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1、从动物血液提取 SOD的工艺流程及技术(过氧化物岐化酶，Superoxide dismutase)存在于动物、植物及微生物中的金属酶，主要分为以下几种类型(如表)。表的分类及存在类用于延缓人体衰老，防止色素沉着，并治疗慢性多发性关节炎等症，也被广泛地应用于生产日用化工品，如化妆护肤品，对抗衰老、去除脸面雀斑等有明显的效果。随着日用化工产品的发展及在临床上的应用，的需求量越来越大。我国动物血源丰富，牛血、猪血的价格较低，生产工艺简单。所以，用牛血、猪血来提取具有较大的发展前途。现介绍用牛血、猪血来提取的方法。1、工艺流程2、技术操作要点（1）分离：新鲜动物血(牛血或猪血)收集后，用纱布滤出血液，
2、以除去血液中的杂毛及其它异物，然后加入柠檬酸钠(一般 10血液中加380柠檬酸钠)，充分搅拌均匀后以 3000转/分的速度(以下如同)离心 1520 分钟，收集血球，血浆可用于凝血酶的提取。（2）去除血红蛋白：用 0.9%氯化钠溶液离心洗涤已收集的血球三次，每次氯化钠溶液用量为血球体积的 2倍为宜。往已离心洗涤的血球中加入等体积的去离子水(或蒸馏水)，在温度 2左右的条件下剧烈搅拌 3040分钟，并在同温下放置 24小时左右。因为牛血对热较稳定，但猪血对热敏感，所以在分离或提取整个过程中温度控制在04，时间不要超过 3天。若因其它原因，不能及时处理时，可以冷冻保存溶血溶液，并不影响其的活力。（
3、3）萃取：往溶血溶液中分别缓慢加入溶血的血球 0.250.3 倍体积的 95%冷乙醇和 0.150.2 倍体积的冷氯仿，充分搅拌 30分钟，静置 30分钟，然后进行离心分离，收集上清液。此时应注意有机溶剂的适当比例，才能有效地分离去除蛋白质等杂质，同时必须控制温度在2左右(不要超过 5)，才能达到最佳分离效果。（4）沉淀：向上述上清液中加入 12 倍体积的冷丙酮，充分搅拌均匀，此时可产生大量白色沉淀，静置 30分钟，然后进行离心分离，收集沉淀物。再用 1.5倍的冷丙酮洗涤沉淀物，在温度 2的条件下静置24小时左右。再进行离心分离，收集沉淀物。并把上层丙酮液合并在一起，回收丙酮，此丙酮可以重新使
4、用。（5）热变：把值为 7.67.8，浓度为 2.5微摩尔/升的2424 缓冲溶液加入到上述沉淀中，并在温度 60下搅拌30分钟，然后迅速冷却到 20，离心分离收集上清液。因为牛血在值 5.39.5，猪血在值 7.69.0 范围内较稳定，所以必须掌握的最佳。（6）洗涤：向上清液中加入等体积的温度为 2的丙酮，充分搅拌，并静置 30分钟，再进行离心分离，收集沉淀物。此沉淀物中加入2424 缓冲溶液，充分搅拌溶解，离心分离，收集上清液。（7）精制：柱长 40，柱内径 3的柱中装入已处理的二乙胺乙基葡萄聚糖凝胶离子交换剂(50)，用值为 7.7，浓度为 2.5微摩尔/升的2424 缓冲溶液上柱，当流出液的值为 7.6时，将上述上清液上柱，用值为 7.6的缓冲溶液进行梯度洗脱，收集具有的活性峰。因为值能控制分子的带电状态，盐浓度能控制结合键的强弱，所以上柱精制分离时应注意值和盐浓度。（8）干燥：将洗脱液装入透析袋内，并在去离子水中进行透析，将透析液进行超滤浓缩，冷冻干燥可得精制品。把精制品装入棕色瓶内，压紧瓶盖，放在通风、避光、干燥的地方保存。
