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1、基本仪器1、毛细吸管：10l、20l2、改良牛鲍（Neubauer）计数盘：1 个计数池（3x3x0.1mm）=9 个大方格中央 1 个大方格（1x1x0.1mm）=25 个中方格 =400 个小方格=1l四角 1 个大方格，平分为 16 个中方格3、采血管：紫色：EDTA-K 2 血常规检查黑色：3.2%枸橼酸钠与血比例 1:4 血沉检查血液检验一、血涂片染色1、血涂片：玻片不洁 角度 速度 血滴 推片边缘缺口 推片边缘弧形空泡 过大：厚过小：薄快：厚短慢：薄长堆积尾部不匀：厚薄相间过大：厚小：薄条样缺损 中央薄两头厚尾尖2、瑞士染色瑞氏染料：伊红（碱） 、亚甲蓝（酸）缓冲液：磷酸盐缓冲液（
2、pH6.4-6.8）时间：染料（I 液）：5d 左右，0.5-1min 缓冲剂（II 液）：等量或稍多，5-10min2、末梢采血1、消毒：75%酒精2、第一滴血因混有组织液，擦掉不用3、静脉采血1、消毒：30g/L 碘酒，75%酒精2、有抗凝剂或其他添加剂的混匀四、血细胞计数WBC 计数 嗜酸粒计数 RBC 计数 PLT 计数稀释液 2%冰乙酸 丙酮-伊红Hayem 液或枸橼酸钠甲醛盐水或生理盐水1%草酸铵稀释液作用稀释及破坏成熟 RBC，固定WBC稀释，破坏RBC、其他WBC，使 E 着色稀释 稀释，破坏 RBC稀释液量 0.38ml 0.38ml 2ml 0.38ml血量 20l 20l
3、 10l 20l稀释倍数 20 20 200 20计数区域 四角大方格上下两池四角及中央五个大方格中央大方格的五个中方格中央大方格的五个中方格沉淀时间 2-3min 3-5min 2-3min 10-15min公式N/410x20x106/LN20x106/LN5x10x200x106/LN5x10x20x106/L参考值成人：（4-10）10 9/L新生儿：（15-20）（0.05-0.5）成年男：（4.0-5.5）109/L（100-300）x109/L儿童：（15-20）x10 9/L109/L 成年女：（3.5-5.0）109/L新生儿：（6.0-7.0）109/L109/L校正存在有
4、核红时：100/（100+有核红） xN4、白细胞分类计数1、血涂片，瑞士染色2、体尾交界处， “弓”形检查3、比值中杆 中叶 嗜酸 嗜碱 淋巴 单核比例% 1-5 50-70 0.5-5 0-1 20-40 3-84、核左移：杆状核增多，出现幼稚中性粒核右移：5 叶以上中性粒3%5、MCV、MCH、MCHC1、测定项目：RBC 计数、Hb 测定、Hct 测定2、Hb 测定：血红蛋白仪法试剂 预热 配制 参考值文齐液（HiCN转换液）水或文齐液预热 30min20lEDTA-K 2血+5ml 文齐液（混匀静置5min）成年男：120-160g/L成年女：110-150g/L新生儿：170-20
5、0g/L3、Hct 测定：温氏法试剂 器材 读数 参考值EDTA-K2血水平离心机（2264g 以上，离心 30min） ，温氏管RBC 柱层毫米数 x0.01成年男：0.42-0.49成年女：0.37-0,48新生儿：0.47-0.676、血沉魏氏测定方法试剂 器材 时间 读数 参考值109mmol/L 枸橼酸钠抗凝血魏氏血沉管，血沉架 1hRBC 下降暴露的血浆长度（mm）成年男：15mm/h成年女：20mm/h七、尿液常规检测1、外观：颜色（淡黄、深黄、淡红、红色、乳白、浓茶、咖啡）透明度（透明、微浑、浑浊）2、尿蛋白定性磺基水杨酸法 加热乙酸法原理磺酸根阴离子与尿蛋白氨基酸阳离子结合生
6、成不溶性蛋白盐沉淀，沉淀程度与尿蛋白量成正比加热煮沸使蛋白质变性，加入乙酸加速蛋白质沉淀试剂 200g/L 磺基水杨酸溶液 5%乙酸溶液方法1ml 尿液+2d 试剂混匀，黑色背景下 1min内观察（有空白对照）加热（黑观察）5% 乙酸 2-4d加热（黑观察）结果肉眼可见微浑云雾状+颗粒 +絮状+大量絮状或凝块+同左方法学评论灵明度高，应用于干化学法测尿蛋白，但若尿中存在高浓度尿酸（盐） 、草酸盐等干扰因素或混入生殖系统分泌物时易造成假阳性结果。对白蛋白敏感而球蛋白不敏感。操作略复杂，同样受生殖道分泌物的干扰成假阳性。对白蛋白和球蛋白都敏感5、尿糖检测对象 尿中的葡萄糖原理高热、碱性环境中尿液中
7、葡萄糖或其他还原性糖的醛基能将蓝色的硫酸铜还原为氧化亚铜，出现黄色至砖红色沉淀试剂 班氏试剂（改良班氏定性试剂）方法尿离心取上清2ml 试剂煮沸 1min 观察试剂是否合格加入 0.2ml 尿上清混匀煮沸 1-2min（尿液：班氏=1:10）结果蓝，色未变 蓝中绿无沉淀液绿，黄绿沉淀少量+ 较多偏黄沉淀+液土黄，大量沉淀+ 大量红沉淀+方法学评价灵敏度较低，易受尿液中其他还原物质的影响而出现假阳性6、尿酮体环状法（Lange 法）原理尿液中乙酰乙酸和丙酮与亚硝基铁氰化钠作用，与氨液接触后生成紫红色物质试剂 亚硝基铁氰化钠、冰乙酸、25-28%浓氨水方法5ml 尿+约 250mg 亚硝基铁氰化钠
8、（混匀）+0.5ml 冰乙酸（混匀）+2ml 浓氨水（缓慢沿管壁注入）结果看液面交界处颜色变化：10min 无紫环 10min 内浅紫红环10min 渐出现紫环+ 较快出现紫环+立刻出现紫环+或+7、尿胆红素（Harrison 法）原理尿中胆红素被氯化钡吸附形成胆红素钡盐沉淀，与Fe3+反应，被氧化成蓝色的胆青素，绿色胆绿素和黄色胆黄素，出现绿色或黄绿色反应试剂酸性三氯化铁试剂（Fouchet 试剂） 、100g/L 氯化钡溶液方法5ml 尿+2.5ml 氯化钡（混匀，3000rx3-5min，弃上清）+2 滴 Fouchet 试剂结果长时间不变色 沉淀物渐浅绿+沉淀物绿+ 沉淀物立刻蓝绿+假
9、阳 尿中大量药物如：牛黄、熊胆粉、水杨酸盐、阿司匹林等假阴 Fouchet 试剂加入过量8、尿胆原（改良 Ehrlich 法）原理酸性溶液中尿胆原的吡咯环能与对二甲苯氨基苯甲醛（Ehrlich 试剂）作用后成樱桃红色反映，其颜色变化与尿胆原含量成正比试剂 Ehrlich 试剂方法2ml 无胆红素尿液 +0.2mlEhrlich 试剂（混匀，静置10min）观察方法 白色背景，从试管口垂直从上往下看结果长时间不变色 10min 后浅红+10min 后樱桃红+ 立刻樱桃红+假阳 尿中含吡啶、酮体等（加入戊醇保持红真阳，变浅绿假阳）假阴尿胆原易被氧化为尿胆素（所以标本应新鲜送检）尿中含维生素 C、甲
10、醛、乌洛托品等（抑制反应）9、尿有形成分参考范围：细胞： RBC：0-3/HPFWBC：0-5/HPF扁平上皮细胞：少许（女可为多见）/HPF 移行上皮细胞：偶见/HPF管型： 透明管型：0-1/HPF结晶： 尿酸盐、碳酸盐、磷酸盐：少许/HPL8、粪便常规1、外观： 颜色：黄褐色，黄色，金黄色，鲜红色，暗红色，柏油样，灰白色，绿色形状：软，硬，糊状，粘液状，胨状，泡沫样，水样，血样，米泔样，柏油样等寄生虫：查见与否2、镜检细胞，脂肪球，寄生虫等3、便隐血免疫法（单克隆抗体胶体金法）原理：双抗体夹心免疫层析（单抗抗人血红蛋白-人血红蛋白- 多抗抗人血红蛋白）特点：灵敏性特别高九、生殖系统分泌物
11、检查1、精液精子计数试剂 标本 配制 计数 计算精子稀释液：碳酸氢钠（破坏精液粘稠性）甲醛（固定精子，定量稀释）1h 以上已经液化的精液0.38ml 稀释液+20l 精液（稀释 20倍）同 RBC 计数 Nx5x10x20x106/L=Nx109/L2、阴道分泌物清洁度：第 104 页线索细胞（加德纳菌）阴道毛滴虫真菌染色：革兰染色10、脑脊液，浆膜腔积液1、外观：颜色，透明度，凝固性（有无凝块，薄膜）2、细胞总数计数（直接计数，也可以用红细胞稀释液稀释后计数）10 个大方格3、白细胞计数（冰乙酸破坏 RBC）4、脑脊液蛋白质定性（潘氏试验 Pendy test）：原理苯酚与脑脊液中的蛋白质（球蛋白为主）结合形成不溶性蛋白盐沉淀，沉淀量与蛋白量成正比试剂 5%苯酚溶液方法 2-3ml 苯酚+垂直滴入 1-2d 脑脊液+立即黑背景观察结果 清晰透明 微白雾状灰白云雾+ 白色浑浊+白色絮状或沉淀+ 立即白色沉淀+假阳 苯酚试剂不纯，器材不干净5、浆膜腔积液蛋白质定性原理黏蛋白是酸性糖蛋白，在稀乙酸中可凝结出现白色沉淀试剂 冰乙酸方法100ml 水+2-3d 冰乙酸（混匀） +黑色背景直接垂直滴加2-3 滴浆膜腔积液假阴 冰乙酸过量
