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1、1冬虫夏草对小鼠淋巴细胞增殖和 IL2 产生的作用【摘要】 目的 探讨冬虫夏草对小鼠淋巴细胞增殖反应和 IL2 的产生的免疫学作用。方法 取小鼠 24 只，随机分为对照组和实验组，分别用生理盐水和 100%冬虫夏草水浸出液定期给小鼠灌胃，然后检测小鼠淋巴细胞增殖和 IL2 的产生。结果 实验组对以上两项免疫学指标均有显著增强作用，与对照组相比均有非常显著性差异（P 0.01） 。结论 冬虫夏草可明显增强机体免疫功能。 【关键词】 冬虫夏草 淋巴细胞增殖 白细胞介素2 小鼠 【Abstract 】 Objective To research the effect of cordyceps sin
2、ensis sacc.（ CSS) from the viewpoint of immunology.Methods 24 mice were divided into 2 groups(control group and experimental group) randomly.Filled the stomaches with NS and 100% water extract of CSS respectively and tested lymphocyte proliferation and interleukin2 production.Results Compared with c
3、ontrol group the lymphocyte proliferation and interleukin2 production increased significantly in experimental group (P0.01).Conclusion The results indicated that CSS could enhance immune function obviously . 【Key words】 cordyceps sinensis sacc.(CSS),lymphocyte 2proliferation, IL2，mouse 冬虫夏草，始载于本草纲目拾
4、遗 ，因其冬季为虫，夏季为草，故名；为麦角菌科真菌冬虫夏草cordyceps sinensis (Berk.) sacc.， CSS ，寄生蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体，主要功效为益肾补肺、止血化痰、止嗽定喘1 。我们对冬虫夏草进行了淋巴细胞增殖和 IL2 免疫学方面的初步研究。 1 材料与方法 1.1 试剂和仪器 冬虫夏草购采自滨州医学院附属医院。水煎液制备：取冬虫夏草 200 g，加 2 000 ml 水，浸泡 2 h，水煎 2 次，每次煮沸 30 min，合并水煎液，浓缩成 200 ml 备用。RPMI1640 为 GIBO 公司产品，LPL 和 ConA 为美国 Sigm
5、a 产品，MTT 为 FLUKA 公司产品，二甲基亚砜(DMSO) 为苏州化工研究所产。美国产全自动酶标仪（Multiskan)，CO2 培养箱，由美国Former 公司生产，低速冷冻离心机(Beckman,USA)，超净工作台由苏州净化设备厂生产，100 目不锈钢网，50 ml 离心管。 12 动物分组与给药 BALB/C 小鼠 24 只，体重 1822 g，雌雄不限，购于北京医科大学实验动物中心。将动物随机分为两组，每组 12 只。组为生理盐水对照组，组为冬虫夏草实验组。 组用生理盐水灌胃，0.5 ml/（次只） ，1 次/天；组用冬虫夏草液灌胃， 0.5 ml /（次只） ，1 次/天，
6、共 15 次。 13 检测指标及方法 131 淋巴细胞增殖反应2：无菌制备小鼠脾细胞悬液，3用 RPMI1640 不完全培养液洗涤 2 次，每次 1 000 r/min ，离心 10 min ，然后用完全培养液配成 5106 /ml ， 取 100 l加入 96 孔细胞培养板（每孔含 5106 /ml 个细胞） ，加入终浓度为 5 g/ml 的 ConA ，置 37，5%CO2 培养箱中培养 48 h 后,每孔加入 10 l MTT 溶液（5 mg/ml） ，再继续培养 12 h，然后加入 DMSO 100 l ，充分震荡后静止 20 min，全自动酶标仪用560 nm 波长进行比色分析。 1
7、.3.2 IL2 的诱生：取上述已制备的脾细胞悬液 5106 /ml，放入培养瓶，置 37，5%CO2 培养箱中培养 40 h，离心收集上清液，置-20 冰箱保存备用。 制备活化的脾淋巴细胞3 ，4：按上法无菌取正常 BALB/C小鼠脾脏，制成 5106/ml 细胞悬液，加入 ConA 使其终浓度为 5 g/ml ，置 37，5%CO2 培养箱中培养 48 h，收集细胞，离心洗涤 2 次，用完全 RPMI 1640 配成 5105/ml 细胞悬液，作为检测 IL2 的反应细胞。 133 IL2 活性检测 3：取-20保存的 IL2 上清液，并做 1/2 和 1/4 的稀释，在 96 孔平底培养
8、板中，每孔加入 IL2 上清液或不同稀释度的 IL2 上清液 100 l 及上述反应细胞 100 l；阳性对照不加 IL2 上清，加 100 l 1640 培养液。每组各设 12 个复孔，置 37，5%CO2 培养箱中培养 48 h，每孔加 MTT(5 mg/ml) 10 l，继续培养 4h ，吸弃 100 l 上清液，加入酸化异丙醇 100 l(0.04 mol/L HCl异丙醇) 4 ，充分震荡后静止 20 min，全自4动酶标仪用 560 nm 波长进行比色分析。 14 结果处理 实验结果采用组间均数差异 t 检验的方法进行统计学分析。 2 结果 冬虫夏草对小鼠淋巴细胞增殖反应和 IL2
9、 产生的影响见表 1。 表 1 冬虫夏草对小鼠淋巴细胞增殖反应和 IL2 产生的影响 表 1 显示实验组对脾淋巴细胞增殖反应明显，IL2 的产生明显增强，与对照组相比有非常显著性差异（P0.01） 。 3 讨论 本实验研究了冬虫夏草对小鼠淋巴细胞增殖和 IL2 产生的影响，结果表明冬虫夏草可使 ConA 激发的 T 淋巴细胞增殖反应明显增强，表明冬虫夏草对 T 淋巴细胞功能具有增强作用，同时对 B 淋巴细胞免疫功能也具有明显增强作用。已知 T 细胞是机体免疫系统赖以实现免疫调节的重要细胞，在机体特异性免疫应答中起核心作用 ，T细胞功能障碍会直接影响机体的细胞免疫应答和免疫调节。本研究还发现冬虫
10、夏草对细胞因子 IL2 的产生有促进作用。IL2 主要是由辅助 T 细胞产生的非特异性细胞因子，作用于活化的 T 细胞促进其增殖，并对 B 细胞有调节作用。 冬虫夏草可明显促进小鼠脾细胞产生 IL2，间接增强体液免疫应答。分析上述免疫指标改变的原因可能是冬虫夏草对 T 淋巴细胞的直接促进作用，或作用于巨噬细胞促进 T 淋巴细胞的产生，从而促进了 T 淋巴细胞及 IL2 的产生。以上两项免疫学指标均明显增强，组间相比均有非常显著性差异5（P 0.01） ，说明冬虫夏草可明显增强机体免疫功能，是良好的保健食品。 【参考文献】 1 高学敏.中药学（下册） M .北京：人民卫生出版社，2000：16901696. 2 高梅，贾镭，陈芬，等. 虎尿对小鼠淋巴细胞增殖和 IL2产生的影响J.中国实验临床免疫学杂志，1999，11（3）：39. 3 邱世翠，李宗山，郭毅， 等. 枸杞对辐射损伤小鼠造血功能恢复的影响J.中国中医药科技，2000,7 （6）：362. 4 邱世翠，李波清，王运平，等.康宝饮对小鼠的抑瘤作用J. 中国现代医学杂志，2001，11（2）：33.
