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1、高山辣根菜总黄酮的提取工艺实验方法:1、标准曲线的确定(1) 准确称取 10mg 芦丁标准品,用 70%乙醇转溶于 50ml 容量瓶中,定容至刻度,摇匀,即为标准溶液,浓度为 0.2g/L。(2) 取 1ml 标准液加入 5%NaNO2 0.3ml,摇匀后静置 6min,后加入10%AlNO30.3ml,摇匀后静置 6min,再加 1mol/LNaOH2ml,摇匀,70%乙醇定容至 10ml,静置 30min,在 200nm700nm 范围类测定吸光度。(3) 分别取标准溶液 0.、1、2、3、4、5ml 于 10ml 容量瓶中,加入5%NaNO2 0.3ml,摇匀后静置 6min,后加入 1
2、0%AlNO30.3ml,摇匀后静置 6min,再加 1mol/LNaOH2ml,摇匀,70%乙醇定容至 10ml,静置30min,在最大吸收波长下测定吸光度,以浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准准曲线.,相关系数 r 应达到三个 9,写出标准曲线方程。2、高山辣根菜总黄酮的测定方法称取一定量的高山辣根菜样品,采取热回流法提取,过滤后,取 1ml 于10ml 容量瓶中,加入 5%NaNO2 0.3ml,摇匀后静置 6min,后加入10%AlNO30.3ml,摇匀后静置 6min,再加 1mol/LNaOH2ml,摇匀,70%乙醇定容至 10ml,静置 30min,在最大吸收波长下测定吸光度
3、,根据标准曲线方程,计算黄酮含量。3、高山辣根菜总黄酮的提取工艺(1) 单因素试验分别选择不同浓度的乙醇溶液,不同提取时间,不同料液比进行单因素试验。1)料液比的影响 在乙醇浓度 60%,提取时间 2h 条件下,分别选取料液比 1:10、1:20、1:30、1:40 、1:50 (g/ml)进行热回流提取。2)提取时间的影响 在乙醇浓度 60%,最佳料液比的条件下,分别选取提取时间为 1h、2h 、3h 进行热回流提取。3)乙醇浓度的影响 在最佳料液比和最佳提取时间的条件下,分别选取乙醇浓度为 40%,50%,60%,70% 进行热回流提取。(2) 正交试验根据单因素实验结果,设定正交试验因素水平表水 平因 素1 2 3A 料液比(g/ml) 1:30 1:40 1:50B 提取时间 (h) 1 2 3C 乙醇浓度(%) 50 60 70正交试验结果分析 L9(3 3)因素编号 A 料液比 B 提取时间 C 乙醇浓度 总黄酮提取率(%)1 1 1 12 1 2 23 1 3 34 2 2 35 2 3 16 2 1 27 3 3 28 3 1 39 3 2 1