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1、第三章-出凝血检查,1,实 验 诊 断 学,Laboratory Diagnostics,第三章-出凝血检查,2,第一节 止血、凝血和纤溶机制 第二节 血管壁检测 第三节 血小板检测 第四节 凝血因子检测 第五节 抗凝血功能检测 第六节 纤维蛋白溶解检测 第七节 血液流变学检测 第八节 检测项目的选择和应用,第三章 血栓与止血检测,第三章-出凝血检查,3,第一节 止血、凝血和纤溶机制,第三章-出凝血检查,4,血管壁受损 神经反射 体液因素 胶原暴露 TF释放 血管收缩 血小板粘附 内源性 外源性 聚集，释放 凝血途径 凝血途径 血流减慢 血小板血栓 凝血酶 初期止血血栓 纤维蛋白沉积 二期止血
2、血栓 血管壁的止血作用,第三章-出凝血检查,5,第一节 止血、凝血和纤溶机制,一、血管壁的止血作用,二、血小板的止血作用,三、凝血因子的作用,四、抗凝系统的作用,第三章-出凝血检查,6,1.粘附功能,5.血块收缩功能,4.促凝功能,3.释放功能,2.聚集功能,二、血小板的止血作用,第一节 止血、凝血和纤溶机制,内皮下组分、vWF和GPIb,巨大血小板综合症（BBS,Fg、Ca2+、GPb/a,血小板无力症(GT,ADP、PF4,a-PF3-Ca2-a; a-PF3-Ca2-a,肌动球蛋白收缩,第三章-出凝血检查,7,第一节 止血、凝血和纤溶机制,三、凝血因子的作用,第三章-出凝血检查,8,凝血
3、机制,XII,XIIa,XI,XIa,IX,IXa,X,Xa,VII,III,PF3 Ca2,II,IIa,Fib,接触激活,Ca2+ PF3,VIIIa,Va,VIIa,传统瀑布学说,内源凝血途径,外源凝血途径,共同途径,APTT,PT,TT,Fg,第三章-出凝血检查,9,第一节 止血、凝血和纤溶机制,四、抗凝系统的作用 (the function of anticoagulation system,细胞抗凝,单核-巨噬细胞,内皮细胞,吞噬清除TF,a,FDPs ； 分泌2-MG，1-AT,摄取和灭活活化因子;分泌抗凝物质：AT-、PC系统、HC-、TFPI,合成释放PGI2、TM、AT-、
4、TFPI,抗凝血酶及肝素，HC,蛋白系统,肝细胞,体液抗凝,第三章-出凝血检查,10,血管内皮细胞合成vWF、内皮素、 6-酮前列腺素F1a 一、筛检试验 (一)出血时间(BT) (二)束臂试验（毛细血管抵抗力试验） 二、诊断试验 (一)血管性血友病因子抗原及活性测定 (二)血浆6-酮前列腺素F1a测定 (三)血浆凝血酶调节蛋白抗原测定 (四)血浆内皮素-1测定,第二节 血管壁检测,第三章-出凝血检查,11,第三节 血小板检测,一、筛检试验 (一)血小板计数 (二)血块退缩试验,二、诊断试验 (一)血小板相关Ig测定 (二)血小板粘附试验 (三)血小板聚集试验 (四)血小板P-选择素 (五)血
5、小板促凝活性测定 (六)血浆血栓烷B2测定,第三章-出凝血检查,12,一、筛检试验 (一)活化部分凝血活酶时间测定（APTT） (二)凝血时间（CT） (三)血浆凝血酶原时间测定(PT) 二、诊断试验 (一)血浆凝血因子促凝活性 (二)血浆纤维蛋白原测定（Fg） (三)血浆因子定性试验 (四)可溶性纤维蛋白单体复合物测定(sFMC,第四节 凝血因子检测,第三章-出凝血检查,13,II,Fg,液相激活,a,内源凝血途径,TF,TF Ca2+ a,外源凝血途径,共同凝血途径,瀑 布 学 说,a PF3 Ca2 a,a,Ca2,Ca2,a PF3 Ca2 a,IIa,FM,Fb,Ca2,Ca2,Ca
6、2,Ca2,血管损伤,K ,a,a,IIa,Ca2,TFPI,凝血酶原酶,PK,K,HMWK,a,a,a,固相激活,APTT,PT,TT,Fg定量,XIIIa,XIII,凝血四项,第三章-出凝血检查,14,一、病理性抗凝物质的筛检试验 (一)血浆凝血酶时间测定 (二)甲苯胺蓝纠正试验或血浆游离肝素时间测定 (三)APTT交叉试验 二、病理性抗凝物质的诊断试验 (一)狼疮抗凝物质测定 (二)抗心磷脂抗体测定 三、生理性抗凝因子测定 (一)血浆AT-活性测定（AT-:A ） (二)PC活性测定（PC:A） (三)血浆游离PS测定(FPS) (四)血浆凝血酶-抗凝血酶测定（ATA,第五节 抗凝系统检
7、测,第三章-出凝血检查,15,一、筛检试验 (一)血浆D-二聚体（D-D）定性试验 (二)血浆纤维蛋白(原)降解产物(FDP)定性试验 (三)优球蛋白溶解时间测定（ELT） 二、诊断试验 (一)血浆组织型纤溶酶原激活物(t-PA) 测定 (二)血浆纤溶酶原活性测定 (三)血浆纤溶酶原激活抑制物-1活性测定 (四)3P试验 (五)血浆纤溶酶-抗纤溶酶复合物测定 (六)血浆纤维蛋白(原)降解产物(FDP)定量测定 (七)血浆D-二聚体（D-D）定量测定,第六节 纤溶活性检测,第三章-出凝血检查,16,第七节 血液流变学检测,一）全血粘度 ：见于冠心病、心梗、高血压、脑血栓形成、DVT、糖尿病、高脂
8、血症、恶性肿瘤、肺源性心脏病、真红、MM、原发性巨球蛋白血症、烧伤等。 ：见于贫血、重度纤维蛋白原或其他凝血因子缺乏,第三章-出凝血检查,17,第七节 血液流变学检测,二）血浆粘度测定 ：见于血浆蛋白和（或）血脂增高的疾病，如糖尿病、高脂血症、MM、原发性巨球蛋白血症、动脉粥样硬化等,第三章-出凝血检查,18,1.血液凝固时间（CT）： 定义：血液离体后至凝固所需的时间 反映因子被负电荷表面激活至纤维蛋白形成，一连串酶促反应所需的时间 主要反映内源性凝血过程第一期有无异常,二、二期止血缺陷筛选实验,第三章-出凝血检查,19,1.血液凝固时间（CT）： CT延长： 血友病 血管性血友病 严重的因
9、子、减少或缺乏 纤溶亢进或抗凝物质增多,二、二期止血缺陷筛选实验,第三章-出凝血检查,20,1.血液凝固时间（CT）： CT缩短： 血栓前状态 血栓性疾病 ACT可用于体外循环肝素用量的监护指标,二、二期止血缺陷筛选实验,第三章-出凝血检查,21,2.活化部分凝血活酶时间测定（APTT） 是在抗凝的少血小板血浆中，加入足够量的活化接触因子激活剂（白陶土）和部分凝血活酶（代替血小板磷脂），再加钙以满足内源凝血的全部条件，观察血浆凝固所需时间，即APTT,二、二期止血缺陷筛选实验,检查内源性凝血更为敏感 血小板异常不影响结果,第三章-出凝血检查,22,2.活化部分凝血活酶时间测定（APTT） 参考
10、值：33.6840.32 延长10s以上即有意义,二、二期止血缺陷筛选实验,第三章-出凝血检查,23,2.活化部分凝血活酶时间测定（APTT） 临床意义：监测肝素治疗首选指标 延长： 先天性凝血因子异常：甲、乙型血友病 凝血因子缺乏：、 抗凝物或凝血因子抑制物增多：SLE,二、二期止血缺陷筛选实验,第三章-出凝血检查,24,2.活化部分凝血活酶时间测定（APTT） 临床意义：监测肝素治疗首选指标 缩短： 血栓前状态，如DIC及血栓性疾病 肝素治疗的监测：维持在正常的1.52.5倍,二、二期止血缺陷筛选实验,第三章-出凝血检查,25,3.血浆凝血酶原时间测定（PT） 被检血浆中加入组织凝血活酶（
11、组织因子）和Ca2+，观察血浆凝固所需的时间 检测外源性凝血系统的筛选试验 反映因子、X、V、I的水平,二、二期止血缺陷筛选实验,第三章-出凝血检查,26,3.血浆凝血酶原时间测定（PT） 参考值: PT:1113s; 正常对照3s以上有意义 凝血酶原时间比值(PTR):10.15 PTR=受检者PT/正常对照PT(秒,二、二期止血缺陷筛选实验,第三章-出凝血检查,27,3.血浆凝血酶原时间测定（PT） 参考值: PT:1113s; 正常对照3s以上有意义 凝血酶原时间比值(PTR):10.15 PTR=受检者PT/正常对照PT(秒) 国际标准化比值 (INR,二、二期止血缺陷筛选实验,1.0
12、1.5最佳,第三章-出凝血检查,28,3.血浆凝血酶原时间测定（PT） 临床意义: 延长：凝血因子、V、X 缺乏如严重肝病、VitK缺乏、纤溶亢进 缩短：先天性因子V增多，高凝状态及血栓性疾病 监测口服抗凝剂治疗的首选指标,二、二期止血缺陷筛选实验,第三章-出凝血检查,29,优球蛋白溶解时间测定（ELT） 血清（浆）纤维蛋白（原）降解产物（FDP）测定 血浆D-二聚体（D-D）测定,三、纤溶活性增强筛选实验,第三章-出凝血检查,30,1.优球蛋白溶解时间测定（ELT） 包括血浆纤维蛋白原、纤溶酶原和纤溶酶原激活物 在酸性(pH4.5)低离子强度溶液中可被沉淀，并溶解于缓冲液中 当加入钙或凝血酶
13、使其凝固后，在37下观察凝块完全溶解的时间，即为ELT,三、纤溶活性增强筛选实验,第三章-出凝血检查,31,1.优球蛋白溶解时间测定（ELT） 参考值： 加钙法：129.841.1 min 加酶法：157.559.1 min,三、纤溶活性增强筛选实验,第三章-出凝血检查,32,1.优球蛋白溶解时间测定（ELT） 临床意义： 延长：纤溶活性减低，如血栓前状态、应用抗纤溶药物 缩短：短于70min说明纤溶活性增强，原发性或继发性纤溶亢进(DIC,三、纤溶活性增强筛选实验,第三章-出凝血检查,33,2.血清（浆）纤维蛋白（原）降解产物（FDP）测定 血浆FDP可与FDP抗体发生肉眼可见的凝集反应 参
14、考值：ELISA法 血浆 5 mg/L; 血清 10 mg/L,三、纤溶活性增强筛选实验,第三章-出凝血检查,34,2.血清（浆）纤维蛋白（原）降解产物（FDP）测定 临床意义: 轻度增高（1040 mg/L）： 急性静脉血栓形成、急性心梗、手术后 明显增高（40 mg/L）： DIC、原发性纤溶亢进、急性早幼粒细胞白血病,三、纤溶活性增强筛选实验,第三章-出凝血检查,35,3.血浆D-二聚体（D-D）测定 是FDP的成分，继发性纤溶亢进的标志 参考值:ELISA法 0.4g/L 临床意义： 增高：(1)DIC、血栓形成 (2)溶栓治疗有效的指标,三、纤溶活性增强筛选实验,第三章-出凝血检查,
15、36,出血性疾病的诊断 一期止血缺陷筛选实验的应用 二期止血缺陷筛选实验的应用 纤溶活性亢进筛选实验的应用,第八节 实验项目的选择和应用,第三章-出凝血检查,37,1.一期止血缺陷筛选实验的应用 BT N、PLT N：正常人、单纯性紫癜、过敏性紫癜 BT、PLT：原发性或继发性血小板减少性紫癜 BT、PLT：原发性或继发性血小板增多症 BT、PLT N：血小板功能异常、vWD 低(无)纤维蛋白血症,第八节 实验项目的选择和应用,第三章-出凝血检查,38,2.二期止血缺陷筛选实验的应用 APTT N、PT N：正常人、因子X缺乏症 APTT、PT N：血友病、缺乏症 APTT N、PT：因子、X
16、缺乏症 APTT、PT：因子X、V、I缺乏症,第八节 实验项目的选择和应用,第三章-出凝血检查,39,3.纤溶活性亢进筛选实验的应用 FDP N、D-D N：纤溶活性正常 FDP阳性、D-D阳性：继发性纤溶，如DIC FDP阳性、D-D阴性：原发性纤溶、多为FDP假阳性 FDP阴性、D-D阳性：继发性纤溶、多为FDP假阴性,第八节 实验项目的选择和应用,第三章-出凝血检查,40,凝血机制,XII,XIIa,XI,XIa,IX,IXa,X,Xa,VII,III,PF3 Ca2,II,IIa,Fib,接触激活,Ca2+ PF3,VIIIa,Va,VIIa,传统瀑布学说,内源凝血途径,外源凝血途径,共同途径,APTT,PT,TT,Fg
