VIVO ABSTRACT Objective: To investigate the anti-tumor effect of IL-2 gene vaccine and detect its safety. M
