z染料常用药品试剂精简

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1、一、生物标本常用染料性能简介(一)天然染料1、苏木精 苏木精是从南美的苏木(热带豆科植物)干枝中用乙醚浸制出来的一种色素,是最常用的染料之一。苏木精不能直接染色,必须暴露在通气的地方,使他变成氧化苏木精(又叫苏木素)后才能使用,这叫做“成熟” 。苏木精的“成熟”过程需时较长,配置后时间愈久,染色力愈强。被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体,易溶于酒精,微溶于水和甘油,是染细胞核的优良材料,他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。分化时组织所染的颜色因处理的情况而异,用酸性溶液

2、(如盐酸酒精)分化后呈红色,水洗后仍恢复青蓝色,用碱性溶液(如氨水)分化后呈蓝色,水洗后呈蓝黑色。2、洋红 洋红又叫胭脂红或卡红。一种热带产的雌性胭脂虫干燥后,磨成粉末,提取出虫红,再用明矾处理,除去其中杂质,就制成洋红。单纯的洋红不能染色,要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸,碱性溶液有氨水、硼砂等。洋红使细胞核的优良染料,染色的标本不易褪色。用作切片或组织块染都适宜,尤其适宜于小型材料的整体染色。用洋红配成的溶液染色后能保持几年。洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用。(二)人工染料人工染料,即苯胺染料或煤焦油染料,种类很多,应用极广。它的缺点是经日光照射容易褪色,苯胺

3、蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。在制片中注意掌握酸碱度,并避免日光直射,也能经几年不褪色。1、酸性品红 酸性品红是酸性染料,呈红色粉末状,能容于水,略溶于酒精(0.3% ) 。他是良好的细胞制染色剂,在动物制片上应用很广,在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。他跟甲基绿同染,能显示线粒体。组织切片在染色前先浸在带酸性的水中,可增强它的染色力。酸性品红容易跟碱起作用,所以染色过度,易在自来水中褪色。2、刚果红 刚果红是酸性染料,呈枣红色粉末状,能溶于水喝酒精,遇酸呈蓝色。他能作染料,也用作指示剂。他在植物制片中常作为苏木精或其他细胞染料的衬垫剂。他用来染细胞质时,能把胶制或纤维素染成红色

4、。在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等。刚果红可以跟苏木静作二重染色,也可用作类淀粉染色,由于他能溶于水和酒精,所以洗涤和脱水处理要迅速。3、甲基蓝 甲基蓝是弱酸性染料,能溶于水和酒精。甲基蓝在动植物的制片技术方面应用极广。他跟伊红合用能染神经细胞,也是细菌制片中不可缺少的染料。它的水溶液是原生动物的活体染色剂。甲基蓝极易氧化,因此用他染色后不能长久保存。4、固绿 固绿是酸性染料,能溶于水(溶解度为 4%)和酒精(溶解度为 9%) 。固绿是一种染含有浆质的纤维素细胞组织的染色剂,在染细胞和植物组织上应用极广。他和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。5、苏丹 苏丹是弱酸

5、性染料,呈红色粉末状,易溶于脂肪和酒精(溶解度为 0.15%) 。苏丹是脂肪染色剂。 6、伊红 这类染料种类很多。常用的伊红 Y,是酸性染料,呈红色带蓝的小结晶或棕色粉末状,溶于水(15 摄氏度是溶解度达 44%)和酒精(溶于无水酒精的溶解度为 2%) 。伊红在动物制片中广泛应用,是很好的细胞质染料,常用作苏木精的衬染剂。 7、碱性品(复)红 碱性品红是碱性染料,呈暗红色粉末或结晶状,能溶于水(溶解度 1%)和酒精(溶解度 8%) 。碱性品红在生物学制片中用途很广,可用来染色胶原纤维、弹性纤维、嗜复红性颗粒和中枢神经组织的核质。在生物学制片中用来染维管束植物的木质化壁,又作为原球藻、轮藻的整体

6、染色。在细菌学制片中,长用来鉴别结核杆菌。在 尔根氏反应中用作组织化学试剂,已核查脱氧核糖核酸。 8、结晶紫 结晶紫是碱性染料,能溶于水(溶解度 9%)和酒精(溶解度 8.75%) 。结晶紫在细胞学、组织学和细菌学等方面应用极广,是一种优良的染色剂。他是细胞核染色常用的,用来显示染色体的中心体,并可染淀粉、纤维蛋白、神经胶质等。凡是用番红和苏木精或其他染料染细胞核不能成功时,用它能得到良好的结果。用番红和结晶紫作染色体的二重染色,染色体染成红色,纺锤丝染成紫色,所以也是一种显示细胞分裂的优良染色剂。用结晶紫染纤毛,效果也很好。用结晶紫染色的切片,缺点是不易长久保存。 9、龙胆紫 龙胆紫是混合的

7、碱性染料,主要是结晶紫和甲基紫的混合物。在必要是,龙胆紫能跟结晶紫互相替用。医药上用的紫药水,主要成分是甲基紫,需要时能代替龙胆紫和结晶紫。 10、中性红 中性红是弱碱性染料,呈红色粉末状,能溶于水(溶解度 4%)和酒精(溶解度 1.8%) 。它的碱性溶液中呈现黄色,在强碱性溶液中呈蓝色,而在弱酸性溶液中呈红色,所以能用作指示剂。中性红无毒,常做活体染色的染料,用来染原生动物和显示动植物组织中活细胞的内含物等。陈久的中性红水溶液,用作显示尼尔体的常用染料。 11、番红 番红是碱性染料,能溶于水和酒精。番红是细胞学和动植物组织学生常用的染料,能染细胞核、染色体和植物蛋白质,示维管束植物木质化、木

8、栓化和角质化的组织,还能染孢子囊。 12、亚甲蓝或美蓝 亚甲蓝或美蓝是碱性染料,呈蓝色粉末状,能溶于水(溶解度 9.5%)和酒精(溶解度6%) 。亚甲蓝是动物学和细胞学染色上十分重要的细胞核染料,其优点是染色不会过深。 13、甲基绿 甲基绿是碱性染料。它是绿色粉末状,能溶于水(溶解度 8%)和酒精(溶解度 3%) 。甲基绿是最有价值的细胞和染色剂,细胞学上常用来染染色质,跟酸性品红一起可作植物木质部的染色。 二、常用药品试剂和培养基的配制(一) 反应剂1、检查葡萄糖试剂配方一本尼迪克(Benedict) 溶液(1) 在 400 毫升蒸馏水中溶解 85 克柠檬酸钠和 50 克无水碳酸钠。(2)

9、在 50 毫升加热的蒸馏水中溶解 8.5 克硫酸铜。把硫酸铜溶液缓缓倒入柠檬酸钠-碳酸钠溶液中,边加边搅拌,如果产生沉淀,要过滤。本尼迪克溶液配制后能长期使用(存放时间较久而产生沉淀是,取上层清液使用,不必重新配制) 。 本尼迪克溶液用来测试食物、血液和尿中的葡萄糖,可测出 0.15 0.20% 的葡萄糖。这种溶液跟未知物同加热时,如果未知物中有葡萄糖,会形成红色的氧化亚铜沉淀物。 配方二 裴林(Fehling)溶液 (1)把 34.5 克硫酸铜溶于 500 毫升蒸馏水中。 (2)把 125 克氢氧化钾(钠)和 173 克酒石酸钾钠溶解在 500 毫升蒸馏水中。 上述两种溶液应分别保存。在检测

10、葡萄糖时,使他们等量的混合,加入待测物的试管内,加热到沸腾。如果有葡萄糖,会形成红色的氧化亚铜沉淀物。 2、检查淀粉的试剂 鲁哥氏(Lugols)溶液(碘液) 碘液用来测试食物样品或叶片中的淀粉,也用作染色剂,例如可染色鞭毛、纤毛和细胞核等。 3、检查蛋白质的试剂 配方一 米伦(Millon)试剂 在 60 毫升浓硝酸(比重 1.42)中溶解 40 克汞(水浴加温可助溶) ,溶解后加入两倍体积的蒸馏水稀释,静置澄清后,取它上层的清液备用。这种试剂可长期保存。 在待测物中加入少量米伦试剂,加热,如果有蛋白质,会出现红色。这种试剂不能用来测定尿中的蛋白质。配方二 双缩尿试剂 分别配制 10%氢氧化

11、钠溶液和 1%硫酸铜溶液。 在 3 毫升待测物中加入 1 毫升 10%氢氧化钠溶液和 1 滴 1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质,会出现紫色反应。4、检查脂肪的试剂 苏丹()酒精饱和溶液 取 0.2 克苏丹(或苏丹) ,放入纯酒精中,加热,使它充分溶解,成为饱和酒精溶液,过滤后密闭在试剂瓶内保存备用。 5、酸碱指示剂 配方一 酚酞试剂和试纸 酚泰试剂(试纸) pH 值变色范围 8.210,在酸性和中性溶液中都无色,再碱性溶液中呈深红色。 配方二 红蓝石蕊试纸 红石蕊试纸在碱性溶液中变蓝,蓝石蕊试纸在酸性溶液中变红。 6、检查二氧化碳的试剂 检查二氧化碳的试剂,可用溴代麝香草酚蓝溶液和石灰水。 配方一

12、 溴代麝香草酚蓝溶液 取 0.1 克溴代麝香草酚蓝,溶解在 100 毫升蒸馏水里,滴入少量 0.1%氢氧化钾溶液,使它成为弱碱性溶液而呈蓝色。 溴代麝香草酚蓝溶液 pH 值变色范围是 6.0(黄)7.6(蓝) 。待测物中如果有二氧化碳,会形成碳酸而使溶液变成黄色。 配方二 石灰水 在蒸馏水中加入生石灰(氧化钙) ,变加边搅拌,直到加入的生石灰不再溶解,呈饱和状态时为止。在石灰水澄清后,倾出上层清液,用滤纸过滤,放在密闭瓶内保存。 如果测定的物质中有二氧化碳,会生成碳酸钙,使石灰水变浑浊。 7、检查细胞生活力的试剂 检查细胞有无生活力,可用中性红甲基蓝试剂。配制的方法是先分别配制 1%中性红溶液

13、和 1%甲基蓝溶液,这两种溶液各取 1 份混合,用来鉴定细胞的死活。该试剂使活细胞的液泡染上红色,而使死细胞全部染成蓝色。(三)生理盐水 配方一 各种动物需用的生理盐水 哺乳类 需用生理盐水浓度是 0.9%。称取 0.9 克氯化钠,溶解在少量蒸馏水中,稀释到 100 毫升。 鸟类 需用的生理盐水浓度是 0.75%。称取 0.75 克氯化钠,溶解后用蒸馏水稀释到 100 毫升。 两栖类 需用的生理盐水浓度是 0.65%。称取 0.65 克氯化钠,溶解后用蒸馏水稀释到 100 毫升。 配方二 任氏(Ringers)生理盐水 氯化钠 6.5 克 碳酸氢钠 0.2 克 氯化钾 0.14 克 磷酸二氢钠

14、 0.01 克 氯化钙 0.12 克 此溶液用于变温动物,尤其常用于两栖类。 配方三 乐氏(Lockes)生理盐水 氯化钠 9.0 克 碳酸氢钠 0.10.3 克 氯化钾 0.42 克 氯化钙 0.24 克 以上溶液用于恒温动物,尤其常用于哺乳类。 (六)染色剂 1、细菌染色剂 配方一 齐氏(Ziehl)石炭酸品红染液 甲液 取石炭酸 5 克,溶解在 95 毫升蒸馏水中。 乙液 取 0.3 克碱性品红,放入研钵中研磨,逐渐加入 10 毫升 95%酒精,继续淹没,使它溶解。 将甲液和乙液混合后,摇匀,过滤,装瓶,备用。 配方二 罗氏(Loeffler s)美蓝染液 甲液 取 5 克美蓝,溶于 1

15、00 毫升 95%酒精中,制成美蓝酒精饱和液。 乙液 取氢氧化钾 0.01 克(或 1%氢氧化钾溶液 1 毫升) ,溶液也可用于放线菌染色, 0.1%浓度可用于酵母菌染色。 配方三 革兰氏(Gram s)染液 用此液染色因先用甲液染色,再加乙液固定,用丙液处理,最后用丁液复染。四种液体的配方如下: 甲液(结晶紫液) (1)结晶紫 (2)草酸铵 使用钱江(1) 、 (2)液相混,静置 48 小时后使用。 乙液(碘液) 丙液 95%酒精溶液 丁液(番红花红液) 2、细菌特殊染色剂 配方一 芽孢染液 用此配方染色是用甲液染色后,用乙液复染。 甲液 取 5 克孔雀绿,加入少量蒸馏水,使它溶解后,用蒸馏

16、水稀释到 100 毫升,即成孔雀绿染液。 乙液 取番红花红 0.5 克,加入少量蒸馏水,使它溶解后,用蒸馏水稀释到 100 毫升,集成番红花红复染液。 配方二 荚膜染液 此配方先用甲液染色,后用乙液复染。 甲液 取结晶紫 0.1 克,溶于少量蒸馏水后,加水稀释到 100 毫升,再加入 0.25 毫升冰醋酸一结晶紫染液。乙液 取硫酸铜( )31.3 克,溶于少量蒸馏水后,加水稀释到 100 毫升,即成 20%硫酸铜脱色剂。 配方三 鞭毛染液 甲液 饱和明矾溶液 2 毫升 5%石炭酸溶液 5 毫升 20%丹宁酸溶液 2 毫升 乙液 碱性品红 11 克 95%酒精 100 毫升 使用前取甲液 9 毫升和乙液 1 毫升相混,过滤即可。 3、植物细胞壁染色剂 配方一 纤维素细胞壁染液() 该液能染色纤维素细胞壁,还用于动植物中作浆质染色剂。 配方二 纤维素细胞壁染液() 该染液能把细胞壁染成紫色,胞质染成淡黄色,胞核染成棕色。 配方三 纤维素细胞壁染液() 甲液 取 1 克碘和 1.5 克碘化钾,溶于 100 毫

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