《质谱实验讲义》由会员分享，可在线阅读，更多相关《质谱实验讲义（2页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、实验八 色谱-质谱联用实验一、实验目的1了解质谱仪的构造及各主要部件的结构原理。2了解气质联用仪及液质联用仪的组成及应用，分析条件的设置，分析的一般过程及主要操作。3通过对 EI 源的谱图解析，加深对有机化合物断裂机理的理解并初步掌握谱图解析方法。4通过采用不同电离方式对样品进行分析，初步掌握液相色谱质谱联用的不同电离源的应用及谱图识别方法。5通过混合样品的液质联用分析，了解仪器联用技术的优势及在痕量分析中的应用。二、实验原理混合物样品经 GC 或 LC 分离成一个一个单一组分，并进入离子源（或样品直接进入离子源） 。在离子源中样品分子被电离成离子，离子经过质量分析器之后即按 m/z 顺序排列
2、成谱，经检测器检测后得到质谱。计算机采集并储存质谱，经过适当处理便可得到样品的总离子流色谱图和质谱图。经计算机检索后可得到化合物的定性结果，由总离子流色谱图可以进行各组分的定量分析。三、仪器与试剂仪器：HP5890 气相色谱质谱联用仪，液相色谱质谱联用仪样品：有机混合物样品单组分有机化合物（纯品）四、实验内容与步骤1气相色谱-质谱联用分析（1）质谱仪的调整质谱仪开机到正常工作需要一系列的调整，否则，不能进行正常工作。这些调整工作包括： 抽真空 质谱仪需在真空下工作，要达到必要的真空度需要由机械真空泵和扩散泵（或分子涡轮泵）抽真空。如果采用扩散泵，从开机到正常工作需要 2 h 左右；若采用分子涡
3、轮泵，则只需 20 min 左右。如果仪器上装有真空仪表，真空指示需 104 Pa 或更高的真空下才能正常工作。 分析条件的设置 根据仪器操作说明和样品情况，设置 GC 条件（汽化温度、升温程序、载气流量等）和 MS 条件（质量范围、扫描速度、电子能量、扫描方式、倍增器电压等） 。上述操作完成之后，GCMS 即进入正常工作状态。（2）样品测试步骤 样品制备有机混合物样品：进行 GCMS 分析的样品其沸程应该不大于 300，样品中应避免大量水存在。对于不满足要求的样品需进行预处理，经常采用的样品处理方法有萃取、浓缩、衍生化等。用 1L 微量注射器进样，进样量不大于 0.1L。单组分有机化合物（纯
4、品）：液体和固体的单组分有机化合物可采用直接进样法进样。具体操作为：首先用针沾取少量样品，置于毛细管中，然后通过进样杆把样品直接送入离子源。 采集数据：将数据系统与主机联机，进样信号被接受。 采集数据结束之后，色谱降温，关闭质谱仪高压，然后进行数据处理。 显示并打印总离子流色谱图，显示并打印每个组分的质谱图，对每个未知谱进行计算机检索。2液相色谱-质谱联用分析（1）ESI 电离方式测定样品 进样方式：直接进样，通过改变试验参数观察化合物谱图的变化。 仪器实验条件：根据样品结构选择合适电离方式。（2）APCI 电离方式测定样品 进样方式：直接进样，通过改变试验参数观察化合物谱图的变化。 仪器实验条件：根据样品结构选择合适电离方式。（3）液质联用分析复杂基质中痕量物质的实验五、思考题1质谱仪为什么要在真空下工作？2如果把电子能量由 70 eV 变成 20 eV，质谱图可能会发生什么变化？3如果检索结果可信度差，还可用什么办法进行辅助定性分析？4拿到一张质谱图如何识别化合物的分子离子峰？如何判断分子量？如果没有分子量，可用什么办法得到分子量？
