《罗格列酮对2种高血压大鼠的降压作用及机制》由会员分享，可在线阅读，更多相关《罗格列酮对2种高血压大鼠的降压作用及机制（13页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1罗格列酮对 2 种高血压大鼠的降压作用及机制作者：王林军，张延斌，程仁力，周维东 【摘要 】 目的 观察胰岛素增敏剂罗格列酮（rosiglitazone，RSG）对胰岛素抵抗高血压大鼠及两肾一夹肾血管性高血压大鼠血压的影响，探讨其作用机制。方法 用 10%果糖水喂养雄性 SD 大鼠制备胰岛素抵抗高血压大鼠（ insulin resistance hypertensive rat，IRHR ）模型，同时用两肾一夹法制备肾血管性高血压大鼠（two-kidney, one-clipped renovascular hypertensive rat，RHR）模型，观察 RSG 对 2 组大鼠的降压作
2、用，通过检测空腹血糖（fasting blood glucose，FBG） 、空腹胰岛素（fasting serum insulin，FINS） 、瘦素（leptin，LP） 、甘油三酯（triglyceride，TG ）及计算胰岛素敏感性指数（insulin sensitivity index，ISI ）等指标，从胰岛素抵抗（insulin resistance，IR）/高胰岛素血症（hyperinsulinemia，HIS）角度探讨 RSG 可能的降压机制。结果 RSG 处理后 IRHR 组大鼠收缩压（systolic blood pressure，SBP ） 、FINS、LP 和 TG
3、与处理前相比明显降低，ISI 明显升高（P0.05） 。RSG 处理后 RHR 组大鼠与处理前相比SBP、FINS、LP、TG、ISI 和 FBG 与 RHR 组相比无明显变化（P0.05） 。结论 RSG 可明显降低 IRHR 模型的血压而对 RHR2模型无明显降压作用。其机制主要通过改善 IR/HIS 以及高 LP 血症起降血压作用。 【关键词】 罗格列酮；胰岛素抵抗；高血压；胰岛素；瘦素；大鼠模型 Abstract: Objective To observe the anti-hypertensive effect of insulin sensitizer rosiglitazone
4、(RSG) on the models of insulin resistance hypertensive rat (IRHR) and two-kidney, one-clipped renovascular hypertensive rat (RHR), and to study the antihypertensive mechanism of RSG. Methods The model of IRHR was established by feeding standard fodder and 10% fructose water, while the model of two-k
5、idney, one-clipped RHR was formed by constricting the left kidney artery. The anti-hypertensive mechanism of RSG was studied by examining the ratio of insulin resistance / hyperinsulinemia (IR/HIS) and by measuring systolic blood pressure (SBP), fasting blood glucose (FBG), fasting serum insulin (FI
6、NS), leptin (LP), triglyceride (TG) and calculating insulin sensitivity index (ISI). Results As compared with that in the IRHR group at the end of experiment, in the RSG treated IRHR group, the levels of SBP, LP, FINS and TG were decreased obviously, the level of ISI was increased obviously (P0.05).
7、 When comparison was made between the two RHR groups, no significant changes were found in the levels of SBP, LP, FINS, TG, ISI and FBG after RSG treatment (P0.05). Conclusion RSG has an obvious anti-hypertensive effect on IRHR, but not on RHR. The results suggest the mechanism of anti-hypertensive
8、effect of RSG is indirectly through the improvement of IR/HIS and high LP. Key words: rosiglitazone; insulin resistance; hypertension; insulin; leptin; model of rat 近年来，通过临床和流行病学研究，人们逐渐意识到高血压（EH）并不单纯是血流动力学的改变，还常伴有糖耐量低减、高胰岛素血症（hyper-insulinemia，HIS ） 、血脂异常等代谢紊乱，称为胰岛素抵抗（insulin resistance，IR） 。研究表明 EH
9、 人群约 60%有IR，一些前瞻性研究提示 HIS 是致高血压的重要原因1 ，不难推测 IR/HIS 是高血压的发病基础之一，而改善机体胰岛素敏感性有可能成为防治 IR/HIS 人群高血压的有效措施。本实验通过建立胰岛素抵抗高血压大鼠（insulin resistance hypertensive rat，IRHR ）模型及两肾一夹肾血管性高血压大鼠（two-kidney, one-clipped renovascular hypertensive rat，RHR）模型，观察胰岛素增敏剂罗格列酮（rosiglitazone ，RSG）对 2 组大鼠的收缩压（systolic blood pre
10、ssure，SBP） ，空腹胰岛素（fasting serum 4insulin，FINS ） 、瘦素（ leptin，LP）等指标的影响，探讨 RSG 可能的降压机制。 1 材料和方法 1.1 实验材料 1.1.1 实验动物 Sprague-Dawley（SD）大鼠 67 只，雄性，体重180 220 g，普通级，徐州医学院实验动物中心提供。 1.1.2 主要实验药品和试剂 马来酸罗格列酮片（批号：05110006）为葛兰素史克（天津）有限公司产品，结晶果糖购自北京广联行化工产品有限公司，大鼠胰岛素酶联免疫定量检测试剂盒（批号：0609083）及大鼠瘦素酶联免疫定量检测试剂盒（批号：0609
11、084）均购自上海西唐生物制品有限公司。 1.1.3 主要实验仪器及设备 微量血糖仪及血糖仪试纸（美国罗氏公司） ，MacLab 生理记录仪（澳大利亚 ADI 公司） ，全自动生化分析仪（日本 Olympus 公司） ，Thermo-Multiskan Mk3 型酶标仪（芬兰雷勃公司） 。 1.2 实验方法 1.2.1 动物分组及处理步骤 首先，67 只雄性 SD 大鼠分笼（每笼 45 只） ，置于温度（222），光照 12 h/24 h，普通饲料、自由饮水的环境中适应性饲养 1 周后进行实验。普通饲料由徐州医学院实验动物中心提供。5大鼠随机分为 3 组。空白对照组（control 组，C 组
12、）16 只，普通饲料+自来水喂养；胰岛素抵抗高血压大鼠组（IRHR 组）24只，普通饲料+10%果糖水喂养；两肾一夹肾血管性高血压大鼠（RHR 组） 27 只，行左肾动脉缩窄术（术中麻醉意外死亡 2 只、血管变异死亡 1 只，最后存活 24 只） ，术后普通饲料+自来水喂养。喂养 4 周后，大鼠禁食 810 h，3 组各随机抽取 8 只行颈动脉插管，测 SBP 及留取血标本后断头处死。指标检测证实造模成功后，进入第 5 周各组继续原来的饲养，从 IRHR 组及 RHR 组各随机抽取8 只大鼠分别用 RSG 每日 5 mg/kg 灌胃，建立 IRHR+RSG 组和RHR+RSG 组。RSG 灌胃
13、期间，为保持各组间的均衡性，其余各组大鼠均用等量的自来水灌胃。第 8 周末所有大鼠均禁食 810 h 后行颈动脉插管，测 SBP 及留取血标本后断头处死。 1.2.2 RHR 模型的制备 参考文献2-3 。准备外径为 0.20 mm 的针灸针（长约 10 cm）若干根，并消毒保存。大鼠经 1%戊巴比妥钠 30 mg/kg 腹腔麻醉，俯卧位固定于操作台上。体外触及左侧肾脏，剪去局部 3 cm3 cm 被毛，消毒铺巾。在触诊肾脏与脊柱之间沿与脊柱平行方向切开皮肤，切口 1.52.5 cm。逐层分离皮下筋膜及肌肉到达肾脏，以盐水棉球推开肾周脂肪囊，用开睑器撑开充分显露手术视野，于腹膜后仔细分离肾动脉
14、，用玻璃分针追查至肾脏，检查无误后，把直径为 0.20 mm 的针灸针与肾动脉血管长轴紧贴平行放置，6用无菌丝线扎紧肾动脉和针灸针，然后小心抽去针灸针，这样左肾动脉血流就部分被阻断，形成左肾动脉狭窄。依次缝合肌肉和皮肤。术后 3 天内青霉素（3104 U/d）腹腔注射预防感染。 1.2.3 大鼠血压的测量 实验大鼠经 1% 戊巴比妥钠 30 mg/kg 腹腔麻醉，仰卧位固定于操作台上，体外触及气管软骨，剪去局部 3 cm3 cm 被毛，消毒铺巾。在气管软骨左侧沿与气管平行方向切开皮肤，切口 23 cm，逐层分离皮下组织及肌层，暴露左颈动脉鞘，将左颈动脉同迷走神经等结构分离，于左颈动脉下预置 2
15、 根缝线，远心端的缝线进行结扎，近心端用动脉夹夹闭，于近结扎线附近将预充有肝素的插管向近心端方向插入，松开血管夹，固定插管。插管尾部通过换能器连接 MacLab 生理记录仪可直接显示 SBP。观察 1015 min，待血压稳定后记录 SBP。 1.2.4 成模标准 IRHR 模型的成模标准：依据 Reaven4的报道，果糖喂养的 SD 大鼠 TG、SBP、FINS 的平均水平达到以下标准者，即：TG1.8 mmol/ L， SBP142 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa） ，FINS正常对照组平均值的 2 倍者为 IRHR 模型。RHR 模型的成模标准：依据赵清等5的报道，造模处理后
16、凡血压比处理前高 20 mmHg 以上且高于 140 mmHg 者确认为高血压模型形成。 1.3 主要观测指标 大鼠 SBP、FBG、FINS、LP、TG 及计算 ISI。大鼠颈动脉7SBP 用 MacLab 生理记录仪测量；FINS 及 LP 用 ELISA 试剂盒测定；FBG 以微量血糖测定仪测定；TG 用全自动生化分析仪测定；ISI 由公式：ISI=1/(FBGFINS)计算得出（FBG、FINS 的单位分别是mmol/L、mU/L） ，此值为非正态分布，计算时取其自然对数6 。1.4 统计学处理 采用 SPSS 11.5 软件进行统计分析，采用 Sigma-Plot 10.0软件绘图。定量资料以均数标准差（s）表示，多组间差异的比较采用单因素方差分析（one-way ANOVA）
