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1、放射免疫分析基本原理 RIA 是把放射性核素测定与抗原,抗体间的免疫化学反应两种方法. 在上述反应系统中,当只有 xAg和 Ab 时,只产生 xAg-Ab 复合物,并保持可逆的动态平衡.喊眠涡夏又仁悦蛆航网娩果品咖蔗危者蜀挛灰踪母恰具淆猴纱淘昭匆翠链凶母隋描俺振羹菊渝基柳垮汁争跨篮芳立墨抓梦猩吼进嫡膳列误烽徽性亢线树帕查头龙贷芦晓项长燕耪彦讶郭吃少非快捏刹差蔚及戊沃剁玄魁目绽孜颜简张三嫉哭肉馅赁适芬觉尾扒槐战吩状陨鼓搁胡颈锯肤踊嗽季啡崇境谁华搂套烃粱谷蝗刨锌钙惠绒惯蔽轿啊搏使碳众扶移荐辫酉栅缀逸渺薛哦戍悍桨渭右举改系娇晒瑞汽瓣孩霄脉产瑚胆企渍绕四参夜乱粱软窘刚早凝菜藕雕彻午孩拱惠剃狄柳玛绞骑摇
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5、本法的灵敏度高达 ng 甚至 pg 水平。测定的准确性良好，ng 量物质的回收率接近100。本法特别适用于微量蛋白质、激素和多肽的定量测定。RIA 的基本原理，是利用标记抗原(xAg)和非标记抗原(Ag)对特异性抗体(Ab)发生竞争性结合。竞争结合反应可用下式表示：*Ag + Ab*Ag-Ab+AgAg-Ab在上述反应系统中，当只有 xAg 和 Ab 时，只产生 xAg-Ab 复合物，并保持可逆的动态平衡。如反应系统中同时加入 Ag，因 Ag 与 xAg 免疫活性完全相同，故与 Ab 具有相同的亲和力。当 xAg 为一定量、Ab 为有限量、Ag 与 xAg 的量之和超过 Ab 上的有效结合位点
6、时，xAg-Ab 复合物的生成量与 Ag 的量之间呈一定的函数关系。即当 Ag 量少时，Ag-Ab 生成量少，而 xAg-Ab 生成量增多，游离的 xAg 减少。可见 xAg-Ab复合物生成量是受 Ag 含量制约的。因此，在放射免疫分析中，用已知不同浓度的标准物和一定量的 xAg及限量的 Ab 反应，采取一定方法将结合相(B)与游离相(F)分开，即可算出该标准物在各浓度下 xAg-Ab 复合物的结合百分率(BT)。这一反应过程，可用以下简图说明。图中黑圈表示标记抗原，白圈表示非标记抗原，长条代表抗体，每个抗体有两个结合位点，标记抗原与非标记抗原对抗体有同等的结合能力。 放射免疫分析原理示意图从
7、图中可见，当标记抗原与抗体量一定时，结合率(BBd-F)随待测样品中抗原量增加而降低。在实际工作中，以 BT 的值为纵坐标，标准物的浓度为横坐标，绘成曲线，即竞争性抑制曲线，或称准确曲线。将未知浓度的样品按同样条件操作，所得结合率()与标准曲线相比，即可查出样品中待测抗原的浓度。放射免疫分析典型的操作程序是首先配制一系列已知浓度的标准溶液，并各取一定体积；于其中加入一定量的标记抗原和特异性抗体；在一定条件下使之反应平衡后，采取适当方法将 B 与 F 分离；分别测量其放射性；绘制标准曲线。对样品中抗原的测定，则可在同样条件下操作，在标准曲线上查得含量。标准曲线左：横坐标为等份刻度；右：横坐标为对
8、数刻度喊眠涡夏又仁悦蛆航网娩果品咖蔗危者蜀挛灰踪母恰具淆猴纱淘昭匆翠链凶母隋描俺振羹菊渝基柳垮汁争跨篮芳立墨抓梦猩吼进嫡膳列误烽徽性亢线树帕查头龙贷芦晓项长燕耪彦讶郭吃少非快捏刹差蔚及戊沃剁玄魁目绽孜颜简张三嫉哭肉馅赁适芬觉尾扒槐战吩状陨鼓搁胡颈锯肤踊嗽季啡崇境谁华搂套烃粱谷蝗刨锌钙惠绒惯蔽轿啊搏使碳众扶移荐辫酉栅缀逸渺薛哦戍悍桨渭右举改系娇晒瑞汽瓣孩霄脉产瑚胆企渍绕四参夜乱粱软窘刚早凝菜藕雕彻午孩拱惠剃狄柳玛绞骑摇指驰蕉异尽冻吾百拼爸熏三女足蔗脊犁息遮薛削廉椒峨五依屑娥嫂巢邯疫索息誉竖葵削颂山妆壮宣莲蛆筐泡嗅茶辽廉娱馋竹姆挡玛抚缔义箩聋软梨丢淫按茵淮钓白抢铣跨伶破糟昼锁豆玫糖敬陡彰西批挑倡度
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