《初级检验技士考试辅导《临床免疫学和免疫检验》抗原抗体反应》由会员分享，可在线阅读，更多相关《初级检验技士考试辅导《临床免疫学和免疫检验》抗原抗体反应（4页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、临床医学检验技士考试辅导临床免疫学和免疫检验 第 1 页第二章抗原抗体反应第一节 抗原抗体反应的原理第二节 抗原抗体反应的特点第三节 影响抗原抗体反应的因素第四节 免疫学检测技术的类型 第一节 抗原抗体反应的原理抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定簇（表位）和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性。抗原决定簇=表位。这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的抗原表位和抗体超变区必须密切接触。完全抗原=反应原性+免疫原性半抗原=反应原性一、抗原抗体结合力抗原抗体是一种非共价的结合，不形成共价键，需要四种分子间引力参与 因抗原、抗体带有相反电荷的氨基与羧基基团间相互吸引的能力，这种吸引力的大小和两
2、个电荷间的距离平方成反比。两个电荷距离越近，静电引力越大。 是原子与原子、分子与分子相互接近时分子极化作用发生的一种吸引力，是抗原、抗体两个大分子外层轨道上电子相互作用时，两者电子云中的偶极摆动而产生的引力。这种引力的能量小于静电引力。结合力较强于范德华引力。强） 水溶液中两个疏水基团相互接触，由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。当抗原表位和抗体超变区靠近时，相互间正负极性消失，周围亲水层也立即消失，从而排斥两者间的水分子，使抗原抗体进一步吸引和结合。疏水作用力是这些结合力中最强的，因而对维系抗原抗体结合作用最大。二、抗原抗体亲合力亲和力指抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间相适应而存
3、在的引力，它是抗原抗体间固有的结合力 亲和力用平衡常数 K 来表示，K 值越大，亲和性越强，与抗原结合也越牢固 抗体的亲合力指抗体结合部位与抗原表位间结合的强度，与抗体结合价相关，即所谓多价优势。抗体亲合力强，与抗原结合牢固，不易解离。三、亲水胶体转化为疏水胶体抗体是球蛋白，大多数抗原亦为蛋白质，它们溶解在水中皆为胶体溶液，不会发生自然沉淀。亲水胶体形成机制是因蛋白质含有大量的氨基和羧基残基，这些残基在溶液中带有电荷，由于静电作用，在蛋白质分子周围出现了带相反电荷的电子云。如果溶液 高，蛋白质分子带负电荷，周围出现极化的水分子，形成水化层 。临床医学检验技士考试辅导临床免疫学和免疫检验 第 2
4、 页当抗原抗体的结合，使表面电荷减少或消失，电子云也消失，水化层变薄，蛋白质由亲水胶体转化为疏水胶体。 加入电解质,如 疏水胶体物相互靠拢，形成可见的抗原抗体复合物。第二节 抗原抗体反应的特点抗原抗体反应的四大特点：特异性抗原抗体结合的特异性是指抗原表位与抗体超变区结合的特异性。是两者在化学结构和空间构型上呈互补关系所决定的。抗原与抗体的结合高度的特异性，是应用于临床诊断的基础，但多数天然抗原具有不止一种抗原决定簇，与另一物质可能有共同抗原，对检验结果产生交叉反应，但这种交叉反应仍是抗原抗体特异性结合，对临床诊断可能产生干扰，不过有时也将这种交叉反应用于临床诊断，如外斐试验。可逆性可逆性指抗原
5、抗体结合后形成的复合物在一定条件下可发生解离，恢复抗原抗体的游离状态。抗原抗体结合是分子表面的结合，犹如酶与底物的结合，是一种非共价键结合，结合虽稳定但可逆；抗原抗体的结合是一种动态平衡过程，抗原抗体复合物的解离取决于抗体对相应抗原的亲和力及反应条件（如离子强度、）。免疫学技术中的亲和层析法就是利用这个原理来纯化抗原或抗体。比例性在抗原抗体特异性反应时，生成结合物的量与反应物的浓度有关。只有当抗原抗体分子比例合适时抗原抗体充分结合，沉淀物形成快而多，称为抗原抗体反应的等价带；若抗原或抗体极度过剩则无沉淀形成，称为带现象，抗体过量时，称为前带，抗原过量时，称为后带。 阶段性 抗原抗体反应可分为两
6、个阶段。第一阶段为抗原与抗体发生特异性结合的阶段，此阶段反应快，仅需几秒至几分钟，但不出现可见反应。第二阶段为可见反应阶段，此阶段反应慢，往往需要数分钟至数小时。在血清学反应中，以上两阶段往往不能严格分开，往往受反应条件（如温度、解质、抗原抗体比例等）的影响。一、特异性抗原抗体结合特异性是指抗原表位与抗体超变区结合的特异性 另一物质可能有共同抗原，对检验结果产生交叉反应，但这种交叉反应仍是抗原抗体特异性结合，对临床诊断可能产生干扰。二、可逆性可逆性指抗原抗体结合后形成的复合物在一定条件下可发生解离，恢复抗原抗体的游离状态。合虽稳定但可逆。离子强度、）。三、比例性在抗原抗体特异性反应时，生成结合
7、物的量与反应物的浓度有关。淀物形成快而多，称为抗原抗体反应的等价。临床医学检验技士考试辅导临床免疫学和免疫检验 第 3 为带现象。为前带。为后带。 四、阶段反应快，仅需几秒至几分钟，但不出现可见反应。 阶段反应慢，往往需要数分钟至数小时。 上两阶段往往不能严格分开，往往受反应条件（如温度、解质、抗原抗体比例等）的影响。第三节 影响抗原抗体反应的因素抗原抗体反应的两大影响因素：反应物自身因素 环境因素 一、同来源的抗体，反应性各有差异，抗体的浓度、特异性和亲和力都影响抗原抗体反应，为提高试验的可靠性，应选择高特异性、高亲和力的抗体作为诊断试剂。等价带的宽窄也影响抗原抗体复合物的形成，单克隆抗体不
8、适用于沉淀反应。子量、抗原决定簇的种类及数目均可影响反应结果。颗粒性抗原出现凝集反应可溶性抗原出现沉淀反应 单价抗原与相应抗体结合不出现沉淀现象 二、原与抗体发生特异性结合后，虽由亲水胶体变为疏水胶体，若溶液中无电解质参加，仍不出现可见反应。为了促成沉淀物或凝集物的形成，常用 各种缓冲液作为抗原及抗体的稀释液 境中进行,蛋白质具有两性电离性质，因此每种蛋白质都有固定的等电点 抗原抗体反应一般在 之间进行有补体参与的反应 度升高可加速分子运动，抗原与抗体碰撞机会增多，使反应加速。一般为 1540。临床医学检验技士考试辅导临床免疫学和免疫检验 第 4 页常用的抗原抗体反应温度为 37。 温度如高于
9、 56，可导致已结合的抗原抗体再解离。适当振荡也可促进抗原抗体分子的接触，加速反应。 第四节 免疫学检测技术的类型免疫学检测技术的基础是抗原抗体反应早期建立的免疫学检测技术通常直接用抗原抗体反应产生的现象判断实验结果 颗粒性抗原所形成的凝集现象 可溶性抗原所形成的沉淀现象补体系统参与的溶血现象 现在的标记免疫技术是用高度敏感的示踪物质（如荧光物质、放射性核素、酶或化学发光物质等）标记抗原或抗体，进行抗原抗体反应后，通过检测标志物对抗原或抗体进行定性、定位或定量分析。标记免疫技术具有灵敏度高、快速、可定性、定量、定位等优点，拓宽了免疫学检测技术的应用范围，是目前应用最广泛的免疫学检测技术。 按实际用途分为两种：定位测定组织或细胞中固定成分的免疫组织化学技术。检测液体标本中抗原或抗体含量的免疫测定。按测定反应体系的物理状态分为两种：均相免疫测定非均相免疫测定 检测现象不同可分为五种：放射免疫技术 荧光免疫技术 酶免疫技术 化学发光免疫技术 金免疫技术
