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1、 上海味泽生物科技有限公司 志贺氏菌检验1 范围本标准规定了食品中志贺氏菌的检验方法。本标准适合用于各类食品和食物中毒样品中志贺氏菌的检验。2 术语和定义2.1 志贺氏菌志贺氏菌 shigella 是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌，通称痢疾杆菌 dyseatery bacteria。致病性较强，感染 10-200 个即可发病，人类是唯一的患者和带菌者。3 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：3.1 恒温培养箱：361，301。3.2 冰箱：25。3.3 恒温水浴箱：461。3.4 天平：感量 0.1g。3.5 震荡器。3.6 无菌吸管:1ml（具 0.01ml
2、刻度） 、10ml（具 0.1ml 刻度）或微量移液器及吸头。3.7 无菌锥形瓶：250ml 500ml。3.8 无菌培养皿：直径 90mm。4 培养基和试剂4.1 GN 增菌液4.2 HE 琼脂4.3 SS 琼脂4.4 麦康凯琼脂4.4 伊红美蓝琼脂（EMB）4.5 三糖铁琼脂（TSI）4.6 葡萄糖半固体管5 操作步骤5.1 增菌以无菌操作取检样 25g(ml),加入装有 225mlGN 增菌液的广口瓶内，固体食品用均质器以 8000r/min 打碎 1min,或用乳钵加灭菌砂磨碎，粉状食品用金属匙或玻璃棒研磨使其乳化，于 361培养 6h8h。培养时间视细菌生长情况而定，当培养液出现轻微
3、混浊时即应中止培养。5.2 分离和初步生化试验5.2.1 取增菌液 1 环，划线接种于 HE 琼脂平板或 SS 琼脂平板一个；另取 1 环划线接种于麦康凯琼脂平板或伊红美蓝琼脂平板一个，于361培养 18h24h，志贺氏菌在这些培养基上呈现无色透明不发酵乳糖的菌落。5.2.2 挑取平板上的可疑菌落，接种三糖铁琼脂和葡萄糖半固体各一管。一般应多挑几个菌落，以防遗漏，经 361培养18h24h，分别观察结果。5.3 判定下述培养物可以弃去：a)在三糖铁琼脂斜面上呈蔓延生长的培养物；b)在 18h24h 内发酵乳糖、蔗糖的培养物；c）不分解葡萄糖和只生长在半固体表面的培养物；d）产气的培养物；e）有动力的培养物；f）产生硫化氢的培养物。凡是乳糖、蔗糖不发酵，葡萄糖产酸不产气（福氏志贺氏菌 6 型可产生少量气体） ，无动力的菌株，可做血清学分型和进一步的生化试验或送检。
