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1、1肝细胞癌直方图血流定量分析参数与肿瘤血管生成的相关性研究【摘要】 目的：研究肝细胞癌三维彩色直方图血流定量分析参数与肿瘤微血管密度(microvessel density, MVD)、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的相关性。方法：应用 GE voluson 730 三维彩色超声仪对 29 例肝细胞癌进行检查，采用三维彩色直方图技术定量测量血管指数（Vascularization index,VI） ，术后测定标本的免疫组化参数 MVD、VEGF 的表达。结果：肝细胞癌 VI 与免疫组化参数 MVD、 VEGF 成线性正相关。
2、结论：三维彩色直方图血流定量分析参数对于评价肿瘤血管生成状况有意义。 【关键词】 肝细胞癌 直方图 肿瘤血管The Correlation Between the Parameters of Threedimensional Color Histogramand Vasularation of Tumor in Hepatocellular Carcinoma Absterct :Objective To investigate the correlation between the parameters of threedimensional color histogram and micr
3、ovessel density(MVD) 、vascular endothelial growth factor(VEGF）in hepatocellular 2carcinoma.Methtods 29 patients with HCC was examind by GE voluson 730 threedimensional color ultrasound system, VI was measured by using threedimensional color histogram technique，MVD and VEGF was measured postoperation
4、.Results There was significant positive linear correlation between VI and MVD、VEGF.Conclusion The parameters of threedimensional color histogram is significative to evaluate the angiogenesis in hepatocellular carcinoma.Key words:Hepatocellular carcinoma; Threedimensional; Vasularation of tumor肿瘤血管生成
5、在肿瘤发生、发展过程中起重要作用，本研究采用三维彩色直方图技术定量测量肿瘤血管指数，探讨应用影像学方法评价肿瘤血管生成的价值。1 资料与方法1.1 研究对象选取我院住院拟手术的肝细胞癌患者 29 例，其中男 26 例，3女 3 例，年龄 36 岁78 岁，所有病例均经手术及病理证实。1.2 仪器与方法采用 GE Voluson730 三维超声成像系统，选用 3 MHz5 MHz 腹部容积探头，首先对病灶进行二维彩色血管能量成像，启动3D 程序，调整取样框，进行三维彩色血管能量成像，选择虚拟组织计算机辅助分析程序，以 6步进描记肿物轮廓，选择三维彩色直方图程序，系统自动计算血管指数。术后标本行
6、CD34、VEGF 免疫组织化学染色，采用常规 SP 法。MVD 测定采用 Weidner 报告方法：被抗 CD34 抗体染成棕黄色的内皮细胞或内皮细胞簇,只要与其他结缔组织成分有明显区别,无论其有无管腔，均作为一个微血管计数，在 40 倍光镜下扫查整个切片，寻找血管高密度区，再在 400 倍视野下记数三个视野被染成棕黄色的血管数，取其平均值作为微血管密度。VEGF 染色阳性判断标准:凡细胞质、细胞膜出现棕黄色颗粒者为 VEGF 染色阳性。连续观察和计算 3 个高倍视野下的阳性细胞数 ,取其平均值作为 VEGF 表达值。应用 SPSS11.0 进行统计学分析，VI 与 MVD、VEGF 进行一
7、元线形回归分析。42 结果三维彩色血管能量成像能够直观显示肿瘤血管分支及空间分布状况，三维彩色直方图测定肿瘤血管指数 VI 为 2.018.10，平均值为 4.836.70。经 CD34 抗体免疫组织化学染色标记微血管后,MVD 为(25.71116.28)/400 倍视野,平均为 (62.75 18.71) / 400 倍视野。VEGF 表达为(18.7261.86)/高倍镜视野,平均为(38.21 11.32) / 高倍镜视野。与 MVD、VEGF 呈线性正相关，相关系数分别为：0.61、0.56（P0.05 ）3 讨论肝细胞癌是富血供的肿瘤,实体肿瘤的生长和转移有赖于新生血管的形成, 运
8、用特异性抗体标记肿瘤组织血管内皮细胞计数 MVD ，被认为是能反映肿瘤血管生成的一个重要的指标，其中 CD34 被认为是较特异和敏感的肿瘤生长中血管内皮表面标志，其表达与肿瘤血管内皮细胞的增殖、移行有关1 。血管内皮生长因子 VEGF是目前研究最多，作用最强的血管生成诱导因子，直接刺激内皮细胞分裂增殖,最直接参与诱导肿瘤血管生成2 ，与肿瘤血管生成及肿瘤的生长、侵袭、远处转移均有密切的关系3 。5MVD 与 VEGF 是在取得术后离体标本或活检组织的基础上进行,无法对肿瘤血管的总体情况进行评价,因此,寻找在体评价肿瘤血管的生成情况,对术前评估抗肿瘤血管生成状况具有重要的临床意义。三维彩色血管能
9、量成像为肿瘤血管生成的在体评价提供了可能。三维彩色血管能量成像可直观、完整显示肿瘤血管形态和空间分布，结合三维彩色直方图技术能够定量分析组织内的血管4 。本研究结果显示三维直方图测定肿瘤血管的 VI 和免疫组化测定的 MVD、 VEGF 间呈线性正相关,VI 高的肿瘤组织中 MVD 及VEGF 表达高,说明 VI 能够检测肿瘤病灶内的血管化程度 ,准确地反映 MVD、 VEGF 的表达, 故可作为反映肿瘤血管生成动态变化的一个指标,并将有助估测以 VEGF 为靶点的抗血管生成治疗效果。【参考文献】1Kimura H, N akajina T, Kagawa K, et al. Angiogen
10、esis in hepatocellular carcinoma as evaluated by CD34 immunohistochemistryJ. Liver, 1998, 18: 1419.2曹斌, 陈孝平 ,朱鹏,等. 肝细胞肝癌中 COX2 、VEGF 6表达与肿瘤血管生成及其临床病理意义J. 肝胆外科杂志,2005 ,14 (2) :150.3Gerber HP , Ferrara N. The role of VEGF in normal and neoplasmtic hematopoiesisJ.J Mol Med，2003，81(1) :2031.4Edwin F, Walter E, Dennis E. Quantified power Doppler US of tumor blood flow correlates with microscopic quantification of tumor blood vesselsJ .Radiology,2001，219(1):166170.
