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1、微生物学实验课程教学大纲课程名称（中文）：微生物学实验课程名称（英文）：Experiment in Microbiology食品科学与工程、食品质量与安全专业 渤海大学生物与食品科学学院食品检验教研室二零零四年十月2微生物学实验教学大纲一、开课对象食品质量与安全和食品科学与工程专业二、所需先修课程基础生物学、生物化学三、实验教学内容1微生物形态学实验2微生物营养学实验3微生物生理学实验上述实验分别由 24 个实验有机地组合在一起形成一个系统的综合性的实验。该实验是微生物学的基础实验，以微生物生物学为主线分别设立微生物形态学、微生物营养学和微生物生理学实验。四、实验目的通过微生物学的实验教学，学
2、生掌握微生物基本操作能力和基本研究方法，为本专业的后续课程动物流行病学 、 食品微生物检验 、 肉品卫生检验等打下坚实的基础。本课程实验将原来的微生物 10 个实验组合为 3 个综合性实验，目的在实验过程中注重培养学生的综合实验能力，提高学生专业素质。五、实验教学重点、难点及教学方式实验重点、难点及教学方式综合表表 1内容序号 重点（难点）内容简述 指导方式1 油镜的原理与使用 教师讲解示范并挑选学生演练2 细菌涂片及革兰氏染色 教师讲解示范并挑选学生演练3 培养基的制备 教师讲解示范并挑选学生演练4 高压灭菌原理、方法和注意事项 教师讲解示范并挑选学生演练5 平板划线分离 教师讲解示范并挑选
3、学生演练6 液体稀释分离 教师讲解示范并挑选学生演练7 细菌接种与培养特征 学生讨论与教师讲解相结合8 糖发酵试验的原理和操作方法 学生讨论与教师讲解相结合9 吲哚试验的原理与操作方法 教师讲解示范并挑选学生演练10 VP 试验的原理、操作方法及注意事项 学生讨论与教师讲解相结合11 柠檬酸盐试验的原理和操作方法 教师讲解示范并挑选学生演练六、对学生的实验操作技能、能力和科学作风等方面的要求表 2概述 与哪些教学内容有联系实验 操作 （技能）1显微镜技术2细菌制片染色技术3培养基制作与高压灭菌技术4微生物分离培养技术5微生物生理生化实验技术1普通生物学中的动植物细胞形态学2分析化学中的酸碱滴定
4、3生物化学中的糖代谢4物理学中的光学学生的 能力1生物学形态观察能力2分析判断和综合思维能力3独立的实验操作能力4无菌操作素养5实验写作能力 1普通生物学中的动植物细胞形态特征观察2分析化学中的酸碱滴定操作3生物化学中的糖代谢分析4物理学中的光学部分科学 作风1培养学生良好的操作规范2培养学生求真务实的实验作风3培养学生强烈的求知精神4培养学生的卫生安全意识5遵守实验纪律1普通生物学中的动植物细胞形态特征2分析化学中的酸碱滴定3生物化学中的糖代谢4物理学中的光学部分3七、实验教学条件，根据具体组（类）实验提出并列表说明*组（类）实验条件明细表表 3名称 规格 数量 是否具备一、 仪器设备1电光
5、源显微镜2无菌操作台3高压灭菌锅4电热恒温干燥箱5酸度计6恒温培养箱7电热恒温水浴锅8冰箱9培养基分装装置10架盘药物天平11放大镜12电子天平13 微量吸管14其它二、培养基1糖发酵培养基2柠檬酸盐培养基3蛋白胨水4葡萄糖蛋白胨水5营养琼脂6各类生化试剂7其它三、玻璃器皿1灭菌吸管2灭菌锥形瓶3灭菌培养皿4灭菌试管5灭菌刀、剪子、镊子等四、染色液1革兰氏染色液（草酸铵结晶紫、碘液、乙醇、沙黄）2美兰染色液3碱性复红染色液4孔雀绿染色液 五、菌种1变形杆菌 2大肠杆菌3金黄色葡萄球菌4枯草芽孢杆菌5 产气肠杆菌6米曲霉7青霉8酿酒酵母六、各类细菌涂片、动植物组织切片1000双面单人立式180数
6、字式361461040g500g40.0001g10g1l1mL配制配制配制配制配制配制配制1mL/10mL500mL100大、中、小冻干制品冻干制品冻干制品冻干制品冻干制品冻干制品冻干制品冻干制品20421224144411是是是是是是否是是否否是是是是是是是是是是是是是是是是是是是是是否是是是4八、实验考核1考核的内容 实验的基本操作； 实验报告，注重考察学生实验的主动性、分析问题和解决问题的能力； 实验纪律与实验卫生； 实验出勤。2对实验报告评阅，主要是看学生是否能按实验的要求独立完成实验，报告撰写是否能反映出学生的能力和素质。3考核评分，总分 10 分。按照渤海大学实验教学成绩评定暂行
7、规定中的成绩评定办法给出实验成绩。九、教学进度表 4实验内容概述 所用学时 周 实验类型1微生物形态学实验2微生物营养学实验3微生物生理学实验121083510121416综合性综合性综合性总学时数：30 十、思考题与参考资料（一）思考题1用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片和镜头之间加滴什么油？起什么作用？2影响显微镜分别率的因素有哪些？3你认为制备细菌染色标本时，尤其要注意哪些环节？4你认为哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性？其中最关键的环节是什么？5你的染色结果是否正确？如果不正确，请说明原因。6培养基配好后，为什么必修立即灭菌？如何检查灭菌后的培养基是无菌的？7在配制培养基的操作过程
8、中应注意什么问题？为什么？8高压灭菌开始之前，为什么要将锅内的冷空气排尽？灭菌完毕后，为什么待压力降到“0”时才能打开排气阀，开盖取物？9在使用高压蒸汽灭菌时，怎样杜绝一切不安全因素？10如何确定平板上某个单个菌落是否为纯培养？请写出实验的主要步骤。11你所做的涂布平板法和划线法是否较好地得到了单个菌落？如果不是，请分析原因。12接种环接种前后灼烧的目的是什么？为什么在接种前一定要将其冷却？如何判断灼烧过的接种环已冷却？13如何描述各种微生物在斜面上、半固体和液体培养基中的培养特征？14假如某种微生物可以有氧代谢葡萄糖，发酵试验应该出现什么结果？15讨论 IMVIC 试验在食品检验中的意义？1
9、6为什么大肠杆菌是甲基红反应阳性，而产气杆菌为阴性？这个试验与 VP 试验最初底物和最终产物有何异同处？为什么会出现不同？17洗手前后的手指平板，菌落数有无区别？18.灭菌在微生物实验操作中有什么重要意义？19.为什么干热灭菌比湿热灭菌所需的温度高，时间长？请设计干热灭菌与湿热灭菌效果比较实验方案。20.在干热灭菌操作过程中应注意哪些问题，为什么？21.在进行糖发酵试验时如何区分氧化产酸和发酵产酸，目的和意义是什么？22.在进行 VP 试验时，判断试验结果阳性与阴性的标准和操作步骤如何？23.柠檬酸盐试验是一类什么性质的试验，如何判断试验的结果？24.讨论大肠杆菌 IMVIC 的实验结果在肠杆
10、菌科鉴定中的重要意义？25.在进行吲哚试验时，向培养基中加入吲哚应注意哪些问题？有什么作用？26.比较各种不同来源的食品样品，哪一种样品的平板菌落数与菌落类型最多？527.人多地实验室与无菌室相比，平板上的菌落数与菌落类型有什么区别？你能解释一下造成这种区别的原因吗？28.通过微生物环境分离实验，在防止培养物的污染和防止细菌的扩散方面，你学到些什么？如何利用到食品保藏方面？29.什么是物镜的同焦想象？它在显微镜观察中有什么意义？30.试列表比较低倍镜、高倍镜及油镜各方面的差异。为什么在使用高倍镜及油镜时应特别注意避免粗调节器的误操作？（二）参考资料 1 沈萍，范秀荣，李广武主编微生物学实验（第
11、 3 版） M. 北京:高等教育出版社，1996，62 周德庆主编微生物学实验手册M 上海：上海科学技术出版社， 19863 林 稚 兰 ， 黄 秀 梨 主 编 . 现 代 微 生 物 学 与 实 验 技 术 M 北 京 ： 科 学 出 版 社 ， 20004 周阜棣，俞子牛，何绍江主编农业微生物学实验技术M 北京：中国农业出版社，19965 徐孝华主编普通微生物学M 北京：北京农业大学出版社， 19926 武汉大学，复旦大学生物系微生物教研室编微生物学（第 2 版）M北京：高等教育出版社，19877 徐岩,等译.James M.Jay 编著. 现代食品微生物学M. 北京: 中国轻工业出版社, 2001.78 赵斌，何绍江主编， 微生物学实验 ，科学出版社，2002。指导教师签字：白凤翎：2004 年 8 月 20 日
