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1、麻栎体细胞胚胎发生与快速繁殖技术研究麻栎( Quercus acutissimaCarr. )既是重要的造林树种,也是经济价值很高的树种。本文综述了国内外栎属植物体胚发生和快速繁殖方面的研究现状,探索了麻栎快速繁殖技术新途径。以麻栎种子、 成熟合子胚、 幼苗茎叶组织和成年植株茎段为外植体,对麻栎体胚发生和快速繁殖技术进行了研究和探讨。成功获得了大量麻栎体胚, 建立了麻栎体胚发生技术体系,为栎属植物体胚发生提供了重要参考。主要结论如下:( 1)麻栎成熟合子胚体胚诱导最适培养基为MS+IBA(1.0mgL-1)+6-BA ( 1.0mg L-1 ) +谷氨酰胺 (1.0g L-1)+ 脯氨酸(0.
2、5g L-1),诱导率达到 70.0%;最适的成熟培养基为1/2MS+IBA(0.5mg L-1)+6-BA(2mg L-1)+ABA(2mgL-1 )+谷氨酰胺( 4g L-1 ) +脯氨酸 (2g L-1);经 4冷处理后,培养基1/2MS+6-BA(0.2mg L-1)+ 山梨醇( 10g L-1 )萌发效果最佳。(2)麻栎幼苗茎、叶外植体体胚诱导最适培养基为MS+TDZ(0.1m g L-1)+谷氨酰胺 (1g L-1)+脯氨酸 (0.6g L-1)+IBA(1.0mgL-1)+6-BA(1.0m g L-1);在 1/2MS+6-BA(2.0mgL-1)+IBA(0.5mgL-1)+
3、ABA(2mg L-1)+ 谷氨酰胺 (4g L-1)+ 脯氨酸( 2g L-1 )培养基中,观察到体胚由白色或淡黄色逐渐转为绿色,呈颗粒球状,但没有观察到心形胚或鱼雷胚。(3)麻栎成熟植株茎段体胚诱导最适培养基为MS+TDZ(0.1m gL-1)+ 谷氨酰胺 (1g L-1)+脯氨酸 (0.6gL-1)+IBA(0.5mgL-1)+6-BA(2.0mg L-1) ;最适成熟培养基为1/2MS+IBA(0.5mg L-1)+6-BA(2.0mgL-1)+ABA(2mg L-1)+ 谷氨酰胺 (4g L-1)+脯氨酸 (2g L-1);未见体胚萌发,可能由于外植体存在生理老化现象。(4)麻栎体胚
4、发生经历球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚阶段,成熟体胚和愈伤组织结合较松散, 容易分离或自行脱落, 分化出胚芽和胚根, 独立形成完整小植株。观察结果表明, 麻栎体胚具有明显的两极性和相对独立性,这两点完全符合判断体胚的两个重要特征。因此,本研究成功建立了麻栎体胚发生体系。(5)麻栎种子外植体芽增殖最适培养基为MS+IBA(0.1mgL-1)+6-BA (4.0mg L-1);壮苗培养基 MS+IBA(0.1mgL-1)+ 水解酪蛋白 (1.5g L-1)。麻栎幼苗茎段外植体最适芽诱导培养基为MS+IBA(1.0mg L-1)+6-BA(3.0m gL-1) 。麻栎成熟茎段外植体最适芽诱导培养基为MS+IBA(1.0mgL-1)+6-BA(3.0mg L-1)。