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1、班级：分析 09310 姓名：陈涛 学号：14实验十三 硫代巴比妥酸比色法测定山梨酸及山梨酸钾1原理利用自样品中提取出来的山梨酸及其盐类，在硫酸及重铬酸钾的氧化作用下产生丙二醛，丙二醛与硫代巴比妥酸作用产生红色化合物，其红色深浅与丙二醛浓度成正比，并于波长530nm 处有最大吸收，符合比尔定律，故可用比色法测定，反应如下：（略）2试剂。（1）硫代巴比妥酸溶液：准确称取 0.5g硫代巴比妥酸于 100mL 容量瓶中，加 20mL蒸馏水，然后再加入 10mL 氢氧化钠溶液（1mol/L） ，充分摇匀。使之完全溶解后再加入 11mL 盐酸（ 1mol/L） ，用水稀释至刻度。此溶液要在使用时新配制，
2、最好在配制后不超过 6h 内使用。（2）重铬酸钾-硫酸混合液：以 0.1mol/L重铬酸钾和 0.15mol/L 硫酸以 1：1 的比例混合均匀配制备用。（3）山梨酸钾标准溶液：准确称取250mg 山梨酸钾于 250mL 容量瓶中，用蒸馏水溶解并稀释至刻度，使之成为 1mg/mL 的山梨酸钾标准溶液。（4）山梨酸钾标准使用溶液：准确移取山梨酸钾标准溶液 25mL 于 250mL 容量瓶中，稀释至刻度，充分摇匀，使之成为 0.1mg/mL的山梨酸钾标准使用溶液。3仪器。(1)721 型分光光度计。(2)组织捣碎机。（3）10mL 比色管。4分析步骤。（1）样品的处理：称取 100g 样品，加蒸馏
3、水 200mL，于组织捣碎机中捣成匀浆。称取此匀浆 100g，加蒸馏水 200mL 继续捣碎1min，称取 10g 于 250mL 容量并中定容摇匀，过滤备用。（2）山梨酸钾标准曲线的绘制：分别吸取 0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL 山梨酸钾标准使用溶液于 200mL 容量瓶中，以蒸馏水定容（分别相当于0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0g/mL 的山梨酸钾） 。再分别吸取 2.0mL 于相应的 10mL 比色管中，加 2.0mL 重铬酸钾-硫酸溶液，于100水浴中加热 7min，立即加入 2.0mL 硫代巴比妥酸溶液，继续加热 10min，立即取出迅速用冷水冷却
4、，在分光光度计上以 530nm 测定吸光度，并绘制标准曲线。（3）样品的测定：吸取样品处理液 2mL于 10mL 比色管中，按标准曲线绘制的操作程序，自“加 2.0mL 重铬酸钾- 硫酸溶液”开始依次操作，在分光光计 530nm 处测定吸光度，从标准曲线中查出相应浓度。5.实验数据：C 0.0000000.0000020.0000040.0000060.0000080.00001A 0.000 0.012 0.018 0.021 0.023 0.028530nm测 定 吸 光 度 标 准 曲 线y = 2514.3x + 0.0044R2 = 0.906800.0050.010.0150.02
5、0.0250.030.0350.000000 0.000002 0.000004 0.000006 0.000008 0.000010 0.000012浓 度 (g/ml)吸光度 A线 性 (A)试样 吸光度为 1.285浓度 C= g/ml410*9.55结果计算。 21mAX34.2式中：X 1样品中山梨酸钾的含量，g/kg；X2-样品中山梨酸的含量，g/kg；A-试样液中含山梨酸钾的浓度，mg/mL；m称取匀浆相当于试样的质量，g；2用于比色时试样溶液的体积，mL；250样品处理液总体积，mL。047.3.1663.25*9.5241X6.结论样品中山梨酸钾的含量为 0.00637g/kg样品中山梨酸的含量为 0.0047g/kg
