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1、检验手册(可供查询用)检验手册序检验医学(Laboratory medicine)既是一门古老的学科,又是一门新兴学科,同时也是涉及基础和临床专业最多的一门边缘学科。检验医学的主要作用是为临床疾病的诊断、疗效观察、病程监测、预后判断和预防提供实验室的客观依据和各种信息、故其作用和地位十分重要。随着基础医学和其他科学技术、特别是分子医学、电子学、生物信息和计算机学科的相应渗透和迅速发展,诸多新理论、新技术和新仪器都率先在检验医学中应用,使其内容不断拓宽和深化,面貌日新月异,成为发展最快的学科之一。其在临床医学中发挥的作用也越来越为重要。第一章 检验前病人准备和标本采集病人准备和标本采集是检验质量
2、保证的重要环节之一。由于病人受到各种内在和外界的影响,可使检验结果产生或大或小的误差,为此检验前病人须作适当准备,可减少随机分析误差。一、病人准备病人准备除了特殊检验有专门规定外,一般要求病人处于安静状态,生活饮食处于日常状态,目前已公认无能无力、过度空腹、饮食、饮酒、吸烟及姿势体位等可影响某些检验结果,现分述如下:1. 运动:肌肉活动的影响可分短暂性的和持续性的两类,短暂性影响为血浆脂肪酸含量,可因运动而暂时减少,而后渐渐增加而恢复。丙氨酸可因运动暂时增加达 180%,而乳酸则可增加至 300%。受到持续性影响主要是一些肌肉有关酶,如肌酸激酶、醛缩酶、乳酸脱氢酶等,据称一场 60min 的手
3、球训练赛后11h,肌酸激酶活性比赛前仍增加达 125%,长期坚持体育锻炼还会提高性激素水平,因此采血前宜安静,不作过大的活动。2. 食物:进餐后血浆脂肪、蛋白质、糖类有所增加。有人研究于高脂餐后 24h 采血,多数人碱性磷酸酶含量增高,主要来自肠源性同工酶,且与血型有密切关系,O 型或 B 型兼为 Le+分泌型者增高更明显。一般认为高蛋白质餐使血浆尿素、血氨增加,但不影响肌酐含量,高比例不饱和脂肪酸食物,可减低胆固醇含量;香蕉、菠萝、番茄可使尿液 5-羟色胺增加数倍;含咖啡因饮料,可使血浆游离脂肪酸增加,并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。食物如含有动物血液,可引起粪隐血假阳性。故在做相应检验时,
4、应对食物有一定的控制。3. 过度空腹:一般血液生化检验要求病人晚餐后禁食,至次日晨采血,空腹约 1214h。但过度空腹,若达 24h 以上,某些检验会有异常结果。例如血清胆红素可因空腹 48h 而增加 240%;血糖可因空腹过长而减少为低血糖;血脂空腹过度,甘油三酯、甘油、游离脂肪酸反有增加,而胆固醇无明显改变。故空腹并非越长越好,近年国外有人主张胆固醇单项检验,不必空腹抽血。4. 饮酒:饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐、己醛、乙酸盐增加。长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高,平均红细胞体积增加,谷氨酰转肽酶(GGT)亦较不饮酒的人为高,甚至可以将这项作为嗜酒者的筛选检查。5. 吸烟:瘾大者血液一氧化碳血
5、红蛋白含量可达 8%,而不吸烟者含量在 1%以下。此外儿茶酚胺、血清可的松亦较不吸烟者为多;血液学方面亦有变化,白细胞数增加,嗜酸粒细胞减少,中性粒细胞及单核细胞增多,血红蛋白偏高,平均红细胞体积偏高。Dalferes 认为吸烟组血浆硫氰酸盐浓度明显高于非吸烟组。6. 药物:药物对检验的影响非常复杂,15000 多种药物对检验有干扰作用。众所周知,抗结核药、抗生素、抗白血病制剂、磺胺类药物,对肝功能有大小不一的影响,甚至几片常用药物可以引起严重的药物反应,故在采样检查之前,暂停各种药物是为上策,如不可停用,则应了解可能对检验结果产生的影响。7. 体位:体位影响血液循环,由于血浆和组织间液因体位
6、不同而平衡改变,则细胞成分和大分子物质的改变较为明显,例如由卧位改为站位,血浆白蛋白可因此而浓度增大,总蛋白、酶、钙、胆红素、胆固醇及甘油三酯等亦因站位而浓度增加;血红蛋白、血细胞比容、红细胞计数亦于站位时增加。由于体位的因素,不要让病人自己到检验科来采血做血常规,或复查红、白细胞计数,以免体位引入的误差。8. 其他:病人准备还应考虑病人的生物钟规律,因此复查以在大体相同的时间采样为好。采血时止血带结扎过久,也是一种误差因素,如以结扎 1min 的样品结果为基数,则结扎 3min,可使血浆总蛋白增加5%,胆固醇增加 5%,铁增加 6%,胆红素增加 8%。血气和 PH 值测定的血液以动脉血为原则
7、,且不可漏气。细菌培养的样品要采用无菌技术,防止污染。二、标本采集标本采集是直接关系检验结果的基本功,如果标本采集不当,即使最好的仪器设备,也难以弥补在采集标本时引入的误差和错误。现将各种标本采集要点分述如下:1. 血液标本:分普通管、抗凝管两大类;抗凝管又根据抗凝剂不同分为草酸钾管、草酸钠管、枸橼酸钠管、乙二胺四乙酸二钾盐或二钠盐(EDTA-K2 或 EDTA-Na2)管、肝素管等。1) 草酸钾:与钙离子结合成草酸钙,2) 使血液抗凝,3) 常用量为 12g/L 血液。4) 草酸钾氟化钠混合抗凝剂:专供葡萄糖测定用,5) 氟化钠 1g,6) 草酸钾 3g 混合,7) 混合每 4mg 可使血液
8、 1ml 抗凝。枸橼酸钠:用于血沉及血凝检查。血沉(魏氏法)用 109mmol/L(32g/L)枸橼酸钠 0.4ml,9) 与血液1.6ml 混和;血凝多用 38g/L,10) 亦可用 32g/L,以抗凝剂与血液 1:9 混和。11) 肝素:是一种粘多糖体,12) 可抑制凝血酶原转化为凝血酶,13) 使纤维蛋白原不 14) 能转化为纤维蛋白,15) 以 15+-2.5IU 抗凝 1ml 血。可用于生化和血液学检验标 16) 本,17) 但不 18) 可用于筛选弥散性血管内凝血的血浆鱼精蛋白副凝试验(3P)和凝血酶试验。因肝素可与鱼精蛋白作用,19) 发生沉淀使 3P 出现假阳性以及肝素的抗凝血
9、酶作用出现严重干扰。20) 乙二胺四乙酸(EDTA):能与钙离子络合而 21) 抗凝,22) 通常血常规中用其钾盐 EDTA-K2,或EDTA-K3。2. 尿液标本:根据采集时间可分为晨尿、随意尿、空腹尿,计时尿(2h 3h 12h 24h 等) ,午后尿、餐后尿等。晨尿为住院病人留尿的主要方法,早晨起床后采集第 1 次排尿,可用于常规检验。随时尿不受时间的约束,多为门诊病人的留尿方法。空腹尿为进餐后 4h 左右排尿,收集下 1 次的尿液供检验,主要用于了解葡萄糖代谢情况。计时尿不论几小时,均应于计时开始进排空尿液,然后于规定时间内排尿,计时尿多用于肾功能和有形成成分排出率的评估,亦用计算淀粉
10、酶或肌酐的排出率。24h 尿多用于化学组分的测定,亦用于泌尿道抗酸杆菌的检查。尿液原则上不用防腐剂为好,如需 12h 或 24h 尿,首选以冷藏为妥,次为根据检验申请加用合适的防腐剂。3. 粪便标本:采集后及时送检,如作原虫阿米巴检查应保持一定温度,且立即送检,立即检查。如检查虫体或绦虫头节,应全部粪便送检,如检查蛲虫则不必送送验粪样,而应于晨起排便前用棉拭擦肛门周围,可得虫卵。粪便标本不应污染容器外表,且不太满,30g 容器装 510g 为妥。 ,如大便上有粘液或是血液,应采集此处标本,以提高阳性率,30min 内送检,放置过久易导致细胞的破坏,特别是阿米巴等原虫。4. 脑脊液、浆膜腔液、关
11、节液:均由临床医师穿刺采样,检验科应提供专用的各种试管或容器,相互配合并及时检验。5. 骨髓:采集由临床医师穿刺,为使涂片满意,必要时本科协助作骨髓涂片。6. 胃及十二指肠液:一般均在门诊室或病房采集后送检,收样时应核对标本。胃液分基础胃酸分泌(BAO) 、最大胃酸分泌(MAO)等;十二指肠液分甲、乙、丙管,甲管来自总胆管为橙黄色,乙管来自胆囊为黄绿色,丙管来自胆道为柠檬色,细菌培养应从乙管取样接种培养。7. 痰液标本:采早晨第 1 口痰,多用于细胞学及微生物学检查。采样前应先反复漱口,经深呼吸数次后用力咳痰,不可吐入唾液。微生物培养取样应在抗生素等药物治疗开始之前,如已用药,则应选血药浓度最
12、低时采样。8. 阴道分泌物:由妇产科医师采样后送检,如成批送检应在 37加温数分钟后检查,否则影响滴虫动力,容易漏检。9. 精液和前列腺液:采集精液应在 35 天内勿排精,且于排精后 30min 内保温送达检验科,容器以广口小玻璃瓶为好,不可贮于避孕套或塑料瓶内。收到标本后应及时检查。前列腺液由医师作前列腺按摩术取样,收到标本后应立即检查。10. 其他标本:根据具体检验项目而定。总之,各种检验标本的采集合适与否,直接关系检验质量,应予重视。第二章 临床检验一、临检标本采集要求(1) 血常规标(2 ) 本采集方法1. 采血前,2. 仔细核对血常规试管上的标 3. 签与化验单上的姓名 4. 、床号
13、、住院号是否相符。5. 检查血常规试管底部是否有抗凝剂。6. 静脉血一般用肘静脉,7. 也可选用颈静脉或股静脉,8. 采血处应避免有皮肤红肿、溃疡等现象。9. 取 1ml 血,10. 缓缓注入血常规试管中,11. 或加血至标 12. 记线处,13. 盖上盖子,14. 立即颠倒混匀不 15. 少于 5 次,16. 避免剧烈振荡,17. 以免产生气泡。一小时内送检。18. 禁止在输液侧肢体采血或在输液后立即于该侧采血。19. 实行一人、一针、一管、一带、一垫,20. 防止交叉感染。21. 若要进行比较性测定,22. 应尽量在同 23. 一时间采血,24. 不同 25. 时间的细胞数可能有较大的变化
14、。26. 由于血小板极易凝集,27. 采血者应首先采集常规血,28. 其次为出凝血、血沉,29. 最后才是生化免疫。注:网织红细胞(RET) 、C 反应蛋白( CRP) 、糖化血红蛋白(HAlb)可与血常规共用一管(3) 出凝血、血沉标(4 ) 本采集方法1. 采血前,2. 仔细核对试管上的标 3. 签与化验单上的姓名 4. 、床号、住院号是否相符。5. 检查试管底部是否有抗凝剂。6. 尽量空腹采血,7. 采血要顺利。8. 缓缓向出凝血、血沉管中加血至刻度处,9. 务必要准确,10. 立即加盖,11. 颠倒充分混匀 5、6 次。及时送检。(5) 其他常规血液项目标(6 ) 本采集方法1. 血中
15、微丝蚴:在夜间 10 时至凌晨 2 时之间,2. 取末梢血 23 滴于干净玻片上,3. 制成厚涂片,4. 立即送检。5. 红斑狼疮细胞(LE):请到门诊处抽血。6. 疟原虫:最好在全身开始寒战初期,7. 将血滴涂成薄涂片,8. 立即送检。9. 肺炎支原体、衣原体抗体:采血约 2ml 置洁净玻璃管内,10. 2 小时内送检。(7) 尿液标( 8) 本采集方法1. 尿常规(URT):取晨起第一次小便中段尿,2. 或第二次小便中段尿约 20l置洁净器皿内,30min 内送检。如急诊可取随机尿。3. 尿淀粉酶(UAMY):晨尿或随机尿约 10ml,4. 30min 内送检。5. 尿本6. 周蛋白(Be
16、nce-Jones):取晨尿 20ml,7. 30min 内送检。8. 乳糜试验:随机尿 20ml,9. 30min 内送检。10. 妊娠试验(尿 hCG):晨尿中段或随机尿中段约 10ml,11. 立即送检。 12. 尿三杯试验:采集标13. 本时应连续排尿,14. 中间不 15. 应有间断,16. 各杯不 17. 少于 10ml,18. 立即送检。二、临检项目的临床意义一 血常规白细胞计数(WBC )临床意义:生理性增多: 初生儿、运动、疼痛、情绪变化、应激、妊娠、分娩 病理增高见于: 急性感染:急性化脓性感染所引起的急性全身性感染局部炎症,以及一些细胞感染。 组织损伤:手术后急性心肌梗塞。恶性肿瘤及白白病:急性、慢性粒细胞性白血病,尤以慢性白血病增高最多。各种恶性肿瘤的晚期,如肝癌、胃癌等。 其它:骨髓纤维化、真性红细胞增多症、尿毒症、酸中毒、某些药物中毒、烧伤等。 减少见于: 某些感染:细菌感染(如伤感、副伤寒) ;病毒感染(如流感、风疹、麻疹) 。 某些血液病:再生障碍性贫血、急性粒细胞缺乏症、