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1、1ELISA 法与金标层析法检测 HIV 抗体的适用性探讨【摘要 】 目的 将金标层析法与 ELISA 法检测 HIV-Ab 的结果进行分析比对，以探讨两种方法检测 HIV 抗体在日常工作中的适用性。方法 对 1208 例血液样本用金标层析法与 ELISA 法检测其 HIV 抗体。结果 两种方法检测 HIV 抗体的结果差异无显著性，ELISA 法的特异性高于金标层析法。结论 两种方法均可适用于医学检测，金标层析法适合于急诊、流动采血点、基层单位的推广使用，而 ELISA法适合于大中型医院 HIV 抗体筛查和艾滋病流行病学监测等。 【关键词】 HIV 抗体；金标层析法；ELISA 法；适用性目前
2、，检测 HIV 抗体常用的初筛方法有金标层析法和 ELISA 法。由于 ELISA 法实验时间较长，对设备、工作环境、实验人员素质要求相对较高，因此中、小型以及偏远地区的实验室难以全面开展，而金标层析法具有操作简单、快速等优点已被很多医疗单位用来进行 HIV 抗体初筛。但笔者在工作中发现，由于 HIV 抗体初筛结果与确认结果不符而引发的医疗纠纷时有发生，因此根据不同的医疗环境和单位选择合适的检测方法十分重要。本文对用两种方法检测HIV 抗体初筛阳性的结果与确认结果进行分析比较，旨在探讨金标2层析法与 ELISA 法检测 HIV 抗体在实际工作中的适用性，为合理选择实验方法提供理论基础。1 资料
3、与方法1.1 一般资料 所有血液样本均来自医院 2005 年门诊和住院病人，共 1208 例，其中男 648 例，女 560 例，年龄 0.590 岁，平均39 岁。用 ELISA 法和金标层析法同时检测其 HIV 抗体，所有样本均在采样后 4h 内检测完毕。1.2 方法1.2.1 金标层析法 采用双抗原夹心法原理，10 30min 内观察结果。1.2.2 ELISA 法 利用双抗原夹心法，操作步骤严格按试剂盒说明书进行。1.3 试剂 两种方法均使用厦门新创公司生产的试剂，该试剂经国家药检所批，批检合格，且都在有效期内（ELISA 法试剂批号分别为：2005036601、2005056602
4、、2004126608，金标层析法试剂批号分别为：2005040304、2005052501、2005011905 ） 。31.4 仪器 洗板机 Anth.s Fludo；酶标仪 Anth.s 2010。1.5 统计学分析 检测结果采用 2 检验进行数据处理，以P0.05）3 讨论自 1985 年我国报道第一例艾滋病以来1 ，艾滋病在我国的流行趋势日趋严峻，近几年更是进入一个快速增长期2 。到目前为止，艾滋病尚无有效的治疗措施，因此，对可疑人群的筛查显得尤为重要。近年，艾滋病的检测手段被不断更新和利用。自 20 世纪 70 年代，Fanlk 等建立了 ELISA 技术后3 ，该技术便广泛用于临
5、床免疫检测。用于检测艾滋病的 ELISA 法第三代试剂，采取双抗原夹心4法原理，利用酶催化底物反应的放大作用3 ，用来提高特异性抗原抗体反应的敏感性。其特点为特异性和灵敏度高、准确性好。而金标层析法是继 ELISA 法之后发展起来的一种膜固相免疫测定，其以胶体金作为标记物，利用层析作用来检测抗原或抗体4 。用于检测 HIV 抗体金标层析法现在已广泛使用于临床和各医疗机构。该方法操作简便、快速，无需特殊设备，从本文表 1 中看出，两种方法均有较高的灵敏度，金标法阳性的 11 例标本用 ELISA 法检测有4 份标本阴性、7 份标本阳性，但两者差异无显著性（ P0.05） ，均可适用于医学检测。然
6、而笔者在工作中发现，选用 HIV 抗体初筛试剂时，应视不同情况而定。本文表 1 中， 11 例金标法初筛阳性的样本，经省 CDC 确认 7 例为阳性，7 例 ELISA 法检测阳性的样本经省 CDC 确认均为阳性。可见，ELISA 法的特异性高于金标层析法，有较高的阳性预期值。而金标层析法存在较高的假阳性率，其产生的原因多数还不清楚，排除技术因素外，可能主要是因为金标法受实验条件和时间的限制，与 ELISA 试剂在制作技术上还存在一定的差异，还有一些针对 HLA 抗原的抗体、患者自身免疫性疾病、寄生虫、其他病毒以及高丙种球蛋白症病人的血清标本也常容易出现假阳性反应1 。在医院就诊的过程中，因
7、HIV-Ab 初筛阳性而确认实验阴性导致的医疗纠纷时有发生。因患者不理解或医患之间沟通不够，势必给医院的医疗服务质量和医疗形象造成负面影响，也给受检者造成巨5大的精神压力和恐慌心理。因此选用一种特异性高、有较高的阳性预期感、能最大限度保证发现真正 HIV 感染者的试剂尤为重要，ELISA 试剂即具有以上优点。所以大、中型医院在进行 HIV-Ab 初筛时，除急需手术或输血的病人用金标层析法外，其余标本应尽量采用 ELISA 法，以降低假阳性率，减少医患纠纷，其他如进行艾滋病流行病学监测1 ，对特定人群 HIV 感染状况和发展趋势进行无关联和匿名调查与检测；对流行病学、临床、病毒学或 HIV 相关
8、的研究对象进行自愿检测时也应该选择特异性高的 ELISA 试剂。金标试剂可能由于本身反应条件的限制，其质量还有待进一步提高，但该方法简便、快速、检测敏感度高、假阴性率低，可适合街头献血员筛选的大批量检测，经济合算，献血者也乐意接受，可使无偿献血的血液合格率得到明显提升，对提高血液质量、保障输血安全、减少血液浪费、进一步推广无偿献血工作起到了积极作用。金标试剂还具有易于保存（环境温度为 230） 、储存时间长（2 年） 、不浪费等诸多优点，对 HIV-Ab 检测标本最少、不具备 ELISA 测定条件的偏远地区中、小型检验科也尤为适用。【参考文献】1 陈曦，陈炎.艾滋病防治技术手册. 长沙：湖南科学技术出版社，2005，14-15；151-152.2 强来英，林旭东，裴丽健，等. 人类免疫缺陷病毒感染抗体检测6窗口期血清检出.中国输血杂志，2001 ，14（6）：341.3 王兰兰.临床免疫和免疫学检验，第 3 版.北京：人民卫生出版社，2005，91-95.4 叶应妩，王毓三.中华医学检验全书，第 2 版.南京：东南大学出版社，1997，379-382.
