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1、影响尿液生成的因素【实验目的】研究刺激迷走神经和静脉注射生理盐水、葡萄糖、去甲肾上腺素等药物对尿生成的影响及作用机制【实验原理】：尿生成的过程包括肾小球滤过及肾小管的重吸收和分泌，凡能影响上诉过程的因素都能影响尿液的生成。肾小球滤过受滤过膜的面积和通透性、血浆浆胶体渗透压、肾小球血浆流量和肾小球毛细血管等因素的影响，若静脉注射生理盐水、葡萄糖等能够影响此过程。肾小管的重吸收和分泌此二者又受交感神经以及肾上腺素和去甲生上腺素等体液因子的影响，肾小管重吸收小管液中溶质浓度等因素的影响，电刺激迷走神经素影响的就是这一机制。此外，影响尿液浓缩和稀释机制的因素，影响抗利尿激素释放的因素，影响肾素-血管紧
2、张素-醛固酮系统的因素以及循环血量、全身动脉血压等都能对尿液生成产生影响。进入体内的利尿药呋塞米由于和血浆蛋白结合而不能被肾小球滤过，但能在近端小管中主动分泌到小管液中，同样可以影响尿液生成【实验仪器】：RM6240微机生物信号处理系统、家兔、 生理盐水，200g/L 氨基甲酸乙酯，200g/L 葡萄糖，0.1g/L 去甲肾上腺素，1000U/L 垂体后叶素，10g/L 呋塞米（利尿），膀胱插管以及电极给予刺激，还有解剖用的剪刀，玻璃棒，镊子等【实验步骤】：（1） 称重动物，耳缘静脉注射20%的氨基甲酸乙酯溶液（5 mlkg-1体重）进行麻醉，待动物麻醉后仰卧固定于手术台上（2 ） 在颈部手术
3、：剪去颈前部兔毛，沿喉结和胸骨正中切开皮肤56 厘米，用止血钳纵向分离软组织及颈部肌肉，暴露气管及与气管平行的右血管神经鞘，细心分离出右侧鞘膜内的迷走神经，用剪刀穿线备用 (3) 在腹部手术：从剑突向下摸到耻骨联合，向上沿中线切口，沿腹白线打开腹腔，将膀胱轻拉至腹壁外，先辨认清楚膀胱和输尿管的解剖部位，用止血钳提起膀胱前壁（靠近顶端部分），选择血管较少处，切一纵行小口，插入插管后膀胱即随着尿液的流出而缩小。用线结扎膀胱颈部以阻断膀胱同尿道的通路。使插管的引流管出口处低于膀胱水平，用培养皿盛接，由引流管流出的尿液，手术完毕后，用温热的生理盐水纱布覆盖腹部创口。（4） 计算机生物信号采集处理系统：
4、打开电脑， 将刺激电极与系统的刺激输出相连，设置为5V、30hz、2ms、10s(5) 分别给予以下刺激，记录尿液的变化，注意每次实验前记录前 1min的尿量，用来比较尿量的变化 静脉注射20mL生理盐水，记录5min的尿流量,取最少1min的尿量 间断电刺激右侧颈迷走神经的末梢端，记录1min的尿流量 静脉注射葡萄糖20 毫升，记录5min的尿量，取最多的1min的尿量 静脉注射去甲肾上腺素0.3 毫升，记录2min的尿量，取最少的1min的尿量 静注注射利尿药呋塞米，记录5min的尿量，取最多1min的尿量 静脉注射垂体后叶素，记录2min的尿量，取最少1min的尿量（6）实验后处理，记录
5、实验数据并绘制成表格，将手术台处理干净，仪器洗净并放回原处【实验注意事项】： 本实验需作多次静脉注射，应特别注意保护耳缘静脉，静脉穿刺从近耳尖处开始，逐次移向耳根。做膀胱插管时，操作须轻，以免膀胱受刺激而缩小，增加插管难度。各项实验顺序的安排是:在尿流量增多的基础上进行减少尿生成的实验，在尿量少的基础上进行促进尿生成的实验。并且进行每个实验项目时，都尽可能使尿液量和血压水平恢复到正常水平后，再进行操作。【实验结果】：表1.各种因素对家兔尿生成的影响尿量 ( ml/min )注射前 注射后大剂量生理盐水 20ml 0 0.3电刺激迷走神经 0.2 0.1200g/L葡萄糖 5ml 0.2 1.1
6、0.1g/L去甲肾上腺素 0. 3ml 0.3 0.210g/L 呋塞米 1ml 0.2 2.51000/L垂体后叶素 0.5 ml 2.6 0表中的注射前1min的尿量，注射后为所记录的时间内最多或最少的一分的尿量。静脉快速注射生理盐水20ml 后最少尿流量至0.3ml/min；刺激迷走神经最小尿流量减少至 1 滴/min；静脉注射葡萄糖20mL 后，最大尿流量增加至11 滴/min ；静脉注射去甲肾上腺素0.3mL，最小尿流量减少至2 滴/min；静脉注射利尿药呋塞米后，变化明显，最大尿流量增加至25滴/min；静脉注射垂体后叶素，最小尿流量减少至0 滴/min ，结果为静脉注射大量生理盐
7、水和高渗葡萄糖可使尿量增多，血压升高。间断电刺激迷走神经可引起尿量减少，血压降低。静脉注射去甲肾上腺素可使尿量减少，血压升高。静脉注射呋塞米可使尿量大量增多。【结果分析】：静脉注射生理盐水对尿量和血压的影响及作用机制：静脉快速注射生理盐水可使家兔尿量显著增加，血压升高。静脉快速注射生理盐水20ml 引起血容量增加，进而使血压升高。当小管液中的溶质浓度增加时，可使小管内的渗透压升高，肾小管特别是近端小管对水的重吸收减少，因而尿量增加这种因渗透压升高而引起尿量增多的现象是渗透性利尿1，当血压升高超过肾血流的自身调节能力时，可使肾小球毛细血管血压升高，且血浆稀释引起血浆胶体渗透压下降，二者均可使肾小
8、球滤过率升高，尿生成增多，继而尿流量增大。另外，循环血量的增加使心房内压升高，对容量感受器刺激增强，迷走神经传入冲动增多，反射性的抑制VP（血管升压素）的合成和释放远端水管和集合管对水的重吸收减少，尿量增多2。循环血量增多使心房扩张和摄入钠过多时还可刺激心房钠尿肽合成，通过抑制集合管对NaCl 的重吸收、促进入球和出球小动脉的扩张（以前者为主）以及抑制肾素、醛固酮和抗利尿激素的分泌，使水的重吸收减少3。刺激迷走神经对尿量和血压的影响及作用机制：间断电刺激迷走神经末梢端可使家兔尿量减少，血压降低。迷走神经兴奋可对心脏产生负性变时、变力和变传导作用，同时也可使部分受副交感支配的外周血管舒张，从而导
9、致动脉血压降低。动脉血压降低至超过肾血流的自身调节能力时，可使肾小球毛细血管压降低，有效滤过率降低，尿生成减少。另外血压降低，对颈动脉窦压力感受器的刺激减弱，经迷走神经传入中枢的冲动减少，反射性地使ADH 分泌和释放增多，水重吸收增多，尿量减少，以有利于血容量和血压的恢复4静脉注射葡萄糖对尿量和血压影响及其作用机制：静脉注射 20%葡萄糖可使家兔血压上升，尿量增加。静脉注射20%葡萄糖20ml 可使血浆渗透压升高，促进组织也流入毛细血管，循环血量增加引起血压升高。由于转运葡萄糖的转运体数量有限，近端小管对葡萄糖的重吸收有限，当血浆中葡萄糖的浓度超过一定限度时，有部分肾小管对葡萄糖的吸收达到极限
10、5,明显超过肾糖阈，导致小管液中葡萄糖含量增多，小管液渗透压增高，妨碍了水和NaCl 的重吸收，造成尿量增多并出现糖尿 6。另外血压升高可使肾小球滤过率增高且反射性抑制ADH 的合成和分泌，也可使尿量增多静脉注射去甲肾上腺素对尿量和血压的影响及作用机制：静脉注射去甲肾上腺素可使血压升高，尿量减少。其机制为：去甲肾上腺素可兴奋血管平滑肌上的-肾上腺素能受体，引起血管收缩，外周阻力增加，同时对心脏起到正性变时、变力和变传导作用，从而导致血压上升。去甲肾上腺素可使入球小动脉和出球小动脉收缩，但前者收缩比后者更明显，使肾小球毛细血管血浆流量减少，肾小球毛细血管血压下降，肾小球的有效滤过压下降，尿生成减
11、少 7。静脉注射呋塞米对尿量和血压的影响及作用机制：静脉注射呋塞米可使家兔尿量大幅增加，血压变化不明显。速尿可与髓袢升支粗段的Na+-K +-2Cl-共同转运系统可逆性结合，抑制其转运能力，使NaCl 重吸收减少，降低了肾脏的稀释功能，同时使髓质间隙渗透压降低，也降低了肾脏的浓缩功能，从而产生迅速而强大的利尿作用，排出大量等渗尿 8。静脉注射垂体后叶素对尿量和血压的影响及作用机制：注射垂体后叶素可使家兔尿量减少，血压降低。垂体后叶素包括催产素和ADH，ADH 可作用于血管平滑肌的相应受体，使血管收缩，但由于降压反射的作用，血压最终仍表现为下降。ADH 可与远曲小管和集合管上皮细胞管周膜上的V2 受体结合，通过兴奋性G 蛋白激活腺苷酸环化酶，使胞内cAMP 生成增多，最终增加管腔膜上的水通道，从而提高远曲小管和集合管上皮对水的通透性，增加水的重吸收而使尿量减少。总之尿的生成由神内因素和神经、体液因素共同调节的。参考文献：1、2、3、5张志雄，生理学上海科学出版社 2006.8.4、6 陈季强.基础医学教程各论 .北京科学出版社.2004，7，08.
