常用pH缓冲溶液的配制和pH值

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1、常用 pH缓冲溶液的配制和 pH值1 / 12序号 溶液名称 配制方法 pH 值 1 pH1.7氯化钾-盐酸溶液:13.0 ml 0.2 mol/L HCl 与25.0 ml 0.2 mol/L KCl混合均匀后,加水稀释至 100 ml2 pH2.3氨基乙酸-盐酸溶液:在 500 ml 水中溶解氨基乙酸 150 g,加 480 ml浓盐酸,再加水稀释至 1L3 pH2.8一氯乙酸-氢氧化钠溶液:在 200 ml 水中溶解 2 g 一氯乙酸后,加40 g NaOH,溶解完全后再加水稀释至 1 L4 pH3.6邻苯二甲酸氢钾-盐酸溶液:把 25.0 ml 0.2 mol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与

2、 6.0 ml 0.1 mol/L HCl混合均匀,加水稀释至 100 ml 5 pH4.8邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠溶液:把 25.0 ml 0.2 mol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与 17.5 ml 0.1 mol/L NaOH混合均匀,加水稀释至 100 ml 6 pH5.4六亚甲基四胺-盐酸溶液:在 200 ml水中溶解六亚甲基四胺 40 g,加浓 HCl 10 ml,再加水稀释至 1 L 7 磷酸二氢钾-氢氧化钠 把 25.0 ml 0.2 mol/L的磷酸二氢钾与23.6 ml 0.1 mol/L NaOH混合均匀,加水稀释至 100 ml 6.8 8 硼酸-氯化钾-氢氧化钠 把 25

3、.0 ml 0.2 mol/L的硼酸-氯化钾与4.0 ml 0.1 mol/L NaOH 混合均匀,加水稀释至 100 ml 8.0 9 氯化铵-氨水 把 0.1 mol/L 氯化铵与 0.1 mol/L 氨水以 2:1 比例混合均匀 9.1 10 硼酸-氯化钾-氢氧化钠 把 25.0 ml 0.2 mol/L 的硼酸-氯化钾与43.9 ml 0.1 mol/L NaOH混合均匀,加水稀释至 100 ml 10.0 11 氨基乙酸-氯化钠-氢氧化钠 把 49.0 ml 0.1 mol/L 氨基乙酸-氯化钠与51.0 ml 0.1 mol/L NaOH混合均匀 11.6 12 磷酸氢二钠-氢氧化

4、钠 把 50.0 ml 0.05 mol/L Na2HPO4 与26.9 ml 0.1 mol/L NaOH 混合均匀,加水稀释至 100 ml 12.0 13 氯化钾-氢氧化钠 把 25.0 ml 0.2 mol/L KCl 与66.0 ml 0.2 mol/L NaOH混合均匀,加水稀释至 100 ml 13.0 常用 pH缓冲溶液的配制和 pH值2 / 12一、常用溶液的配制(文章来自: 医药园 (http:/)/ 整理:zfg) (一)溶液配制注意事项 1药品要有较好的质量 试剂分为优级纯(保证试剂,Guaranteed reagent,GR)、分析试剂(Antalytical rea

5、gent,AR)化学纯(Chemical pure,CP)和实验试剂(Laboratory reagent,LR)等等。工业用的化学试剂,杂质较多,只在个别情况下应用,如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。 2药品称量要精确。 3配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水,比电阻值在 50万欧姆以上,pH在 5.57.0之间才可应用,在组织培养等特殊用途时应注意此项要求,配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。 配好后的溶液,应立即除菌处理(如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质),以防杂菌生长。 (二)0.067(1/15)Mol/L 磷酸缓冲液 11/15Mol/L 磷酸二氢钾溶液的配制:称取磷

6、酸二氢钾(KH2PO4,AR)9.08g,用蒸馏水溶解后,倾入 1 000ml容量瓶内,再稀释至刻度(1 000ml)。2/15Mol/L 磷酸二氢钠溶液的配制:称取无水磷酸氢二钠(Na2HPO4,A.R.)9.47g(或者 Na2HPO42H2O 11.87g)用蒸馏水溶解后,放入 1 000ml容量瓶内,再加蒸馏水稀释至刻度(1 000ml)。 3按附表的比例,配制成不同 pH值的缓冲溶液。 附表 1 磷酸盐缓冲液配制法(单位:毫升) pH 1/15Mol/L Na2HPO4 1/15Mol/L KH2PO4 pH 1/15Mol/L Na2HPO4 1/15Mol/L KH2PO4 5.

7、8 8.0 92.0 7.1 66.6 23.4 5.9 9.9 90.1 7.2 72.0 28.0 常用 pH缓冲溶液的配制和 pH值3 / 126.0 12.2 87.8 7.3 76.8 23.2 6.1 15.3 84.7 7.3 80.8 19.2 6.2 18.6 81.4 7.5 84.1 15.9 6.3 22.4 77.6 7.6 87.0 13.0 6.4 26.7 73.3 7.7 89.4 10.6 6.5 31.8 68.2 7.8 91.5 8.5 6.6 37.5 62.5 7.9 93.2 6.8 6.7 43.5 56.5 8.8 94.7 5.3 6.8

8、49.6 50.4 8.1 95.8 4.2 6.9 55.4 44.6 8.2 97.0 3.0 7.0 61.1 38.9 8.4 98.0 2.0 (三)0.15Mol/L PB 液 附表 2 0.15Mol/LPB液配制法 pH 0.15Mol/L Na2HPO4(ml) 0.15Mol/L NaH2PO4(ml) 6.4 26.5 73.5 6.6 37.5 62.5 6.8 49.0 51.0 7.0 61.0 39.0 7.2 72.0 28.0 7.4 81.0 19.0 7.6 87.0 13.0 Na2HPO42H2O分子量=175.05 0.15Mol/L 溶液含 26.

9、7g/L。 Na2HPO412H2O分子量=358.22 0.15Mol/L 溶液含 53.7g/L。 NaH2PO4H2O分子量=138.00 0.15Mol/L 溶液含 20.7g/L。 NaH2PO42H2O分子量=156.03 0.15Mol/L 溶液含 23.4g/L。 (四)0.2Mol/L PB 缓冲液 附表 3 0.2mol/L PB缓冲液配制法 常用 pH缓冲溶液的配制和 pH值4 / 12pH 0.2 Mol/L Na2HPO4(ml) 0.2Mol/L NaH2PO4(ml) 5.8 8.0 92.0 6.0 12.3 87.7 6.2 18.5 81.5 6.4 26.

10、5 73.5 6.6 37.5 62.5 6.8 49.0 51.0 7.0 61.0 39.0 7.2 72.0 28.0 7.4 81.0 19.0 7.6 87.0 13.0 7.8 91.5 8.5 8.0 94.7 5.3 0.2Mol/L Na2HPO42 H2O溶液 35.61g/L Na2HPO412 H2O溶液含 71.64g/L 0.2Mol/LNaH2PO4H2O溶液含 27.60g/L NaH2PO42 H2O溶液含 31.21g/L 欲配 0.1Mol/L PB缓冲液则在 0.2Mol/L PB缓冲液的基础上加 H2O稀释 1倍即可。欲配制 PBS液时,则在溶液中加

11、0.85的 NaCl溶液即可。 (五)无钙镁离子磷酸缓冲盐水(PBS) (0.15Mol/L PH 7.2) NaCl 8.0g KCl 0.2g Na2HPO4 1.15g (如为 Na2HPO412H2O,则为 2.89g) KH2PO4 0.2g 常用 pH缓冲溶液的配制和 pH值5 / 12将上述试剂依次溶于 1 000ml去离子水中,完全溶解后,115高压灭菌10min15min,存在 4冰箱中备用。此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。 (六)硼酸盐缓冲液(Borate saline buffer) 文章来自: 医药园(http:/)/ 整理:zfg 1硼酸(3BO3)

12、 0.2Mol/L硼酸:硼酸 12.37g加水至 1 000ml。 2硼砂(Na2B4O7) 0.05Mol/L硼砂:硼砂 19.07g加水至 1 000ml。 附表 4 不同 pH的 0.2Mol/L硼酸缓冲液配制法 pH 0.05Mol/L硼砂(ml) 0.2Mol/L 硼酸(ml) pH 0.05Mol/L 硼砂(ml)0.2Mol/L硼酸(ml) 7.4 1.0 9.0 8.2 3.5 6.5 7.6 1.5 8.5 8.4 4.5 5.5 7.8 2.0 8.0 8.7 6.0 4.0 8.0 3.0 7.0 9.0 8.0 2.0 (七)巴比妥缓冲液 1pH8.2 离子强度 0.0

13、5Mol/L巴比妥缓冲液 巴比妥钠 47.6g 蒸馏水 3 000ml 1.17N HCl55.0ml (1.17 N HCl=193ml 浓 HCl加 1 807ml蒸馏水) 将 4.76g巴比妥钠溶于 3 000ml蒸馏水。 加 1.17 N HCl 55ml。 用 HCl调节 pH到 8.2,并加蒸馏水至 4 265ml。 2pH8.4 0.06Mol/L 巴比妥缓冲液 巴比妥 1.84g 巴比妥钠 10.30g 常用 pH缓冲溶液的配制和 pH值6 / 12加蒸馏水至 1 000.00ml 3pH8.6 0.06Mol/L 巴比妥缓冲液 巴比妥 1.66g 巴比妥钠 12.76g 加蒸

14、馏水 1 000.00ml (八)0.2Mol/L 醋酸盐缓冲液 见表附表 5 附表 5 0.2Mol/L醋酸盐缓冲液配制法 pH 0.2Mol/L Tris(ml) 0.1Mol/L HCl(ml) pH 0.2Mol/L Tris(ml) 0.1Mol/L HCl(ml) 23 37 23 37 9.10 8.95 25 5 8.06 7.90 25 27.5 8.92 8.76 25 7.5 7.96 7.82 25 30.0 8.75 8.60 25 10.5 7.87 7.73 25 32.5 8.62 8.48 25 12.5 7.77 7.63 25 35.0 8.50 8.37

15、 25 15.5 7.66 7.52 25 37.5 8.40 8.27 25 17.5 7.54 7.40 25 40.0 8.32 8.18 25 20.0 7.36 7.22 25 42.5 (九)三羟甲基甲烷盐酸缓冲液(TrisHCl 缓冲液) 不同 pH,0.05Mol/L 25ml0.2Mol/L三羟甲基氨基甲烷加 ml0.1NHCl,加水稀释至 100ml(见下表)附表 6 TrisHCl缓冲液配制法 pH 0.2Mol/L Tris(ml) 0.1NHCl (ml)pH 0.2Mol/L 常用 pH缓冲溶液的配制和 pH值7 / 12Tris(ml) 0.1NHCl (ml) 23 37 23 37 9.10 8.96 25 5 8.05 7.90 25 27.5 8.92 8.78 25 7.5 7.96 7.82 25 30.0 8.74 8.60 25 10.0 7.87 7.73 25 32.5 8.62 8.48 25 12.5 7.77 7.63 25 35.0 8.50 8.37 25 15.0 7.66 7.52 25 37.5 8.40 8.27 25 17.5 7.54 7.40 25 40.0 8.32 8.1

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