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1、血管内机械取栓过程中 Solitaire 支架对血管内膜损伤实验研究 韩志铁 王秀丽 袁海洪 宋晓东 天津市武清区人民医院神经外科 摘 要： 目的 探讨血管内机械取栓过程中 Solitaire 支架对血管内膜的损伤作用, 以评价血管内机械取栓的安全性。方法 共 12 只健康雄性新西兰兔成功制备血管内机械取栓模型, 随机分为 4 组 (每组各 3 只计 6 侧) , 对照组仅置入微导管而未释放支架, 第一取栓组、第二取栓组和第三取栓组分别于同一部位模拟血管内机械取栓 1、3 和 5 次。术后即刻切取双侧颈动脉, 行 HE 染色和超微结构观察, 采用半定量分析评价颈动脉损伤程度。结果 动物模型制备
2、过程中, DSA 显示血管壁直径 2.102.90 mm, 未见血管痉挛、出血、穿孔和动脉夹层, 均模型制备成功。不同处理组颈动脉损伤程度比较, 差异有统计学意义 (F=119.108, P=0.000) , 其中, 3 个取栓组颈动脉损伤程度均重于对照组 (q=3.136, P=0.001;q=7.463, P=0.000;q=10.682, P=0.000) , 第二取栓组和第三取栓组均重于第一取栓组 (q=3.330, P=0.000;q=8.160, P=0.000) , 第三取栓组亦重于第二取栓组 (q=4.830, P=0.000) 。光学显微镜观察, 随着血管内机械取栓次数的增加
3、, 颈动脉内膜损伤范围更广泛、损伤后颈动脉内膜反应更严重;扫描电子显微镜观察, 随着血管内机械取栓次数的增加, 颈动脉损伤深度增加。结论 血管内机械取栓过程中 Solitaire 支架可能损伤血管, 且随着取栓次数的增加, 血管损伤程度加重。关键词： 血栓切除术; 支架; 颈动脉; 血管内膜; 血管造影术, 数字减影; 模型, 动物; 作者简介：宋晓东, Email:收稿日期：2017-10-24基金：天津市卫生局科研计划项目 (项目编号:2014KZ132) Damage effect of Solitaire stent on tunica intima during thrombecto
4、myHAN Zhi-tie WANG Xiu-li YUAN Hai-hong SONG Xiao-dong Department of Neurosurgery, Wuqing District Peoples Hospital, Tianjin; Abstract： Objective To discuss the damage effect of Solitaire stent on tunica intima during thrombectomy, so as to evaluate the safety of thrombectomy. Methods Twelve healthy
5、 male New Zealand rabbits were randomly divided into 4 groups (3 rabbits in each group) , including control group and 3 thrombectomy groups. Microcatheter was used instead of stent in control group. The other 3 groups underwent mimic thrombectomy for 1, 3 and 5 times in the same position, respective
6、ly. The procedure was performed at both sides of carotid artery of each rabbit. Immediately after operation, bilateral carotid arteries of each rabbit were removed, performed HE staining and examined the ultrastructure under microscope. Semi.quantitative analysis was used to evaluate the damage of c
7、arotid artery. Results During the model preparation, DSA showed the diameter of vascular wall was 2.10-2.90 mm, and there was no vascular spasm, bleeding, perforation or arterial dissection. Therefore, the model was successfully established. The difference of carotid artery damage among different gr
8、oups was statistically significant (F =119.108, P=0.000) . Compared with control group, the carotid artery damage of 3 thrombectomy groups was more serious (q=3.136, P=0.001; q=7.463, P=0.000; q=10.682, P=0.000) . The carotid artery damage of the second and third thrombectomy group was more serious
9、than the first group (q=3.330, P=0.000; q =8.160, P=0.000) . The carotid artery damage of the third thrombectomy group was more serious than the second group (q=4.830, P=0.000) . Optical microscope observation showed that with the increase of times of thrombectomy, carotid intimal injury was more ex
10、tensive and intimal reaction was more severe. Scanning electron microscopy showed that with the increase of times of thrombectomy, the degree of carotid artery injury was increased. Conclusions Solitaire stent may injure tunica intima, and with the increase of times of thrombectomy, the damage to va
11、scular wall will increase.Keyword： Thrombectomy; Stents; Carotid arteries; Tunica intima; Angiography, digital subtraction; Models, animal; Received： 2017-10-24随着血管内机械取栓理念的发展、技术的成熟和材料的进步, 其所带来的治疗时间窗延长、血管再通迅速、无需使用静脉溶栓药等优点可以最大限度地改善急性缺血性卒中患者的临床预后1-2。Solitaire 支架越来越多地应用于急性缺血性卒中的血管内机械取栓治疗, 关于其对血管损伤的研究尚未见
12、诸报道。本研究通过制备血管内机械取栓动物模型, 探讨 Solitaire 支架对血管内膜的损伤作用, 评价血管内机械取栓的安全性, 以为临床治疗急性缺血性卒中提供理论依据。材料与方法一、实验材料1. 实验动物健康雄性新西兰兔 12 只, 月龄为 56 个月, 体重为 2.113.22 kg、平均为 (2.730.36) kg, 由天津裕达实验动物养殖有限公司提供许可证号:SCXK (津) 2016-000, 置于室温 (252) 、相对湿度 40%60%、12 h 昼-12 h 夜循环照明环境中饲养, 自由摄食、饮水。2. 试剂与仪器(1) 主要试剂:戊巴比妥钠 (规格:5 g/支) 为美国
13、Sigma-Aldrich 公司产品, 碘帕醇 (规格:15g/50 ml) 购自上海博莱科信谊药业有限责任公司, 质量分数为 3%的戊二醛溶液由美国 SPI 公司提供, 质量分数为 20%的甲醛溶液为天津开发区乐泰化工有限公司产品, 质量分数为 1%的四氧化二锇购自美国 SPI 公司, 其他试剂均为国产分析纯。 (2) 主要仪器:Leica M320 型手术显微镜为德国Leica 公司产品, CX23 型光学显微镜由日本 Olympus 株式会社提供, FEI Quanta 200 型扫描电子显微镜为荷兰 FEI 公司产品;Artis one 型数字减影血管造影术 (DSA) 扫描仪由德国
14、Siemens 公司提供。二、实验方法1. 动物模型制备与分组(1) 模型制备:所有实验动物均于耳缘静脉注射质量分数为 1%的戊巴比妥钠溶液 (1.001.50 ml/kg) 全身麻醉后固定, 于右侧腹股沟区依次分离皮肤、筋膜至肌肉组织, 显微镜下钝性分离股动脉鞘, 显露股动脉、股静脉和股神经, 以3-0 丝线穿过股动脉穿刺点两端, 手术显微镜下以 18 G 穿刺针 (美国 Cordis公司) 穿刺, 采用 Seldinger 技术置入 4F 动脉鞘 (美国 Cordis 公司) , 全身肝素化 (70 U/kg) 抗凝, 固定动脉鞘。于 DSA 所示路径图下沿动脉鞘置入 4F单弯导管 (美国
15、 Cordis 公司) , 微导丝导引下送至颈动脉近端, 导管内持续生理盐水冲洗, 血管内机械取栓准备完毕。于微导丝导引下, 将 Rebar18 微导管 (美国 EV3 公司) 送至颈动脉远端, 经微导管注射碘帕醇 1 ml, DSA 所示路径图下将 Solitaire 支架 (4 mm20 mm, 美国 EV3 公司) 送至微导管开口处并释放, 停留 3 min 后再持续经微导管注射碘帕醇以观察是否存在血管痉挛、穿孔、破裂和动脉夹层, 略回撤微导管并连同 Solitaire 支架一起撤出单弯导管, 完成血管内机械取栓过程。DSA 显示实验动物血管壁直径 2.102.90 mm, 与人类大脑中
16、动脉和基底动脉直径相符, 具有可比性3, 代表模型制备成功。 (2) 动物分组:采用随机数字表法随机分为 4 组, 即对照组、第一取栓组、第二取栓组、第三取栓组, 每组各 3 只动物, 每只动物取双侧颈动脉, 每组各 6 侧标本。对照组仅置入微导管, 不释放支架;第一取栓组, 模拟血管内机械取栓 1 次;第二取栓组, 于同一部位模拟血管内机械取栓 3 次;第三取栓组, 于同一部位模拟血管内机械取栓 5 次。取栓后立即作颈部正中切口, 逐层分离筋膜和肌肉组织, 寻找颈动脉, 于手术显微镜下分离颈动脉鞘, 结扎颈动脉两端, 切取颈动脉标本, 立即于 37以生理盐水冲洗 3 次。手术切除标本分别行 HE 染色和超微结构观察。2. HE 染色手术切除的新鲜标本经生理盐水冲洗后 2 min, 置于质量分数为 20%的甲醛溶液中, 常规脱水、石蜡包埋、制备 5m 层厚的组织切片, 行 HE 染色, 并于光学显微镜下观察颈动脉内膜损伤情况。3. 超微结构观察手术切除的新鲜标本立即于 4置于质量
