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1、临床医学检验考试辅导微生物检验 第 1 页病原性球菌及检验 考点葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属、奈瑟菌属生物学性状微生物学检查法临床意义（致病性、所致疾病）【内容讲解】普及共性，单记个性生物学性状形态与结构：革兰染色性，菌体形态，大小，排列状态，特殊结构。培养特性：对气体需求，营养要求，最适 ，最适温度，在培养基中的生长现象。生化反应：特殊生化。抗原：分类：致病性致病物质所致疾病微生物学检查：针对生物学性状和致病性。一、葡萄球菌属一群革兰阳性球菌，因常堆聚成葡萄串状而得名。（一）球形，葡萄串状成堆排列（在脓汁、肉浸液培养物中，可见单个，成对或短链排列），无鞭毛和芽胞，某些菌株能形成荚膜。养要求
2、不高，最适 适温度为 3537。普皿：圆形、凸起、表面光滑湿润、边缘整齐并且不透明的菌落，直径为 23产生不同的脂溶性色素，如金黄色、白色、柠檬色色素。血琼脂平板：几乎所有的葡萄球菌可产生 、 和 溶血素。液体培养基：生长迅速呈均匀混浊状。）；多数能分解葡萄糖、麦芽糖及蔗糖，产酸不产气；分解甘露醇产酸、液化明胶和产临床医学检验考试辅导微生物检验 第 2 页生血浆凝固酶（多数致病性葡萄球菌）。）蛋白抗原：为完全抗原，有种属特异性，无型特异性。存在于葡萄球菌的表面，结合在细胞壁的粘肽部分，具有抗吞噬作用，称葡萄球菌 A 蛋白（2）多糖抗原：是半抗原，具有型特异性，有三种：A 型多糖抗原；B 型多糖
3、抗原；C 型多糖抗原。）伯杰系统细菌学手册（2）热，耐干燥，耐高盐。是抵抗力最强的无芽胞细菌。（二）临床意义葡萄球菌感染的特点是感染部位组织的化脓、坏死和脓肿形成。金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌是引起临床感染最常见的葡萄球菌。（1）金黄色葡萄球菌致病物质：血浆凝固酶；葡萄球菌溶血素；杀白细胞素；肠毒素；表皮溶解毒素；毒性休克综合征毒素。（2）表皮葡萄球菌存在于皮肤的正常栖居菌，为医院感染的重要病原菌，它是导致血培养污染的常见细菌之一。（3）腐生葡萄球菌导致尿路感染的常见病原菌之一。（三）微生物学检查临床医学检验考试辅导微生物检验 第 3 页标本采集（不同疾病采集不同标本）：脓汁、渗
4、出液、伤口分泌物、血液、尿液、粪便、痰液以及脊髓液等。鉴定试验：报告：检出“萄球菌”耐药性检测检测耐甲氧西林的金葡菌（耐甲氧西林的表葡菌（耐万古霉素的金黄色葡萄球菌（耐万古霉素的表皮葡萄球菌（四）治疗原则由于耐药菌株日益增多，治疗葡萄球菌感染时，应根据体外药敏试验选择抗生素。如果是危、急、重临床医学检验考试辅导微生物检验 第 4 页症感染，应首先根据经验选药，如万古霉素等，待体外敏感试验结果回报后，再调整用药，针对治疗。二、链球菌属（一）圆形，链状排列（在液体培养基中易成长链。在脓汁标本中为短链，成双或单个散在）。无鞭毛、无芽胞，某些菌株在血清肉汤中可有荚膜。数微需氧及专性厌氧。营养要求较高。
5、最适温度为 3537，最适 5%体培养基：溶血性菌株呈絮状或颗粒状沉淀生长。上层液体澄清，可有菌膜。不溶血菌株则均匀浑浊生长。血琼脂平板：灰白色、圆形、凸起、细小菌落，不同溶血环。），能分解葡萄糖产酸不产气，对其他糖类的分解因不同菌株而异。）根据溶血能力分类：甲型（）溶血性链球菌：本菌为条件致病菌。乙型（）溶血性链球菌：该型细菌致病性最强，常引起人和动物多种疾病。丙型（）链球菌：一般无致病性。（2）根据链球菌细胞壁抗原（即 C 抗原）分类，即常用 清分型法：将链球菌分为 A、B、C、DT 等 18 个群（其中 I 和 J 缺），对人类有致病性的 90%属 A 群，B、C、D、G 群链球菌感染较
6、少见。各种常用消毒剂敏感，60加热 30 分钟即可杀灭。（二）临床意义A 群溶血性链球菌致病物质 所致疾病链球菌溶血素透明质酸酶链激酶，链道酶急性化脓性感染（丹毒、痈、蜂窝组织炎、咽炎、鼻窦炎、中耳炎、脑膜炎、产褥热）临床医学检验考试辅导微生物检验 第 5 页致热外毒素 猩红热M 蛋白 变态反应性疾病（风湿热，肾小球肾炎）草绿色链球菌：属条件致病菌，常与亚急性心内膜炎相关。B 群链球菌：是新生儿肺炎、脑膜炎和败血症的病原体。D 群链球菌：引起呼吸道和泌尿道感染。治疗原则：A 群链球菌感染，青霉素 G 被列为首选。B 群链球菌常常采用青霉素 G 和一种氨基糖苷类合用。（三）微生物学检查标本采集（
7、不同疾病采集不同标本）：可采集脓汁、咽拭、痰、血、尿等标本。鉴定试验：三、肺炎链球菌（一）球菌，呈矛尖状、钝面成双排列，有时呈短链状，荚膜（在人或动物体内易形成），无鞭毛，无芽胞。适的温度为 3537；最适的 养要求较高。血琼脂平板：形成灰色扁平、中心凹陷（因菌落发酵所致）直径为 菌落，周围有草绿色溶血圈。液体培养基：均匀混浊。但培养时间过长，可因产生自溶，培养液可变澄清，管底沉淀。临床医学检验考试辅导微生物检验 第 6 汁溶解试验阳性、感试验阳性。（肺炎链球菌与草绿色链球菌的鉴别）。（二）临床意义致病物质：荚膜。所致疾病：大叶性肺炎、支气管炎。可继发胸膜炎、脓胸，也可引起中耳炎、鼻窦炎、脑膜
8、炎及败血症。（三）直接涂片检查：经革兰染色，镜检见革兰阳性矛尖状双球菌。（2）分离培养：血液、脑脊液需增菌培养，呈均匀混浊，而且有绿色荧光。脓汁或脑脊液沉渣接种血琼脂，置5%10%环境中培养。（3）鉴定试验1）胆汁溶解试验（+）2）菊糖发酵试验（+）3） 0感试验（+）4）荚膜肿胀试验（+）5）动物试验：小白鼠对肺炎链球菌极为敏感。6）快速乳胶凝集试验（+）四、肠球菌属肠球菌属是肠道的正常栖居菌。（一）成双或短链状排列的卵圆形球菌，无芽胞，无荚膜，部分肠球菌有稀疏鞭毛。氧及兼性厌氧。在胆汁七叶苷和含 养基中可以生长（此点可与链球菌鉴别）。血平板上主要表现为 ），多数肠球菌能水解吡咯烷酮与同科链
9、球菌的显著区别：能在高盐（高碱（40%胆汁培养基上和 1045环境下生长；对许多抗菌药物表现为固有耐药（如复方增效磺胺、头孢菌素、克林霉素和低浓度的氨基糖苷类）。（二）临床意义肠球菌是 G+菌中仅次于葡萄球菌属的重要医院感染病原菌。最常见的为尿路感染，其次为腹部和盆腔等部位的创伤和外科术后感染。临床上分离率最高的是粪肠球菌，其次是屎肠球菌。肠球菌致病基因：主要有细胞溶解素激活基因、明胶酶基因、表面蛋白基因、胶原蛋白黏附素基因、聚集物质基因和粪肠球菌心内膜炎基因等。临床医学检验考试辅导微生物检验 第 7 页（三）微生物学检验采集标本：如尿液、脓汁、胆汁、分泌物或血液等。方法：以直接涂片进行初步检
10、查。分离培养后，挑取可疑菌落，进行涂片、染色、镜检、触酶试验、胆汁七叶苷试验和 受试验，可鉴定到属。耐药性检测：一般要测试对 青霉素、氨苄西林）、万古霉素和氨基糖苷类（如庆大霉素）的敏感性。同时也应对 四）结果评价药敏结果中必须注明 青霉素 G、氨苄西林）的敏感性。庆大霉素的耐药水平（是否为高水平耐药）万古霉素的敏感性以及 五）治疗原则一般采用 氟沙星与氨苄西林有协同作用。必要时还要改用万古霉素或替考拉宁。五、奈瑟菌属G -，双球菌，无鞭毛，无芽胞，有菌毛。专性需氧，氧化酶阳性。本属主要有 9 个种。其中对人致病的是脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌。脑膜炎奈瑟菌简称脑膜炎球菌，是引起流行性脑脊髓膜炎（
11、简称流脑）的病原体。）形态与染色：体呈肾形，坦面相对，成对排列，患者的脑脊液中位于中性粒细胞内。（2）培养特性：营养要求高，属苛养菌。最适温度为 3537，最适 3）生化反应：绝大多数菌株能分解葡萄糖和麦芽糖，产酸不产气（因淋病奈瑟菌不分解麦芽糖，借此与之鉴别）；不分解乳糖、甘露醇、半乳糖和果糖，硝酸盐还原试验阴性不分解尿素、不产生 靛基质；触酶试验阳性，氧化酶试验阳性。（4）抗原及分型：主要有四种抗原：荚膜多糖群特异性抗原、外膜蛋白型特异性抗原、脂多糖抗原及核蛋白抗原。根据群特异性荚膜多糖抗原不同，将本菌分为 A、B、C、D、X、Y、Z、1916、29E 和 。目前，对人致病的主要是 A 群
12、，偶见 B 群、C 群及 1916 群引起散发病例。毛，荚膜，内毒素。所致疾病：脑膜炎奈瑟菌是流行性脑脊髓膜炎的病原菌。主要表现发热，皮肤瘀斑，脑膜刺激症状。存在于携带者或病人的鼻咽部，借飞沫经空气传播，冬末春初为流行高峰。）标本采集：血液；瘀斑渗出液；脑脊液；鼻咽分泌物。注：因本菌能产生自溶酶，易自溶，故采集的标本不宜置冰箱，应立即送检。（2）检验方法及鉴定：1）直接涂片检查：取脑脊液离心后沉淀物涂片或刺破瘀斑血印片，干燥固定后革兰染色。若发现中性粒细胞内（或胞外）革兰阴性双球菌，呈肾形成对排列，可初报。临床医学检验考试辅导微生物检验 第 8 页2）分离培养：将标本增菌培养液直接接种于血琼脂
13、平板、巧克力琼脂或 脂，置 5%10%环境中，35培养 1824h 后可见圆形、灰褐色、湿润、光滑、边缘整齐、直径 12小菌落。3）鉴定：细菌染色形态： 体呈肾形，坦面相对，成对排列。氧化酶试验（+）触酶试验（+）分解葡萄糖、麦芽糖产酸不产气霉素 G 为首选，三代头孢对脑膜炎奈瑟菌也具有很强的抗菌活性。青霉素过敏的病人可考虑选用三代头孢或氯霉素。淋病奈瑟菌简称淋球菌，是淋病的病原体，人类是其唯一的天然宿主和传染源。）形态与染色：形或肾形，成对排列，脓汁标本中，通常位于中性粒细胞内，而在慢性淋病时常位于细胞外。从患者体内新分离的菌株可有荚膜和菌毛，无芽胞和鞭毛。（2）培养特性：营养要求较高，国内常用血液琼脂、巧克力琼脂、脂等培养基。最适 适温度为3537。初次分离时，须置 5%10%条件下才能生长发育。菌落：表面光滑、凸起、半透明、高亮度、直径 .0
