《幽门螺旋杆菌对常见治疗药物的敏感性试验》由会员分享，可在线阅读，更多相关《幽门螺旋杆菌对常见治疗药物的敏感性试验（8页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1幽门螺旋杆菌对常见治疗药物的敏感性试验【摘要 】 目的: 了解幽门螺旋杆菌（ H.pylori）对不同种抗菌药物的耐药情况。方法: 采用 Kirby-Bauer 法( 以下简称 K-B 法)对 92例 H.pylori 菌进行抗菌药物敏感实验。结果: H.pylori 对甲硝唑敏感率达 91.3%，对克拉霉素达 92.3%，对阿莫西林达 99.0%，对呋喃唑酮达 99.0%，对阿奇霉素达 95.6%，对左氧氟沙星达 100%。结论: 甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林仍是治疗 H.pylori 的首选药物，当以上药物耐药时，可以选用左氧氟沙星、呋喃唑酮、阿奇霉素来代替。 【关键词】 幽门螺旋杆菌 耐
2、药 敏感性 甲硝唑 克拉霉素 抗菌药物幽门螺旋杆菌（Helicobacter pylori， H.pylori）是人类作为唯一宿主的最常见慢性感染性疾病的病原体之一。目前研究发现，H.pylori 的感染与胃溃疡、胃炎和某些十二指肠疾病有着密切的关系，而且与非溃疡性消化不良、MALT 淋巴瘤和胃癌有重要关系1 。根除 H.pylori 的感染，能有效地加速溃疡愈合、降低胃腺癌发生率、延缓 MALT 淋巴瘤的进程等等2-4。但随着近年来抗菌药物的滥用，使得 H.pylori 成功根除率日趋下降，究其原因主要是耐药菌株的不2断的出现。为了解 H.pylori 对抗菌药物的耐药情况，我们采用 K-B
3、 法对 92 株临床分离的 H.pylori 菌进行不同药物敏感试验，现将结果报告如下。1 材料和方法1.1 材料1.1.1 菌株来源：试验所用 92 株 H.pylori 菌是在 2006 年 10月 20 日至 2007 年 5 月 20 日期间，从温州市鹿城人民医院和温州医学院第二附属医院的胃镜室通过胃镜取得的胃黏膜组织标本中分离培养所得。1.1.2 厌氧罐：艾奇牌 AQ-I 性厌氧培养罐购于重庆市艾奇医疗器械公司。1.1.3 培养基：含 10%羊血的哥伦比亚血琼脂平板。1.1.4 药敏纸片：甲硝唑（5g/片） 、克拉霉素（15g/ 片） 、阿莫西林（10g/片） 、呋喃唑酮（15g/片
4、） 、阿奇霉素（15g/片） 、左氧氟沙星（5g/片）购自 OXOID 公司。31.2 方法1.2.1 标本的采集、培养及鉴定：标本是由临床医师采集，之后迅速将标本放入预先准备好的 LB 转送液中，并转运至实验室；从装有组织块的标本转送液中，取 0.5 ml 的 LB 肉汤和组织块，放入无菌的匀浆器中进行研磨，直到将组织块研磨碎，然后接种于含有 10%羊血的哥伦比亚血琼脂平板上，于厌氧罐（用蜡烛点过 3 次，产生CO2 环境）中 37 条件下培养，5 7 d 后观察培养结果。先进行革兰染色和鞭毛染色镜检，然后再利用脲酶试验、氧化酶试验、过氧化物酶试验进行鉴定。1.2.2 抗菌药物敏感试验：挑取
5、传代培养三代的纯菌落于无菌的NS 中，配制成 3108 cfu/ml 的菌悬液，涂布于含 10%的羊血的M-H 琼脂平板上，10 min 后，将含药纸片贴于平板，使得各纸片的间距大于 25 mm，距平板外缘的间距不少于 15 mm, 将平板放于厌氧罐（用蜡烛点过 3 次，使得产生 CO2 环境）中培养，于 37 培养 48 h 后，测量抑菌圈直径并记录。1.3 结果判断 根据中国药品生物制品检验所制定的抗菌药物细菌耐药性监测中心印发的抗菌药物药敏试验判定标准及文献5确定。42 结果 92 例 H.pylori 对不同抗菌药物的敏感性结果：甲硝唑敏感率达91.3%，克拉霉素为 92.3%，阿莫西
6、林为 99.0%，呋喃唑酮为 99.0%，阿奇霉素为 95.6%，左氧氟沙星为 100%。3 讨论H.pylori 是一种感染率极高的胃肠疾病病原菌， 近年来甚至发现 H.pylori 感染与胃癌和胃黏膜相关性淋巴样组织淋巴瘤等消化道癌症密切相关。目前临床抑菌药加抗生素联合应用仍是治疗H.pylori 感染最为有效的方案 6。伴随着抗菌药物的广泛运用，H.pylori 的耐药率也在不断上升。目前用于治疗 H.pylori 的药物中甲硝唑的耐药率是最高的，全球为10%90%，我们的数据为 8.7%。文献显示，不同的国家和地区，甲硝唑的耐药率是不一样的，一般认为发展中国家比发达国家要明显高得多，且
7、与既往妇科感染用药史相关。Kim 等7 对韩国首尔，1987-2003 年 16 年间的病例研究发现，甲硝唑耐药率从 52.9%上升至 66.2%，在妇女中更多见。Moore 等8通过在甲硝唑耐药基因的第 25 位点插入 Igt 基因片段，使 rdxA 基因位于第 8 个（最后一个） ，导致其缺少终止基因，成功地阻止了耐药的发生。目前文献显示，rdxA 基因的突变是引起 H.pylori 对甲硝唑耐药的主要原因，5fdxA 的突变并不一定能导致甲硝唑耐药，但是当与 rdxA 基因一起突变时，可以提高甲硝唑耐药性9。我们的试验结果显示，克拉霉素的耐药率为 7.7%。这与甲硝唑类似，不同的国家和不
8、同地区的耐药率是不一样的，埃及的东北部耐药率为 1.8%，但在西北部为 8.8%，在北美、欧洲、亚洲的耐药率却可上升至 12%、15%、13%。临床上已经开展诸如聚合酶联反应-寡合甘酸连接检查法、DNA 酶免疫测定、聚合酶联反向杂交等方法快速检测其突变，但是耐药的机制还不是太明确，有可能是因为 23S rRNA 的基因突变，且突变的大多数是在 2144 位，少数在2143 位10。阿莫西林是唯一用于治疗幽门螺旋杆菌感染的 内酰胺药物。内酰胺药物通过抑制肽聚糖代谢的终末阶段，干扰细胞壁的形成，从而杀灭细菌。H.pylori 对阿莫西林的 MIC 值很低，0.03 mg/L11。造成耐药的原因主要
9、是细菌合成 -内酰胺酶、细胞膜对药物通透性改变、青霉素结合蛋白量或结构的改变12。但是H.pylori 耐药率极低，我们的试验结果仅为 1.0%，Bulgarian13报告的耐药率为 6.6%。呋喃唑酮对 H.pylori 的作用较强，不易产生耐药。目前报告的敏感率一般是 100%14，但在镇江 H.pylori 的敏感率为 91.3%，6呈低水平耐药，并提示 porD 和 oorD 基因的突变可能与幽门螺杆菌低水平耐药相关15。在我们的试验结果中，出现了 1 株耐药株，耐药率为 1.0%。对于阿奇霉素、左氧氟沙星，现在国内外鲜有报道耐药的现象，但是我们的试验结果显示，阿奇霉素出现 4 株耐药
10、株，耐药率为4.4%，左氧氟沙星的耐药率为 0。随着抗生素长期广泛应用，必然会逐渐产生耐药的 H.pylori 菌株，因此重视幽门螺旋杆菌培养，进行耐药性监测，对临床合理选用抗生素、减少耐药菌株的产生有着十分重要的意义。目前，H.pylori 尚无法得到彻底的解决，但是如果能够掌握原则，就能最大限度的避免 H.pylori 的耐药株产生。首先需要严格掌握根除H.pylori 的适应证，不是所有的 H.pylori 感染的患者都必须进行根除治疗，根据“幽门螺旋杆菌的共识意见（2003.安徽桐庐） ”， H.pylori 的根除指征分为必须、支持、不明确三类，其中消化性溃疡、早期胃癌术后、胃 MA
11、LT 淋巴瘤、有明显异常的慢性胃炎必须根除 H.pylori，而部分 FD、GERD 是新增的支持根除指征；其次，根除失败的患者，尽量在复诊前做药敏试验以避免使用 H.pylori 不敏感的抗生素；最后是规范、联合用药：对于初次治疗的患者，仍可以选用甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林等药物治疗，当以上药物疗效不佳时，可以选用左氧氟沙星、呋喃唑酮、阿奇霉素来代替，但7需要保持药敏试验的检测。【参考文献】1 Masaoka T,Suzukl H,Kurubayashi K,et al.Could frameshiftmutations in the frxA and rdxA genes of Helic
12、obacter pylori bea marker or metronidazole resistance?J .Aliment PharmacolTher,2006,2(1):81-87.2 Sepulveda AR,Coelho LG.Helicobacter pylori and gastricmalignanciesJ.Helicobacter,2002,7(1):37-42.3 Yahav J,Shmuely H,Niv Y.In vitro activity of levofloxacinagainst Helicobacter pylori isolates from patie
13、nts after treatment failure J. Diagn Microbiol Infect Dis,2006,55(1):81-83.4 Branca G,Spanu T,Cammarota G,et al.High levels of dual resistance to clarithromycin and metronidazole and in vitro activity of levofloxacin against Helicobacter pylori isolates frompatients after failure of therapyJ. J Anti
14、microb Chemother ,2004,24(5):433-438.85 姜葵 ,张建中,潘国中.幽门螺旋杆菌耐药性检测J.中国人兽共患病杂志,2000,16(6):76-78.6 虎月燕,周曾芬,南琼,等. 云南省三个民族人群螺旋杆菌甲硝唑耐药调查J.中华流行病学杂志 ,2004,25(11):986-988.7 Kim JM,Kim Js,Jun HC,et al. Distribution of Antibiotic MICsfor Helicobacter pylori Strains over a 16-Year Period in Patients from Seoul, South Korea J. Antimicrob AgentsChemother ,2004,48(12):4843-4847. 8 Moore JM,salama NR.Mutational Analysis of MetronidazoleResistance in Helicobacter pyloriJ. Antimicrob AgentsChemother,2005,49(3):1236-1237.
