《利用天然阳离子聚合物壳聚糖提高有效性的口服疫苗微球的研究（毕业设计-药剂学专业）》由会员分享，可在线阅读，更多相关《利用天然阳离子聚合物壳聚糖提高有效性的口服疫苗微球的研究（毕业设计-药剂学专业）（66页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、广 东 药 学 院硕 士 学 位 论 文利 用 天 然 阳 离 子 聚 合 物 壳 聚 糖 提 高 有 效 性 的 口 服 疫 苗 微 球 的 研究姓 名 ： 靳 美 霞申 请 学 位 级 别 ： 硕 士专 业 ： 药 剂 学指 导 教 师 ： 胡 巧 红20090501广 东 药 学 院 硕 士 研 究 生 学 位 论 文利 用 天 然 阳 离 子 聚 合 物 壳 聚 糖 提 高有 效 性 的 口 服 疫 苗 微 球 的 研 究靳 美 霞 （ 药 剂 学 ）指 导 老 师 ： 胡 巧 红 教 授摘 要本 课 题 致 力 于 将 疫 苗 药 物 制 备 成 口 服 有 效 的 阳 离 子 微
2、球 制 剂 ， 拓 展 疫 苗 的 应 用 范围 。 微 球 的 粒 径 大 小 、 疏 水 性 、 荷 电 性 等 理 化 性 质 都 直 接 影 响 到 微 球 给 药 系 统 的 靶 向作 用 、 转 运 效 率 和 免 疫 效 果 。 针 对 影 响 M 细 胞 摄 取 微 球 的 这 三 大 主 要 因 素 ， 本 课 题 中分 别 以 亲 水 性 材 料 海 藻 酸 钠 、 壳 聚 糖 (Cs)， 疏 水 性 材 料 乳 酸 /羟 基 乙 酸 共 聚 物 （ PLGA）作 为 载 体 ， 以 牛 血 清 白 蛋 白 （ BSA） 为 模 型 药 物 制 备 表 面 包 裹 壳 聚
3、糖 的 阳 离 子 微 球 ，考 察 不 同 类 型 的 载 体 材 料 对 微 球 的 形 态 、 粒 径 、 蛋 白 包 封 率 、 载 药 量 、 表 面 荷 电 情 况和 释 放 行 为 的 影 响 。 在 论 文 的 第 一 章 中 ， 以 亲 水 性 材 料 海 藻 酸 钠 和 壳 聚 糖 为 载 体 材 料 ，采 用 乳 化 交 联 法 制 得 BSA 海 藻 酸 钠 /壳 聚 糖 微 球 ， 80%以 上 的 微 球 粒 径 在 1 m 10 m， 微 球 表 面 带 正 电 ， 包 封 率 为 （ 81.41.5） %， 载 药 量 为 （ 6.40.1） %， 但 是 在模
4、 拟 胃 液 和 模 拟 肠 液 中 突 释 都 很 明 显 （ 0.5 h 内 超 过 60%） ， 在 模 拟 肠 液 中 释 药 速 度 很快 ， 2 h 内 基 本 释 放 完 全 。 在 论 文 的 第 二 章 ， 以 疏 水 性 材 料 PLGA 和 亲 水 性 材 料 壳 聚 糖为 载 体 材 料 ， 采 用 W/O/W 复 乳 -溶 剂 挥 发 法 制 得 BSA PLGA/Cs 微 球 ， 90%以 上 的 微 球 粒径 在 1 m 10 m， 随 着 外 水 相 中 壳 聚 糖 浓 度 的 增 加 ， 微 球 表 面 由 带 负 电 转 变 为 带正 电 ， 包 封 率 为
5、 （ 80.46.3） %， 载 药 量 为 （ 8.40.3） %。 与 PLGA 微 球 相 比 ， 壳 聚糖 的 加 入 显 著 地 减 少 了 突 释 ， 延 缓 了 释 药 速 度 。 壳 聚 糖 的 分 子 量 对 释 药 速 度 影 响 显 著 。在 论 文 第 三 章 ， 以 鸡 新 城 疫 苗 为 模 型 药 物 ， 创 新 性 地 采 用 S/O/W 乳 化 -溶 剂 挥 发 法 制备 得 到 鸡 新 城 疫 苗 PLGA/壳 聚 糖 阳 离 子 微 球 。 采 用 红 血 球 凝 集 反 应 （ HA） 测 定 疫 苗 的效 价 ， 考 察 制 备 过 程 中 各 工 艺
6、 因 素 对 疫 苗 活 性 的 影 响 。 采 用 血 凝 抑 制 反 应 （ HI） 检 测动 物 血 清 中 的 抗 体 水 平 ， 对 微 球 口 服 免 疫 效 果 做 出 初 步 评 价 。 结 果 表 明 ： 疫 苗 活 性 的I广 东 药 学 院 硕 士 学 位 论 文丧 失 主 要 来 自 于 有 机 溶 剂 和 长 时 间 的 常 温 下 磁 力 搅 拌 ， 而 且 与 常 规 W/O 法 制 备 初 乳 的过 程 相 比 ， S/O 法 可 以 明 显 地 保 护 疫 苗 的 活 性 。 当 口 服 PLGA/壳 聚 糖 微 球 中 药 量 为 滴鼻 剂 量 的 10 倍
7、 时 ， 可 以 产 生 与 滴 鼻 免 疫 相 当 的 免 疫 效 果 ， 明 显 优 于 PLGA 微 球 组 。 在论 文 的 第 四 章 ， 以 乙 肝 疫 苗 为 模 型 药 物 制 备 PLGA/壳 聚 糖 阳 离 子 微 球 ， 并 采 用 酶 联 免疫吸附试验（E LISA） 对 口 服 微 球 产 生 的 的 体 液 免 疫 效 果 做 初 步 评 价 。 制 得 的 微 球 表面 带 正 电 ， 微 球 平 均 粒 径 为 3.86 m， 95%以 上 的 微 球 粒 径 小 于 10 m。 测 得 微 球 的包封率为（7 0.73.2） %， 载 药 量 为 （ 9.45
8、0.11） %。 皮 下 注 射 组 产 生 的 抗 体 水 平显 著 高 于 PLGA 口 服 微 球 组 和 PLGA/Cs 口 服 微 球 组 ， 而 PLGA/Cs 口 服 微 球 组 的 抗 体 水平 优 于 PLGA 口 服 微 球 组 。关键词：微球 口 服 壳 聚 糖 疫 苗II广 东 药 学 院 硕 士 研 究 生 学 位 论 文Study on microspheres to improve the effectiveness of vaccine byoral administration based on natural cationic polymer-chitosa
9、nJin Meixia (Pharmaceutics)Supervisor: Professor Hu Qiao-hongAbstractThe subject is committed to obtain cationic microspheres to improve the effectiveness ofvaccine by oral administration and expand the scope of application of the vaccine. Thephysical and chemical properties of microspheres such as
10、particle size, hydrophobicity andelectric charge have a direct impact on targeting, transfection efficiency and immune effectin particulate drug delivery system. Based on the three main factors affecting the uptake ofmicrospheres by M cell, hydrophilic materials (sodium alginate and chitosan) andhyd
11、rophobic material (PLGA) are used as carrier separately in this study, bovine serumalbumin (BSA) is used as a model drug to preare cationic microspheres coated by chitosan.Influences of different types of carrier materials on microsphere morphology, particle size,encapsulation efficiency, drug loadi
12、ng, surface charge and release behavior are investigated.In the first chapter, BSAloaded alginate/chitosan microspheres are prepared by anemulsion method and further incubated in chitosan. Microspheres are obtained with morethan 80% less than 10 m, positively charged on the surface, the encapsulatio
13、n efficiency is(81.4 1.5)%, loading rate is (6.4 0.1)%. The initial burst release is obvious (more than60% in half an hour) both in 0.1molL-1 HCl (pH 1.2) and PBS (pH 7.4). The release rate ofdrug is fast in PBS (pH 7.4). Drug released entirely in 2 h.In the second chapter, hydrophobic PLGA and hydr
14、ophilic chitosan are used together ascarrier, BSAloaded PLGA/chitosan microspheres are prepared by W/O/W doubleemulsion solvent evaporation method with more than 90% than 10 m, encapsulationefficiency is (80.4 6.3)%, loading rate is (8.4 0.3)%. With the concentration of chitosanincreasing in the ext
15、ernal water phase, negative microspheres change into positivemicrospheres. Compared with PLGA microsphere, the addition of chitosan significantlyreduce the burst release and sustain the release rate. The molecular weight of chitosan has ai广 东 药 学 院 硕 士 学 位 论 文significant impact on the release rate o
16、f drug.In the third chapter, using Newcastle vaccine as a model drug, a novel S/O/Wemulsion-solvent evaporation method is used to prepare Newcastle vaccine PLGA/chitosancationic microspheres. Hemagglutination reaction (HA) is used to determine the titer ofNewcastle vaccine, which can be used to investigate the influences of different factors onactivity of the vaccine in the process. Hemagglutination inhibition reaction
