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1、实验六 细菌的生理生化实验,实验目的巩固微生物无菌接种技术；了解细菌鉴定中常用的生理生化实验的原理和方法,微生物的生理生化反应,微生物细胞在酶的催化下进行各种各样的生理生化反应把微生物细胞在一定的条件下培养，通过观察生理现象和检查代谢产物，可以了解微生物的代谢过程和代谢的特点由于不同的微生物可能具有不同的酶，代谢途径和代谢产物可能也有不同，生理生化反应是微生物分类鉴定的重要指标之一。,淀粉水解实验,淀粉培养基,+,淀粉培养基,+,接种,+,变色圈，水解圈,培养24h,加卢哥氏碘液I-KI,结果： 有水解圈淀粉水解实验阳性，用 + 表示； 无水解圈淀粉水解实验阴性，用 - 表示；,糖发酵实验,原
2、理：丙酮酸裂解生成乙酰CoA与甲酸，甲酸在酸性条件下在甲酸氢解酶作用下可进一步裂解生成H2和CO2产酸产气缺少甲酸氢解酶产酸不产气步骤：配制糖发酵培养基接种培养（约24h)观察结果结果：紫色无气泡，既不产酸也不产气用 - 表示；黄色无气泡，产酸不产气，用 + 表示；黄色且有气泡，产酸产气，用 0 表示。,甲基红实验（M.R实验）,原理微生物进行混合酸发酵，产生各种有机酸pH下降加入指示剂甲基红红色步骤：配制蛋白胨水培养基接种培养（约24h) 加入指示剂甲基红12滴观察结果结果： 红色M.R实验阳性，用 + 表示； 不变色M.R实验阴性，用 - 表示；,V.P实验,V.P实验,步骤：配制蛋白胨水
3、培养基接种培养（约24h) 510d 40%KOH, 510d 5%a-奈酚和少量肌 醇 ，取出塞子，用力震荡，保温（37度1530min）观察结果结果： 红色V.P实验阳性，用 + 表示； 不变色V.P实验阴性，用 - 表示。,实验内容,以组为单位进行淀粉水解实验、糖发酵实验、 V.P实验和M.R实验。实验菌种：淀粉水解实验、糖发酵实验：大肠杆菌、苏云金芽孢杆菌V.P实验和M.R实验：大肠杆菌、产气杆菌注意事项：实验报告：1、列表记录实验结果2、思考题：第4小题,四大类细胞型微生物菌落的鉴定,初步鉴定,确证：显微镜观察,微生物菌落特征的记录和描述,菌落形态：形状，边缘情况大小：表面状况：湿润、粘稠或干燥，隆起或扁平，厚或薄，是否粉末状质地：致密或疏松蔓延程度：与培养基结合程度颜色（正面、反面、边沿、中心）气味,示例,将菌株在查氏琼脂平板上25 培养7d 后菌落直径1819mm ， 圆形，边缘齐整不蔓延，表面丝绒状并具放射状沟纹，较厚，中央稍凸起，菌丝初为浅黄褐色近于淡粉红色，老后颜色变深，有黄色渗出液，背面呈黄褐色。,谢谢！,
