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1、分类号： Q815 单位代码： 10431密 级 ： 学 号： 10431O9067硕士学位论文利 用 重 组 大 肠 杆 菌 合 成 壳 寡 糖作 者 姓 名 武 传 菊专 业 发酵工程所 在 学 院 食品与生物工程学院指 导 教 师 姓 名 张 大 伟专 业 技 术 职 务 副 教 授2012 年 06 月 08 日IA Thesis Submitted for the Application ofthe Masters Degree of EngineeringSynthesis of chitooligosaccharides usingrecombinant Escherichia
2、coliCandidate: Wu ChuanjuSpecialty: Fermentation EngineeringSupervisor: Associate Professor Zhang DaweiShandong Institute of Light Industry, Jinan, ChinaJune, 2012I学 位 论 文 独 创 性 声 明本人声明，所呈交的学 位论文系在导师指导下 本人独立完成的研究成 果。文中引用他人的成果，均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用于其他学位申请的论文或成果，与我一同工作的同志对
3、本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明 并 表 示 谢 意 。论 文 作 者 签 名 ： 日 期 ： 年 月 日学 位 论 文 知 识 产 权 权 属 声 明本人在导师指导下所完 成的论文及相关的职务 作品，知识产权归属山 东轻工业学院。山东轻工业学院享有以任何方式发表、复制、公开阅览、借阅以及申请专 利 等 权 利 ， 同 意 学 校 保 留 并 向 国 家 有 关 部 门 或 机 构 送 交 论 文 的 复 印 件 和 电 子 版 ，本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，署名单 位 仍 然 为 山 东 轻 工 业 学 院 。论 文 作 者 签 名 ： 日
4、 期 ： 年 月 日导 师 签 名 ： 日 期 ： 年 月 日I目 录摘 要.IABSTRACT. II第一章 绪论. 11.1 概 述 . 11.2 糖 生 物 学 的 研 究 进 展 . 11.3 寡 糖 . 11.3.1 寡 糖 的 定 义 . 11.3.2 寡 糖 的 种 类 . 21.3.3 寡 糖 的 应 用 领 域 . 21.3.4 寡 糖 的 各 种 制 备 方 法 . 31.4 壳 寡 糖 与 几 丁 寡 糖 . 51.5 结 瘤 因 子 . 61.6 论 文 的 研 究 目 的 及 意 义 . 7第二章 脱 乙 酰 基 酶 （ NodB） 在 大 肠 杆 菌 中 的 表 达
5、 及 活 性 检 测 . 92.1 引 言 . 92 2 材 料 与 方 法 . 92.2.1 实 验 材 料 . 92.2.2 实 验 方 法 . 112.3 结 果 与 分 析 . 152.3.1 重 组 nodB 基 因 表 达 载 体 的 构 建 及 鉴 定 . 152.3.2 NodB 蛋 白 在 重 组 大 肠 杆 菌 中 的 的 表 达 . 162.3.3 重 组 NodB 蛋 白 的 活 性 鉴 定 . 18第 三 章 利 用 重 组 大 肠 杆 菌 高 密 度 发 酵 培 养 产 生 壳 寡 糖 及 壳 寡 糖 的 分离纯化. 223.1 引 言 . 223.2 实 验 材 料 . 22I3.2.1 菌 株 、 基 因 及 质 粒 . 223.2.2 分 子 克 隆 用 的 试 剂 及 基 因 分 析 软 件 . 223.2.3 培 养 基 配 方 及 组 成 . 233.2.4 主 要 实 验 试 剂 及 溶 液 . 233.3 主 要 实 验 仪 器 . 243.4 实 验 及 分 析 方 法 . 253.4.1 nodBC 基 因 序 列 的 确 定 及 重 组 质 粒 pUC-nodBC 的 鉴 定 . 253.4.2 三 角 瓶 中 重 组 菌 的
