(新编)微生物接种方法

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1、常用的几种微生物接种方法接种细菌应用接种针(环)来沾取细菌标本,进行接种。接种环与接种针为用白金丝或合金丝所制,亦可用电炉丝代替,因它能耐高热且散热快,便于接种前后通过火焰灭菌(整个接种环烧红即达到灭菌目的) 。在使用接种环时一般用右手持笔式较为方便,左手可持培养基进行配合,其接种程序可分为:灭菌接种环稍冷沾取细菌样品进行接种(包括:启盖或塞、接种划线、加盖或塞)进行接种环灭菌等五个程序。不同培养基,接种方法也不同,分述如下:一、平板划线接种法(分离培养法)是将细菌分离培养的常用技术,其目的是将混有多种细菌的培养物,或标本中不同的细菌(病原菌与非病原菌)使其分散生长,形成单个菌落或分离出单一菌

2、株,便于识别鉴定。平板划线接种方法较多,其中以分段划线法与曲线划线法较为常用。(一)分段划线法平板分段划线(左) 及培养后菌落分布图本法多用于含菌量较多的标本。方法是以接种环沾取少许样品先涂布于平板培养基表面一角作为第一段划线(划线时接种环与培养基表面呈 45 度角) ,然后将接种环置火焰上灭菌,俟冷(可接触平板试之,如不融化琼脂,即已冷却) ,于第二段处再作划线,且在开始划线时与第一段的划线相交接数次,以后划线不必再相接,待第二段划完时,再如上法灭菌,接种划线,依次划至最后一段,灭菌接种环。这样每一段划线内的细菌数逐渐减少,即以获得单个菌落,划线接种完毕,盖好平皿盖,倒置(平板底部向上)于

3、37温箱中培养。(二)连续划线法:此法多用于接种材料中含菌数量不太多的样品或培养物。方法是先将样品或培养物涂于平板表面的一角,然后用接种环自样品涂擦处开始,向左右两侧划开并逐渐向下移动,连续划成若干条分散的平等线。二、斜面接种法 此法主要用于移种纯菌,使其增殖后用于鉴定或保存菌种。通常是从平板培养物上挑取某一单独菌落或者从一支已长好的斜面菌种,移种至斜面培养基上,接种步骤如下(以从已长好的斜面菌种转接为例):(一)左手拿两支试管,一支为经灭菌的斜面,另一支为已长好的菌种。右手持接种环或接种针通过火焰灭菌后俟冷,并同时以右手小指和无名指轻轻拔取两支试管的棉塞或试管帽(先转动棉塞后拔去) ,夹持于

4、手指间。(二)将试管口通过火焰数次,并稍转动,以防止外界的污染。(三)首先将接种环伸入有菌试管,使接种环接触菌苔取少量菌,取出接种环,立即将管口通过火焰灭菌后将接种环伸入斜面管内,先从斜面底部到顶端拖一条接种线,再自下而上的蜿蜒涂布,或直接自斜面底部向上蜿蜒涂布。此步注意接种环不可碰试管壁和接种时不要划破培养基。(四)烧试管口,塞好棉塞或盖好试管帽,将接种环插到酒精瓶中。三、倾注培养法本法用于饲料中细菌、霉菌的计数。方法是取原始样品或经适当稀释的(通常是 10-110-5 稀释)液体 1mL,置于直径 9cm 无菌平皿内,倾入已融化并冷至 50左右的培养基约 1315mL ,立即混匀,待凝固后

5、倒置,于一定温度下培养一定小时,作菌落计数。四、穿刺接种法此法多用于双糖、半固体、明胶等培养基的接种,方法与斜面接种类似。用接种针挑取菌落或菌液少许,由培养基表面中央直刺至管底(若为三糖铁并在斜面加以涂布) ,然后沿穿刺线拔出接种针(注:接种半固体看动力者不穿刺到底) 。穿刺接种 琼脂固体穿刺生长形状五、液体接种法此法多用于单糖发酵试验等,接种方法与斜面接种方法基本相同。以左手持培养基与菌种管,右手持接种环和拔持棉塞,将挑取的菌落或菌液接种于液体培养基内。19912012 年考研中医综合试题及答案 刘云 - 4 -1991 年硕士研究生入学考试 中医综合科目试题 一、A型题:每一道考题下面都有

6、A、B、C、D、E 5个备选答案,在答题时请选择一个最合适的答案,写在答题纸上1. “阴在内,阳之守也,阳在外,阴之使也”,主要说明阴阳之间存在着:A. 对立制约 B. 互根互用 C. 互为消长 D. 平衡协调 E. 互相转化2. 与精神意识思维活动关系最密切的是A. 心主血脉的生理功能 B. 肝主疏泄的生理功能 C. 脾主运化的生理功能 D. 肺主治节的生理功能 E. 肾主藏精的生理功能3. 肺为“水之上源”的主要依据是A. 肺的通调水道的功能 B. 肺具有布散水液的功能 C. 肺具有输精于皮毛的功能 D 肺为脏腑之华盖 E. 饮入于胃上归于肺4.“乙癸同源”应归属于:A. 肝和心的关系 B

7、. 肝和肺的关系 C. 肝和肾的关系 D. 肝和牌的关系 E. 肾和牌的关系 5.“吐下之余,定无完气”的生理基础是 A. 气能生津 B. 津能化气 C. 气能摄津 D. 津能载气 E. 气能行津6. 十二经脉气血充盛有余时,则渗注于:A. 经别 B. 别络 C. 浮络 D. 孙络 E. 奇经7 素问五藏生成篇说“多食酸”则:A. 脉凝泣而变色 B. 皮搞而毛拔 C. 筋急而爪枯D. 肉胝皱而唇偈 E. 骨痛而发落8. 临证指南医案指出“内风”的机理均属于 :A. 体内气机的逆乱 B. 体内阴血的不足 C. 体内阳气之变动 D. 诸风掉眩,皆属于肝 E. 体内筋脉失常9. “气盛则身以前皆热”

8、的经脉是A. 手少阴心经 B. 任脉 C. 冲脉 D. 足阳明胃经 E 足太阴脾经10. “寒因寒用,热因热用”属于 :A. 逆治法 B. 阳病治阴,阴病治阳 C. 阳中求阴,阴中求阳 D. 扶阳配阴,扶阴配阳 E 以上都不是11. 李士材的诊家正眼把脉象分为多少种 ?A. 24 种 B. 28 种 C. 27 种 D. 32 种 E. 36 种12. 望色十法中 “夭”是指:A. 色惨 B. 色闭 C. 色开 D. 色深浓 E. 色枯楠13. 腐苔主病与哪一项无关?A. 食积 B. 痰浊 C. 湿温 D. 肝痈 E. 下疳14. 多食易饥 , 大便漉泄是A. 食积不化 B. 脾胃虚弱 C.

9、肝牌不和 D. 胃火亢盛 E. 胃强脾弱15. 天亮咳甚属于 :A. 寒湿 B. 肾亏 C. 脾虚 D. 燥热 E. 肺实16. 下列哪种脉象不主实证 ?A. 革脉 B. 滑脉 C. 结脉 D. 肾脉 E. 弦脉17. 解索脉的特征是A. 脉在筋肉之间,脉搏极迟慢 B. 脉在筋肉之间,连连数急,三五不调C. 脉在皮肤,头定而尾摇 D. 脉在皮肤,如虾游水 E. 以上都不是18. 胸满,呕逆,飧泄,狐疝,遗溺属于 :A. 足厥阴肝经病证 B. 足太阴脾经病证 C. 足少阴肾经病证 D. 足少阳胆经病证 E. 足太阳膀胱经病证19. 少阴热化证的心烦不寐是因 :A. 热扰胸脯 B. 热扰心神 C.

10、 内有燥屎 D. 肝阳上亢 E. 水亏火旺20. 温病上焦病证不见以下哪个症状 ?A. 口渴 B. 谵语 C. 肢厥 D. 瘛疭 E. 脉浮数21. 哪味药可治痹痛、疥癣?A. 麝香 B. 牛黄 C. 冰片 D. 苏合香 E. 菖蒲19912012 年考研中医综合试题及答案 刘云 - 5 -22. 蜀漆的来源是A. 漆树的枝叶 B. 泽漆的全草 C. 黄常山的嫩枝叶 D. 干漆的加工品 E. 田三七的根23. 蟾酥内服一次用量是A.0.0150.03 克 B.0.30.6 克 C.0.10.2 克 D.0.0020.004 克 E. 以上都不是24. 我国最早记载制成乌头碱结晶的文献是A. 本

11、草纲目 B. 本草蒙荃 C. 炮制大法 D. 白猿经 E. 本草备要25. 地龙的功效是A. 息风、平喘、祛风湿 B. 息风、利尿、退黄疸 C. 息风、利尿、退虚热D. 息风、安神、平喘咳 E. 息风、平喘、通经络26. 栀子的归经是A. 心、肺、胃、三焦经 B. 心、肝、胃、肺经 C. 心、肺、胆、膀胱经D. 心、胃、肝、胆经 E. 心、胃、肺、膀胱经27. 清肝养血明目退翳的药物是A. 谷精草 B. 密蒙花 C. 青葙子 D. 菟丝子 E. 沙苑子28. 固精缩尿兼能涩肠止泻的药是A. 金樱子 B. 桑螵蛸 C. 覆盆子 D. 赤石脂 E. 乌梅29. 下列除哪项外均为苦味药的作用 ?A.

12、 清热泻火 B. 泄降逆气 C. 引药下行 D. 通泻大便 E. 燥湿坚阴30. 既能燥湿止带,又能消肿排脓的药是A. 乌贼骨 B. 白蔹 C. 白芷 D. 苍术 E. 白果31. 下列方剂的组成药物中含有生地黄的是A. 阳和汤 B. 炙甘草汤 C. 六昧地黄丸 D. 泰山磐石散 E. 玉女煎32. 安宫牛黄丸、紫雪丹、至宝丹三方功用各有所长,其中紫雪丹长于:A. 清热 B. 解毒 C. 豁痰 D. 开窍 E. 镇痉33. 犀黄丸的功用是A. 清热解毒,消肿溃坚,活血止痛 B. 清热解毒,化痰软坚,消散瘿瘤 C. 解毒消痛,化痰散结,活血祛瘀 D. 疏风清热,化痰散结,凉血消肿 E. 行气活血

13、,祛湿化痰,软坚消癥34. 苇茎在千金苇茎汤中的主要治疗作用是A. 清肺泄热 B. 生津止渴 C. 化瘀排脓 D. 润肺排痰 E. 利湿消痈35. 肝郁血虚,脾失健运。见两胁作痛,神疲食少,脉虚弦者,治宜选用:A. 一贯煎 B. 越鞠丸 C. 逍遥散 D. 四逆散 E. 以上都不适宜36. 身热多汗,心胸烦闷,气逆欲呕,体倦口干,舌红少苔,脉象虚数者,治宜选用:A. 导赤散 B. 白虎加人参汤 C. 生脉散 D. 竹叶石膏汤 E. 王氏清暑益气汤37. 既可用以治疗脾不统血所致的便血、崩漏或月经超前,量多色淡,淋漓不止;又可用以治疗脾不健运所致的食少体倦,神疲少寐的方剂是A. 温牌汤 B. 健脾丸 C. 清脾饮 D. 实脾散 E. 归脾汤38. 胃气虚弱,痰浊内阻,心下痞硬,臆气不除者治宜选用:A. 三子养亲汤 B. 苏子降气汤 C. 半夏泻心汤 D. 四磨汤 E. 旋覆代赭汤39. 产后血虚受寒,恶露不行,小腹冷痛者,治宜选用:A. 复元活血汤 B. 桂枝茯苓丸 C. 失笑散 D. 生化汤 E. 温经汤40. 外感咳嗽,经用解表宣肺方药,邪未尽去,仍咳嗽咽

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