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1、临床医学检验考试辅导微生物检验 第 1 页需氧或兼性厌氧革兰阳性杆菌及检验 考点棒状杆菌属（白喉棒状杆菌）、炭疽芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、产单核李斯特菌生物学性状临床意义微生物学检查【内容讲解】需氧革兰阳性杆菌： 棒状杆菌属 芽胞杆菌属 李斯特菌属 丹毒丝菌属 加特纳菌属形态 棒状 杆菌有芽胞 短杆、链或丝状 细杆或线状 杆菌、多形性触酶 动力 对氧 需、兼 需、兼 兼性 兼性 兼性GCmol% 5165 3260 3638 3540 4244一、棒状杆菌属G +，杆菌，菌体粗细、长短不一，一端或两端膨大呈棒状。着色不匀，有异染颗粒。无鞭毛、无荚膜、无芽胞。需氧，营养要求较高。引起人类致病的主要
2、是白喉棒状杆菌，其他大多数为条件致病菌。（一）白喉棒状杆菌1.生物学性状（1）形态与染色：菌体细长微弯，一端或两端膨大的革兰阳性杆菌。细菌排列呈散在 L、V、Y 字形及不规则栅栏状。无荚膜、无芽胞、无鞭毛、无菌毛。异染颗粒：Neisser（奈瑟）染色；Albert（阿培特）染色。这是白喉棒状杆菌的形态学特征，对鉴别细菌有重要意义。异染颗粒（浓染颗粒）Neisser（奈瑟）染色：菌体染成黄褐色，颗粒被染成紫黑色；Albert（阿培特）染色：菌体呈蓝绿色，异染颗粒蓝黑色。临床医学检验考试辅导微生物检验 第 2 页（2）培养特性：在普通培养基上生长不良，形态不典型。1）血液琼脂平板：灰白色 S 型菌
3、落，有狭窄的 溶血环。2）吕氏（Loeffler）血清斜面培养基：生长迅速，形成灰白色、湿润、S 型菌落。涂片染色形态典型，异染颗粒明显。3）亚碲酸钾血琼脂：本菌能吸收亚碲酸盐，并使其还原为元素碲，使菌落呈黑色。4）液体培养基。（3）生化反应：触酶试验阳性，氧化酶试验阴性。分解葡萄糖、麦芽糖、果糖、半乳糖，产酸不产气。不分解乳糖，极少分解蔗糖。能还原硝酸盐，不液化明胶，不产生吲哚，不分解尿素。据亚碲酸钾血琼脂培养基、肉汤培养基的生长特点及生化反应，可将本菌分为轻、中、重三型。在我国以轻型多见。分型与所致疾病的严重程度无关，可用于流行病学调查。2.致病性致病物质：白喉棒状杆菌引起白喉，多在秋冬季
4、节流行。以咽白喉最常见，喉白喉及鼻白喉次之，偶亦引起眼结膜、外耳道、阴道及皮肤的局部病变。本菌一般不侵入血流，但其产生的大量外毒素可吸收入血，引起毒血症。毒素能与敏感的心肌、肝、肾、肾上腺等组织细胞及外周神经，尤其与支配咽肌和腭肌的神经结合，引起细胞变性、坏死、内脏出血和神经麻痹等严重损害，是白喉晚期死亡的主要原因。免疫性：白喉的免疫主要是抗毒素免疫，同时巨噬细胞吞噬消化能力也加强。临床医学检验考试辅导微生物检验 第 3 页调查人群在感染或计划免疫后对白喉是否产生免疫力，可用锡克试验或致敏红细胞凝集试验。3.微生物学检验（1）标本采集：无菌长棉拭子，从可疑的伪膜边缘采集分泌物，未见伪膜的疑似。
5、患者或带菌者可采集鼻咽部或扁桃体黏膜上的分泌物。（2）检验方法及鉴定生长情况： 吕氏血清斜面培养基 亚碲酸钾血琼脂平板 报告 可疑 （72h 后）（3）生化反应：主要用于鉴别白喉棒状杆菌与类白喉棒状杆菌。尿素分解试验：白喉棒状杆菌（-），类白喉棒状杆菌（+）。（4）毒力试验：可作为鉴定致病菌株的重要依据。体外法：Elek 平板毒力测定、SPA 协同凝集试验、对流免疫电泳。体内法：可用豚鼠作毒素中和试验。（5）临床意义：白喉杆菌的致病因素为白喉外毒素，抗原性强，毒性剧烈。K 抗原（表面抗原）及索状因子亦与其致病力有关。引起的白喉是一种急性呼吸道传染病。白喉的免疫主要是抗毒素免疫。白喉棒状杆菌可引
6、起人类白喉，白喉是一种急性呼吸道传染病，该病原菌存在于患者及带菌者的鼻咽腔中，随飞沫或污染的物品传播。白喉棒状杆菌可致气管、支气管假膜，是白喉早期死亡的主要原因，其产生的外毒素也经血液与易感组织结合，出现各种症状如心肌炎、软腭麻痹等，是白喉晚期死亡的主要原因。（6）治疗原则：用青霉素或红霉素等进行抗感染治疗，同时应尽早注射足量白喉抗毒素。注射抗毒素前，应做皮试。（二）其他棒状杆菌棒状杆菌除白喉棒状杆菌外，其余统称为类白喉棒状杆菌。一般无致病性或仅能与其他化脓细菌产生混合感染，有的可能为条件致病菌。类白喉棒状杆菌常寄生于人类或动物鼻腔、咽喉、外耳道、眼结膜、外阴及皮肤表面等处。临床医学检验考试辅
7、导微生物检验 第 4 页二、芽胞杆菌属有芽胞的革兰阳性大杆菌。大多数菌种在有氧环境下形成芽胞。有动力，非抗酸性。需氧或兼性厌氧菌，在普通培养基上生长良好。炭疽杆菌是人畜共患的重要致病菌，蜡样芽胞杆菌能致食物中毒。（一）炭疽芽胞杆菌人畜共患的急性传染病。1.生物学特性（1）形态与染色：致病菌中最大的革兰阳性杆菌，两端齐平，呈竹节状。在组织内生长呈单个或短链，试管内可形成长链。无鞭毛，机体内或含血清培养基上可形成荚膜。人工培养或在外界环境中易产生芽胞，形状椭圆，位于菌体中央，其直径小于菌体。（2）培养特性：专性需氧。普通琼脂平板：形成灰白色、不透明、无光泽、边缘不整齐、大而扁平的粗糙型菌落，在低倍
8、镜下观察，呈卷发状。血液琼脂平板：出现轻微溶血。普通肉汤：管底有絮状卷绕成团的沉淀物生长，表面稍混但不形成菌膜，中层肉汤清亮。碳酸氢钠琼脂平板：有毒株-形成黏稠、有光泽的黏液型（M 型）菌落，这是有荚膜的菌体构成的。无毒株-粗糙型（R 型）。（3）生化反应：分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖，产酸不产气，不分解乳糖。不产生靛基质及 H2S。能迟缓液化明胶，沿穿刺线向四周扩散，形如倒松树状。（4）抗原构造：菌体多糖抗原；荚膜多肽抗原；芽胞抗原；炭疽毒素抗原。（5）本菌芽胞体抵抗力很强，在干燥土壤或皮毛中常温下可存活数十年。一般对碘及氧化剂较敏感。2.致病性：毒力因子：荚膜和炭疽毒素。炭疽毒素是致死的主要因
9、素。所致疾病：皮肤炭疽、肺炭疽、肠炭疽，病死率很高。免疫性：病后可获得持久性免疫力，再感染者少见。3.微生物检验临床医学检验考试辅导微生物检验 第 5 页（二）蜡样芽胞杆菌1.生物学性状G +大杆菌，呈链状排列，芽胞位于菌体中心或次末端不突出菌体。引起食物中毒的菌株多为周毛菌，不形成荚膜。营养要求不高，菌落较大，表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状。2.临床意义大量的蜡样杆菌污染（10 610 8/g）可致食物中毒，有腹泻型与呕吐型之分。3.微生物检验除作分离培养外，细菌计数对本菌所致食物中毒有诊断价值。三、产单核李斯特菌（一）生物学特性1.形态染色：菌体短小大小，常呈 V 字形或成对排列，偶呈丝状。有
10、鞭毛、无芽胞，20有动力，37动力缓慢，一般不形成荚膜。幼龄菌呈革兰阳性，陈旧培养物多转为革兰阴性。2.培养特性：需氧或兼性厌氧，营养要求不高。血琼脂平板：形成小而透明的 S 型菌落，有狭窄的 溶血环。因其能生长于 4，故可进行冷增菌。半固体培养基：出现倒伞形生长。3.生化反应不发酵甘露醇和木糖，硝酸盐还原阴性，CAMP 阳性。可发酵多种糖类，触酶阳性，不形成吲哚，不分解尿素，能水解七叶苷。4.根据菌体及鞭毛抗原的不同，可分 4 个血清型。5.本菌耐碱不耐酸。对热较为敏感，加热 50 10 分钟可死亡。（二）致病性致病物质主要是溶血素和菌体表面成分。临床医学检验考试辅导微生物检验 第 6 页由
11、带菌动物或人粪便污染动物制品，而经口感染。通过胎盘或产道感染新生儿是本病的重要特点。宫内感染常可导致流产、死胎及新生儿败血症，死亡率较高。本菌常伴随 EB 病毒引起传染性单核细胞增多症，此外可引起脑膜炎。机体主要靠细胞免疫功能清除本菌。（三）微生物检验1.标本采集根据感染部位不同而采取相应标本。2.检验方法与鉴定（1）分离培养：将标本接种两支脑心浸液培养基中。分别置 37和 4培养。转种血平板上。从血平板上挑取 溶血环的菌落，做涂片染色镜检并进一步鉴定。（2）鉴定：在血琼脂上有狭窄的 溶血环，25动力最强，在半固体培养基上呈伞状生长，可在 4冷增菌生长，木糖、甘露醇和 H2S 阴性。CAMP（
12、与金黄色葡萄球菌协同溶血）阳性。触酶阳性。四、丹毒丝菌属红斑丹毒丝菌为革兰阳性杆菌，单个存在或形成短链。无芽胞、无鞭毛、无荚膜。厌氧或微需氧菌，初次分离要在厌氧环境中培养。血琼脂平板形成两种菌落：光滑型菌落-细小、圆形、突起有光泽；粗糙型菌落-大，表面呈颗粒状。触酶试验阴性。48 小时发酵葡萄糖、乳糖，产酸不产气。对湿热及化学消毒剂敏感。红斑丹毒丝菌引起红丹毒丝病，感染局部的皮肤发红、肿胀、疼痛、或有痒感。也可引起急性败血症或心内膜炎。本菌对青霉素、头孢菌素、红霉素和四环素等药敏感。五、阴道加特纳菌引起非淋菌性阴道炎的主要病原菌之一。新鲜标本分离菌株趋向革兰染色阳性，保存菌株趋向革兰染色阴性。
13、本菌无芽胞、无荚膜、无鞭毛，多形性。营养要求较高，在 5%人血平板上，在 3%5%C0 2、可形成针尖大小菌落，在人血和兔血平板上可出现 溶血环。对氨苄西林、羧苄西林、苯唑西林、青霉素、万古霉素和甲硝唑敏感。对萘啶酸、新霉素、粘菌素和磺胺嘧啶耐药。【例题】疑为白喉患者的最佳取材部位为A.血液B.淋巴液C.假膜深处D.假膜表面E.假膜边缘答疑编号 502389180101【正确答案】E临床医学检验考试辅导微生物检验 第 7 页【例题】具有异染颗粒的细菌是A.布鲁菌B.破伤风梭菌C.白喉棒状杆菌D.结核分枝杆菌E.脑膜炎奈瑟菌答疑编号 502389180102【正确答案】C【例题】调查人群对白喉有
14、无抵抗力，可采用A.Elek 平板毒力试验B.外斐试验C.锡克试验D.狄克试验E.肥达试验答疑编号 502389180103【正确答案】C【例题】白喉患者的特异性治疗，应选择A.适量输血B.大量输血C.足量抗生素D.适量类毒素E.早期足量抗毒素答疑编号 502389180104【正确答案】E【例题】青霉素串珠试验阳性的细菌是A.破伤风梭菌B.肉毒梭菌C.产气荚膜梭菌D.炭疽芽孢杆菌E.白喉棒状杆菌答疑编号 502389180105【正确答案】D【例题】下列既有荚膜又有芽胞的细菌是临床医学检验考试辅导微生物检验 第 8 页A.伤寒沙门菌B.铜绿假单胞菌C.炭疽芽胞杆菌D.脂肪芽孢杆菌E.蜡样芽孢杆菌答疑编号 502389180106【正确答案】C本章小结：一、白喉棒状杆菌二、炭疽芽胞杆菌三、产单核李斯特菌、红斑丹毒丝菌、阴道加特纳菌
