《（人教版）高考生物创新ppt课件：选修1-第2讲-微生物的培养与应用》由会员分享，可在线阅读，更多相关《（人教版）高考生物创新ppt课件：选修1-第2讲-微生物的培养与应用（42页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、2017/1/17 该课件由【语文公社】选修一 生物技术实践专题 第二讲 微生物的培养与应用 选修一 生物技术实践专题 创新大课堂 考点 全线突破 考点一 微生物的实验室培养 关键点击 1 培养基的种类 (1)按物理状态分类 培养基种类 特点 用途 液体培养基 不加凝固剂 工业生产 半固体培养基 加凝固剂 (如琼脂 ) 观察微生物的运动、分类鉴定 固体培养基 微生物分离、鉴定，活菌计数，菌种保藏 选修一 生物技术实践专题 创新大课堂 (2)按功能分类 种类 制备方法 原理 用途 举例 选择培养基 培养基中加入某些化学物质 依据某些微生物对某些物质的抗性而设计 从众多微生物中分离所需的微生物加入
2、青霉素分离得到酵母菌和霉菌 鉴别 培养 基 培养基中加入某种指示剂或化学药品 依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中的特定指示剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计 鉴别不同种类的微生物 伊红美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌 选修一 生物技术实践专题 创新大课堂 条件 结果 常用方法 器具 使用条件 应用范围 消毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部 的部分对人 体有害的 微生物 煮沸消毒法 100 煮沸 5 6 常用品、培养器皿 巴氏消毒法 80 煮 15 75 煮 30奶、不耐高温的液体 化学药剂消毒法 70%乙醇、氯气等 实验时操作者手、水源 选修一 生物技术实践专题 创新大课
3、堂 条件 结果 常用方法 器具 使用条件 应用范围 灭菌 利用强烈的理化因素， 使细菌体内蛋白质变性 而达到杀灭细菌的目的 杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 灼烧 灭菌法 酒精灯 外焰 适用于操作时试管口及接种环的灭菌 干热 灭菌法 干热 灭菌箱 160 170 ，维持1 2 h 玻璃器皿、金属工具 高压蒸汽灭菌法 高压蒸汽灭菌锅 恒温121 ，维持 1530养基及容器的灭菌 选修一 生物技术实践专题 创新大课堂 板划线法与稀释涂布平板法 方法 平板划线法 稀释涂布平板法 注意事项 (1)接种环的灼烧：第一次划线前：接种环上的微生物，避免污染培养物每次划线前：杀死残留菌种，保证每次划线
4、菌种来自上次划线末端划线结束后：杀死残留菌种，避免污染环境和感染操作者 (2)灼烧接种环之后，要冷却后再进行操作，以免温度太高杀死菌种 (3)划线时最后一区域不要与第一区域相连 (4)划线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破 (1)稀释操作时：每支试管及其中的 9 液管等均需灭菌；操作时，试管口和移液管应在离火焰 1 2 (2)涂布平板时：涂布器用体积分数为 70%酒精消毒，取出时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精酒精灯与培养皿距离要合适，移液管管头不要接触任何物体 选修一 生物技术实践专题 创新
5、大课堂 方法 平板划线法 稀释涂布平板法 目的 在培养基上形成由单个菌种繁殖而来的子细胞群体 菌落 培养 平板冷凝后倒置培养，使培养基表面的水分更好地挥发，防止皿盖上水珠落入培养基造成污染 优点 可以观察菌落特征，对混合菌进行分离 可以计数，可以观察菌落特征 缺点 不能计数 吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延 适用范围 适用于好氧菌 适用于厌氧菌和兼性厌氧菌 选修一 生物技术实践专题 创新大课堂 考点二 分解尿素细菌的分离和计数 关键点击 1 筛选菌株的原理 在选择培养基的配方中 ， 把尿素作为培养基中的唯一氮源 ， 原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长 。 选修一 生物技术
6、实践专题 创新大课堂 2 统计菌落数目的方法 (1)显微镜直接计数法 原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板 ， 在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量 。 计数板是一块特制的载玻片 ， 上面有一个特定的面积为 1 .1 在 1 5个 (或 16个 )中格 ， 每个中格进一步划分为 16个 (或 25个 )小格 ， 但计数室都由 400个小格组成 。 选修一 生物技术实践专题 创新大课堂 操作 ： 将清洁干燥的血细胞计数板盖上盖玻片 ， 再将稀释的样品滴在盖玻片边缘 ， 稍等片刻 ， 待细菌全部沉降到计数室底部再在显微镜下统计 4 5个中格中的细菌数 ， 并求出每个小格所含细菌的平均数 ，
7、再按公式求出每毫升样品中所含的细菌数 。 计算公式 ： 每毫升原液所含细菌数 每小格平均细菌数40010 000稀释倍数 。 缺点 ： 不能区分死菌与活菌 。 选修一 生物技术实践专题 创新大课堂 (2)间接计数法 (活菌计数法 ) 原理 ： 当样品的稀释度足够高时 ， 培养基表面生长的一个菌落 ， 来源于样品稀释液中的一个活菌 。 通过统计平板上的菌落数 ， 就能推测出样品中大约含有多少活菌 。 操作 a 设置重复组 ， 增强实验的说服力与准确性 。 将待测样品经一系列 10倍稀释 ， 选择三个稀释度的菌液 ， 分别取 0.1 用无菌涂布器将菌液涂布于整个平板表面 ， 放在适宜的温度下培养
8、， 计算菌落数 。 选修一 生物技术实践专题 创新大课堂 b 为了保证结果准确 ， 可将同一稀释度的菌液加到 3个或3个以上的平板上 ， 进行涂布 、 培养 ， 一般选择菌落数在 30300的平板进行计数 。 c 实验误差 ： 利用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低 。 这是因为当两个或多个细胞连在一起时 ，平板上观察到的只是一个菌落 。 计算公式 ： 每克样品中的菌株数 (CV)M 选修一 生物技术实践专题 创新大课堂 3 实验流程 土壤取样 样品的稀释挑选能生长的微生物菌落将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上选修一 生物技术实践专题 创新大课堂 4 鉴定分解尿素的细菌 (
9、 1) 原理： 脲酶2N 于 养基碱性增强， 高，因此可通过检测 ( 2) 方法：以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌，若指示剂变红，则 高，说明该种细菌能分解尿素。 选修一 生物技术实践专题 创新大课堂 考点三 分解纤维素的微生物的分离 关键点击 1 两种刚果红染色法的比较 方法 先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应 在倒平板时就加入刚果红 过程 培养基长出菌落 覆盖 液( 质量浓度为 1 m g/ m L ) 10 15 m R 溶液 加入 l 溶液 ( 物质的量浓度为 1 m L ) 15 m aC l 溶液 产生透明圈 配制 液 ( 质量浓度为10 m g / m
10、L ) 灭菌 按照1 m L C R 溶液 / 200 m L 培养基比例混匀 倒平板 培养 透明圈 选修一 生物技术实践专题 创新大课堂 优点 显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用 操作简便，不存在菌落的混杂问题 缺点 操作繁锁，加入刚果红会使菌落之间发生混杂 由于纤维素和琼脂、土豆汁中都含淀粉类物质，可能使产生淀粉酶的微生物也形成透明圈，即假阳性反应有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红形成明显透明圈，与纤维素分解菌不易区分 选修一 生物技术实践专题 创新大课堂 (1)分离纤维素分解菌的实验中先用选择培养基 ， 再用鉴别培养基 。 选择培养基为液体培养基 ，
11、 以纤维素作为碳源和能源的微生物可以正常生长 ， 而其他绝大多数微生物不能正常生长；因培养基中无凝固剂 ， 为液体培养基 ， 利用液体培养基能使营养成分充分消耗 ， 以增加纤维素分解菌的浓度 。 (2)鉴别培养基含琼脂 ， 为固体培养基 ， 因为要在培养基上形成我们肉眼可见的菌落 。 刚果红染色法应用的就是此培养基 。 选修一 生物技术实践专题 创新大课堂 3 微生物的鉴别 (1)外观特征鉴别：根据微生物在固体平板培养基表面形成的菌落的形状 、 大小 、 隆起程度和颜色等特征进行鉴别 。 (2)指示剂鉴别：如分解尿素的细菌的鉴别 ， 培养基中加入酚红指示剂 ， 培养某种微生物后 ， 培养基变红
12、说明该种微生物能够分解尿素 。 (3)染色法鉴别：如分解纤维素的微生物的鉴别 ， 利用刚果红染色法 ， 根据具有不变红的透明圈的菌落鉴别能分解纤维素的微生物 。 选修一 生物技术实践专题 创新大课堂 (4)根据培养基筛选微生物 营养缺陷型选择培养基：通过控制培养基的营养成分 ，使营养缺陷型微生物不能正常生长 。 例如 ， 无氮培养基可以分离自生固氮微生物；石油作为唯一碳源时 ， 可以分离出能消除石油污染的微生物；以尿素为唯一氮源的培养基可以分离尿素分解菌等 。 选修一 生物技术实践专题 创新大课堂 在培养基中加入某种化学物质的选择培养基：在完全培养基中加入某些化学物质 ， 利用加入的化学物质对
13、微生物产生的影响 ， 抑制某些微生物 ， 同时选择所需的微生物 。 例如 ， 加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌等真菌 ， 同时抑制细菌的生长；加入高浓度的食盐可以选择培养金黄色葡萄球菌 。 选修一 生物技术实践专题 创新大课堂 4 微生物纯化的三种途径 (1)单菌落挑取法：利用平板划线法或稀释涂布平板法接种到固体平板培养基表面 ， 直接根据微生物菌落的特征利用单菌落挑取的方法获得目的微生物 。 (2)选择培养法：利用选择培养基对微生物进行选择培养 ， 直接获得目的微生物 。 (3)鉴定培养法：利用鉴别培养基使目的微生物菌落呈现特有的特征 ， 然后筛选目的微生物 。 选修一 生物技术实践专题 创新大课堂 考情 随堂体验 考情一 微生物的实验室培养 1 高中生物学实验中 ， 在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是 ( ) A 将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中 B 将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上 C 将转基因植物叶片接种到无菌培养基上 D 将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上 选修一 生物技术实践专题 创新大课堂 解析 在酿制葡萄酒的过程中 ， 如果灭菌不彻底会影响葡萄酒的品质 ， 但影响不大；在制作腐乳的过程中 ， 发酵过程有多种微生物的参与 ， 所以该过程不进行严格的无菌操作对结果影响不大；在植物组织培养过程中 ， 如果灭菌不彻底 ， 杂菌产生的物质
