《他莫昔芬(TAM)对乳腺癌T47D细胞雌激素受体(ER)表达与18F-氟代脱氧葡萄糖(18F-FDG)摄取的影响（毕业设计-影像医学与核医学专业）》由会员分享，可在线阅读，更多相关《他莫昔芬(TAM)对乳腺癌T47D细胞雌激素受体(ER)表达与18F-氟代脱氧葡萄糖(18F-FDG)摄取的影响（毕业设计-影像医学与核医学专业）（60页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、硕 士 学 位 论 文论 文 题 目 他莫昔芬 (TAM)对乳腺癌 T47D 细胞雌激素受体 (ER)表达与 18F-氟代脱氧葡萄糖 (18F-FDG)摄取的影响研究生姓名 黄 景 峰指导教师姓名 吴 翼 伟专 业 名 称 影 像 医 学 与 核 医 学研 究 方 向 肿 瘤 核 医 学论文提交日期 2013 年 4 月他 莫 昔 芬 (TAM)对 乳 腺 癌 T47D 细 胞 雌 激 素 受 体 (ER)表 达 与 18F-氟 代 脱 氧 葡 萄 糖 (18F-FDG)摄 取 的 影 响 中 文 摘 要他 莫 昔 芬 (TAM)对 乳 腺 癌 T47D 细 胞 雌 激 素 受 体 (ER)表
2、达 与 18F-氟 代 脱 氧 葡 萄 糖 (18F-FDG)摄 取 的 影 响中 文 摘 要第 一 部 分 乳 腺 癌 T47D 细 胞 ER 的 表 达 及 TAM 治 疗 后 的 表 达 改 变目 的 研 究 测 定 乳 腺 癌 T47D 细 胞 ER 和 ER 的 表 达 及 经 TAM 作 用 后 的 改 变 情 况 。方 法 在 凹 形 细 胞 培 养 皿 内 接 种 的 细 胞 数 量 为 1104 个 /皿 ， 培 养 24 小 时 后 ， 利 用免 疫 荧 光 的 方 法 测 定 ER 和 ER 的表达情况。采用细胞增殖和细胞毒性检测试剂(CCK-8)法 ， 在 96 孔 板
3、 内 接 种 的 细 胞 数 量 为 1104/孔 ， 分 别 测 定 加 入 不 同 浓 度 的TAM(0 1.010-5 mol/L)200l， 培 养 24h 后的细胞生长抑制率，并计算 TAM 的 半 数致 死 剂 量 （ IC50） ，用所得 IC50 处 理 细 胞 24h 后 ， 利 用 免 疫 荧 光 的 方 法 测 定 ER 和 ER的 改 变 情 况 ， 并 利 用 蛋 白 印 迹 （ Western Blot） 的 方 法 验 证 免 疫 荧 光 法 的 结 果 。结 果 经 免 疫 荧 光 法 测 定 乳 腺 癌 T47D 细 胞 表 达 ER 和 ER。 在 浓 度
4、为 0、 1.010-8、1.010-7、 1.010-6、 1.010-5 mol/L 的 TAM 作用下，T47D 细胞的生长抑制率分别为(9.883.41)%、 (23.613.30)%、 (32.765.99)%、 (48.851.90)%和 (64.862.54)%。 IC50约为 1.010-6mol/L。 免 疫 荧 光 法 测 得 TAM 作 用 T47D 细 胞 后 ER 下 调 （ 对 照 组144.7325.19， TAM 组 92.1115.48） ； ER 无 明 显 改 变 （ 对 照 组 248.446.92， TAM组 247.957.66） 。 Western
5、 Blot 的 结 果 与 免 疫 荧 光 结 果 相 一 致 。结 论 乳 腺 癌 T47D 细胞株同时表达 ER 和 ER 两种受体，T AM 主要作用于 ER，使 其 表 达 下 降 ， ER 的 表 达 无 明 显 改 变 。第 二 部 分 TAM 对 乳 腺 癌 T47D 细 胞 18F-FDG 摄取的影响目 的 研 究 测 定 乳 腺 癌 T47D 细 胞 经 TAM 作 用 后 对 细 胞 摄 取 18F-FDG 的 影 响 及 与ER 表达的关系。方 法 采 用 细 胞 增 殖 和 细 胞 毒 性 检 测 试 剂 (CCK-8)法，在 96 孔 板 内 接 种 的 细 胞 数
6、量为 1104/孔 ， 分 别 测 定 加 入 不 同 浓 度 的 TAM(0 1.010-5 mol/L)200l， 培 养 24h 后 的 细I中文摘要 他 莫 昔 芬 (TAM)对 乳 腺 癌 T47D 细 胞 雌 激 素 受 体 (ER)表 达 与 18F-氟 代 脱 氧 葡 萄 糖 (18F-FDG)摄 取 的 影 响胞 生 长 抑 制 率 。 在 六 孔 板 内 接 种 的 细 胞 数 量 为 1106/孔 ， 分 别 测 定 加 入 不 同 浓 度 的TAM(0 1.010-5 mol/L)2ml、培养 24h 后 的 测 定 18F-FDG 的 细 胞 摄 取 率 ， 并 计
7、算 18F-FDG的 细 胞 摄 取 抑 制 率 。 在 凹 形 细 胞 培 养 皿 内 接 种 的 细 胞 数 量 为 1104 个 /皿 ， 培 养 24 小 时后，分别加入不含任何药物的培养基、含 TAM 浓 度 为 110-6mol/L 的 培 养 基 及 与 TAM量 相 等 体 积 的 无 水 乙 醇 的 培 养 基 继 续 培 养 24h 后 ， 利 用 免 疫 荧 光 的 方 法 测 定 ER 和 ER的 表 达 情 况 。结 果 TAM 浓 度 分 别 为 0、 1.010-8、 1.010-7、 1.010-6 和 1.010-5 mol/L 的情况下作 用 24h 后 ，
8、 细 胞 生 长 抑 制 率 分 别 为 (9.883.41)%、 (23.613.30)%、 (32.765.99)%、(48.851.90)% 和 (64.862.54)% 。 细 胞 18F-FDG 摄 取 抑 制 率 分 别 为 (4.401.94)% 、(6.733.88)%、 (13.004.93)%、 (44.115.33)%和 (61.978.76)%。 免 疫 荧 光 法 测 得 TAM作 用 T47D 细 胞 后 ER 下调（对照组 178.8315.11， TAM 组 111.2718.19） ； ER 无 明 显改 变 （ 对 照 组 230.2513.37， TAM
9、组 233.8012.30） 。结 论 TAM 作 用 24h 后 引 起 乳 腺 癌 T47D 细胞的 18F-FDG 细 胞 摄 取 率 下 降 ， 且TAM作 用 后 ER 的 表 达 下 降 与 18F-FDG 的摄取下降呈正相关性。第 三 部 分 乳 腺 癌 T47D 细 胞 18F-FDG 摄 取 实 验 方 法 探 讨目 的 以乳腺癌 T47D 细 胞 及 其 与 化 疗 药 物 5-氟 尿 嘧 啶 （ 5-FU） 作 用 后 18F-FDG 的摄 取 改 变 为 例 ， 探 讨 实 验 方 法 改 进 方 面 的 意 见 。方 法 在 不 同 条 件 下 测 定 乳 腺 癌 T
10、47D 细 胞 的 18F-FDG 细 胞 摄 取 率 ， 细 胞 数 量 为1104 5106/孔 ， 18F-FDG 放 射 性 活 度 为 1.85 29.6 kBq， 反 应 时 间 为 20 120min， 葡萄 糖 浓 度 为 0 11mol/L， 无 糖 培 养 基 培 养 的 时 间 为 0 12h。 采 用 细 胞 增 殖 和 细 胞 毒 性检 测 试 剂 (CCK-8)法分别测定加入不同剂量(0 8.010-6 mol/L)5-FU 200l,培 养 24h 后测 定 细 胞 生 长 抑 制 率 。 测 定 加 入 不 同 剂 量 (0 8.010-6 mol/L)5-FU
11、 2ml， 培 养 24h 后18F-FDG 的 细 胞 摄 取 率 。结 果 当每孔 1106 个 细 胞 、 加 入 3.7kBq18F-FDG、 葡 萄 糖 浓 度 为 0mol/L、 作 用 时间 为 100 min、 无 糖 培 养 基 培 养 时 间 为 6h 时，细胞摄取率可达到 (28.070.45) %。 加 入1.010-6、 2.010-6、 4.010-6 和 8.010-6 mol/L 5-FU 24h 后 ， 细 胞 生 长 抑 制 率 分 别 为(26.961.33)%、 (42.942.25)%、 (52.652.10)%和 (60.034.35)%。 细 胞
12、摄 取 抑 制 率 分别 为 (17.862.96)%、 (28.447.10)%、 (42.623.62)%和 (69.024.03)%。II他 莫 昔 芬 (TAM)对 乳 腺 癌 T47D 细 胞 雌 激 素 受 体 (ER)表 达 与 18F-氟 代 脱 氧 葡 萄 糖 (18F-FDG)摄 取 的 影 响 中 文 摘 要结 论 5-FU 可 以 影 响 乳 腺 癌 T47D 细 胞 对 18F-FDG 的 摄 取 下 降 。 相 同 浓 度 下 ， TAM引 起 的 下 降 更 明 显 。 无 糖 培 养 基 的 培 养 时 间 不 影 响 乳 腺 癌 T47D 细 胞 对 18F-
13、FDG 的 摄 取 。关键词 乳腺癌细胞；T AM； ER； 18F-FDG； 5-FU作 者：黄景峰指导老师：吴翼伟 教 授III英文摘要 他 莫 昔 芬 (TAM)对 乳 腺 癌 T47D 细 胞 雌 激 素 受 体 (ER)表 达 与 18F-氟 代 脱 氧 葡 萄 糖 (18F-FDG)摄 取 的 影 响Effects of Tamoxifen on the Expression of EstrogenReceptor and the Uptake of 18F-FDG in Human BreastCarcinoma Cell T47DAbstractPART ONE: Effect
14、s of TAM on the Expression of Estrogen Receptorin Human Breast Carcinoma Cell T47DObjective To investigate the change of ER alpha and ER beta at the 24th hour afteradministration of TAM in human breast carcinoma cell T47D.Methods 1104 cells were inoculated in the dish.And immunofluorescence method w
15、astaken to measure the expression of ER alpha and ER beta.The cell proliferation andcytotoxicity detection kit (CCK-8) were taken to measure the median lethal dose (IC50) atthe 24th hour after administration of TAM in different concentrations(0 1.010-5mol/L).The change of ER alpha and ER beta detected by using immunofluorescence andWestern Blot at the 24th hour after administration of TAM.Results Both ER alpha and ER beta were expressed in human breast carcinoma.Thecell growth inhibition rates were (9.883.41)% ， (23.613.30)% ， (32.765.99)% ，(48.851.90)%and (64.862.54)% respectively
