肺痨康对结核杆菌体内抑菌实验研究

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1、1肺痨康对结核杆菌体内抑菌实验研究作者:王帅叶品良 申金贵卢润生【摘要 】 观察肺痨康对结核杆菌体内抑菌作用。 方法小鼠随机分为空白组,模型组,阳性组(RFP,灌胃 150mg/kg) ,肺痨康高、中、低剂量组 6 组,空白组,模型组给予等容积的生理盐水。实验当天,将结核菌配制成 1mg/ml 生理盐水菌悬液,尾静脉注射0.2ml/只。于第二天灌胃药物。一周后死亡的动物作解剖记录;观察肝,脾,肺的重量指数及每个脏器的结核结节,脏器的病理形态学变化(HE 染色 )与结核菌数(ZN 染色) 。观察并记录各组动物的存活时间。 结果肺痨康高剂量对感染肺结核小鼠有明显的治疗效果,中剂量组有较明显的疗效。

2、 结论肺痨康高剂量、中剂量有较好的抗结核杆菌的作用。 【关键词】 肺痨康;结核菌;体内抑菌Abstract: Tuberculosis is one of the critical diseases with priority of the States infectious disease prevention. This research, based on the collection and analysis of the cases cured by “feilaokang” and a fine result for symptomatic treatment experiment

3、 in vitro, make a further research of 2bacteriostasis in vivo. The pathological section examination has also been made, including HE coloration and ZN coloration examination. The result indicate that there is a clear effect, for some indicators, on infected mouse for middle does and a clear effect,

4、for all indicators, on infected mouse for high does. This result would be the very foundation for the further research of screening for MDRTB with effect by “feilaokang” and concluding for the antibacterial coverage and antibacterial material basis.Key words: Feilaokang; tubercle bacillus; bacterios

5、tasis in vivo肺痨康是在中医药理论的指导下,结合长期的临床实践、科学总结出的一张实用方剂。前期实践和实验证明, “肺痨康”对各型结核菌都有较好的治疗作用1 ,体外研究也取得了较好的效果 2 。本次研究对肺痨康体内抗菌进行了实验观察,现报道如下。1 材料与方法1.1 材料3(1)实验药品:肺痨康水煎液,药品用常规方法煎煮,所需药品均购自同仁堂药店成都分店。对照药物:利福平(成都锦华药业有限公司,批号:071101。配制方法:RFP 先用二甲基甲酰胺一滴溶解后,再用蒸馏水稀释。 ) (2)实验菌株: H37RV 标准菌(ATCC:27294 ) ;由中国疾病预防控制中心结核病预防控制分

6、中心提供。 (3)实验动物:昆明种小鼠, 120 只,一级,雌性,体重1822g。由成都中医药大学动物实验中心提供(合格证号:SCXK(川)200811 ) 。1.2 实验方法 36小鼠经 PPD 测试阴性后,完全随机分组,分为空白组,模型组,阳性组(RFP,灌胃 150mg/kg) ,肺痨康高剂量组,肺痨康中剂量组,肺痨康低剂量组(分别按 6g/kg、3g/kg、1.5g/kg 灌胃给药)6 组,空白组,模型组给予等容积的生理盐水。实验当天,将结核菌配制成 1mg/ml 生理盐水菌悬液,尾静脉注射 0.2ml/只。于第二天灌胃药物,每日一次,连续 56 天。一周后死亡的动物作解剖记录;观察肝

7、,脾,肺的重量指数(脏器重 g/体重 g100),及每个脏器的结核结节,脏器的病理形态学变化(HE 染色)与结核菌数(ZN 染色) 。观察并记录各组动物的存活时间。1.3 统计学方法4结果采用 SPSS17.0 统计软件处理,测定结果以(xs)表示,组间计量资料比较采用组间 t 检验,计数资料用秩和检验。2 结果2.1 小鼠脏器重量指数,体重,肺脏结核结节,存活时间的比较见表 1。表 1 小鼠脏器重量指数、体重、肺脏结核结节、存活时间的比较(略)与空白组比较,#P0.01,#P0.01 ,*P0.01,*P0.01,&P0.01,&P0.012.2 小鼠脏器病理组织学结果( HE 染色)见表

8、2。表 2 小鼠脏器病理组织学结果(略)2.3 小鼠脏器结核菌检查( ZN 染色)见表 3。表 3 小鼠脏器结核菌检查(略)53 讨论肺痨康高剂量与空白组、阳性组在存活时间、脏器指数等各指标方面均无显著性差异,证明肺痨康高剂量能达到理想的治疗效果。肺痨康中剂量组与空白组有一定的差异,但与阳性组无显著性差异,证明中剂量虽然有一定的治疗作用,但不及 RFP 和肺痨康高剂量。低剂量显著性差异明显。可以得出肺痨康高剂量、中剂量有较好的抗结核杆菌的作用,但中剂量效果次于 RFP。因此,有必要进一步对中剂量进行抗菌筛选,确定抗菌范围,另外,高剂量、中剂量对其他耐药性结核杆菌的体内实验、有效成分、物质基础、

9、抗菌机制,也有待一步的研究。【参考文献】1叶品良,卢润生,黄秀深,等. 肺痨康治疗肺结核 69 例J.江西中医药,2009,40(2 ):33.2刘婷婷,叶品良,王帅, 等.“肺痨康 ”对耐多药结核分枝杆菌抑菌效力的体外研究J.光明中医,2008,23(10 ):14531454.3卢润生,郑德福,李定越, 等.某中药抗结核菌药物效果6实验研究J.现代预防医学,2007,34 (5):878879 ,882.4李定越,卢润生,蒋绍双. 结核菌实验动物模型J.四川医学,2003,24(7):761762.5中国防痨协会基础委员会. 结核病诊断实验室检验规程M.北京:中国教育文化出版社,2006.6卢润生,刘传金,漆浩珊, 等.结核菌实验动物模型探讨J. 中国防痨通讯,1990,12(3):118.

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