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1、广东省临床基因扩增检验实验室技术人员理论培训班理论考试卷一， 填空（每题2分，共20分）1. DNA双螺旋中两条链走向是 反向 平行的，即一股链是 53 走向，另一股链为 35 走向；生物合成方向是 53 。2. 在极端的PH值或受热条件下，核酸分子中的 氢键 断裂， 双螺旋 结构解开，即为核酸变性。3. 核酸分子的杂交其实就是DNA 变性 、 复性 原理的应用。4. PCR扩增的三个基本阶段是 变性 、 退火 、 延伸 ，引物与模板的结合发生在 退火 阶段5. 反转录酶催化的DNA合成反应按 53 方向进行，在DNA合成时也需要引物，引物为病毒颗粒中的 mRNA 。6. PCR测定中的“假阳
2、性”的最主要的来源是 PCR产物 的污染。7. 请填出以下各种微量移液器可取溶液的体积范围P10 0.5-10ul P20 2-20ul P100 20-100ul P200 50-200ul 如需吸取100ul液体，则最好使用 P100 加样器。8. 在基因扩增检验中，使用的带滤塞吸头吸加液体，只要是为了 防止标本间交叉污染 。9. TapMan荧光PCR测定原理中的关键点在于利用了Tap酶的 53 的外切酶活性，Ct值指的是 每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数 。10. 个体化医学的全面定义： 分为疾病风险预测（基因检测）和个体化治疗（基因检测）两个方面，基因预测疾病风险是
3、指根据每个人的疾病基因组信息预测疾病的发生风险。个体化治疗是指根据每个人的疾病基因组信息对已发生的疾病进行治疗 。二， 是非题（正确的后面打，错误的后面打，并将错误处划线并改正，每题两分，未改正得1分，共20分）1. DNA双链中，碱基对总是A-T ,C-G配伍，其间以两个氢键相连。（） G-C间以三个氢键相连 2. 使用有防“污染”作用的UNG的PCR试剂盒，PCR实验室就不必严格分区。（） UNG酶只对低浓度的产物污染有效 3. 在全血、骨髓标本的采集时，可使用EDTA、枸缘酸钠或肝素抗凝。（）不能使用肝素抗凝 4. 血清HBeAg的存在是HBV感染及感染程度的确证标志。（）HBeAg是病
4、毒复制的标志 5. 在PCR试剂盒中所使用的UTP与天然RNA分子中的U没什么区别。（）6. 基因扩增检验实验室“可移动紫外灯”的作用主要是便于实验室台面的消毒杀菌。（）7. 定量PCR与定性PCR测定原理的最主要区别点在于前者的测定点在PCR的指数扩增期，而后者多为扩增平台期。（）8. 加样器只要在其量程范围内，其吸液准确度均相同。（）不同规格的加样器之间准确度不同 9. 室内质量控制（IQC）监测和控制的是实验室测定的精密度（重复性），而室间质量评价则通过不同的实验室测定结果的比对而评价实验室测定的准确度。（）10. 临床检验中的系统误差通常表现为质控物测定SD的增大。（）三， 选择题（每
5、题2分，共20分）1. 在核酸提取时，常需使用氯化钠、醋酸钠等盐溶液，其目的是：（A）A 中和核酸的负离子，使其易于沉淀 B 调节PH值 C 保证核酸的完整性 D无特定目的2. 临床上使用核酸扩增方法诊断沙眼衣原体感染，在标本收集上最为关键的是：（B ）A 标本的采取方式 B标本的保存方式 C标本的运送方式 D标本采取的时间3. 之所以要将基因扩增检验实验室的产物分析区设置为负压状态，目的是：（B）A 防止生物传染危险物的逸出 B 防止扩增产物从该区进入上游区域C 防止该区灰尘的逸出 D 无特殊目的4. 核酸探针的标志性特征是：（D）A一小段已知序列的单链核酸 B 一小段未知序列的单链核酸C
6、一小段已知序列的双链核酸 D 有同位素或非同位素标记物5. 核酸提取纯化中，RNase最主要的潜在污染源是：（D）A 实验室环境 B 实验用品如吸头、离心管等 C实验人员的手 D 以上A和B6. PCR方法检测病原微生物所扩增的区段，一般为：（B）A 整个病原体基因组 B 病原体基因组内的保守区域 C 病原体基因组内的任一区域 D 以上都不是7. 无创产前基因诊断为胎儿做出基因检测，需从孕妇外周血中分离获取及少量的：（B）A 孕妇有核红细胞 B 胎儿有核红细胞 C 白细胞 D 以上均可8. 临床PCR测定的重复性不好的原因如下，但除外：（B）A 试剂盒核酸提取方法对扩增抑制物去除不干净 B标准
7、品浓度不准C 核酸扩增仪空间温度不均 D 加样重复性差9. 有关于动力学定量PCR方法中对扩增效率的测定，下述哪一条是错误的：（B）A 必须在扩增的指数期内测定 B 可在扩增的任何阶段进行C 与扩增产物的测定有关 D 尽可能多选几个测定点10. 临床基因扩增检验的室内质量控制与通常的临床定性免疫测定IQC的最大不同在于：（D）A 弱阳性质控血清的设置 B强阳性质控血清的设置 C阴性质控血清的设置 D 以上均是四， 问答题（40分）1. 有一基因扩增检验实验室在检测临床血清标本HCV RNA时，以HCV扩增片段的cDNA为标准品，检测结果除了试剂盒所带的cDNA标准品为阳性外，所有临床标本及弱阳
8、性质控原血清样本、阳性质控样本均为阳性，并且阳性强度都较为接近。显然该次RT-PCR扩增检测存在问题。那么，你能帮助该实验室分析一下可能的检测失败的原因吗？并设计一个相应的验证试验证实。（20分）2. 今有一传染病医院为监测肝炎病人抗病毒治疗效果，现有一间面积为50平方米的房间，想建立一个临床基因扩增检验实验室开展HBV DNA和HCV RNA检测项目，经向有关专家咨询，专家建议其按卫生部要求将实验室分为三个区(图示如下)，选用荧光PCR方法，仪器设备按要求配备，可选用有SDA批准的荧光PCR试剂盒，你认为该专家的实验室设置有无原则性问题，对临床实际检测工作是否方便？如否，则请指出可能会有那些
9、不方便？要是向你咨询，你会如何建议？（请将你设计的实验时设置画出）（20分）不方面，此设计进入样本制备区一定要通过试剂准备区，容易增加污染的风险，且缓冲间的设计也不合理，违背了PCR实验室设计中“各区独立，方便工作”等原则。我的设计如下：平时考试注意事项一 以平常心态考试会发挥得更好。紧张时，闭眼，静一静。二 考前不给自己定科目考试分数目标会考得更好。三 审题要仔细要审完关键字要标识能减少失误四 遇到3-4分钟没思路的题可暂时放弃，演算很复杂的题可等容易简单的题做完后再做，切不可在一道题上消耗过多的宝贵时间。五 解题时只专心在本题上会大大提高正确率，一心二用易失误。六 以中等速度解题争取做一题
10、对一题，做对比做完重要一万倍。七 会的题要保证全对，中档题要争取全对，不会的题争取不交白卷。低档题和中档题全做对就能考上一本！八 力争一次做对，不要指望有时间检查和修改。九 整洁清爽的卷面，正确的书写，会赢得改卷老师的欢喜。十 解题时要由易到难，尤其是理综卷可看成是一门课。容易的题先做，拿到了基本分，心踏实了，反而会发挥得更好。十一 解题推演要一步一步地推，跳步骤可能导致失误丢分。十二 草稿纸演算标题号，书写要整齐，以便查错方便。十三 考过的科目不要再去想它，一门心思准备后面的考试。十四 晚上要早点休息，保证以最佳状态参加考试。十五 考试要带的东西要头天晚上准备好，以免遗漏，并放在最瞩目的地方
11、。十六 考试前一天晚上把考试格言认真读一遍。高考和平时考试并无二样，所不同的只是高考内容广泛且综合，囊括了小学，初中，高中所学知识。高考主要考核每个考生十二年来所学知识的全面性，灵活性和解题能力。统计过去历次高考情况，试题难易程度分配率大致排比为3:5:2，即一般难度的大约三成，中等难度的大约占五成，难度大点的所谓提高题约占二成。由此可见，只要能把中等难度以前的分数全都拿到，总分应该稳得600分。如果提高题再能拿到30%应有的分数，那总分就可得640650分了。所以一定要有信心和决心，不要被高考所吓倒。当然对待每道具体试题，还一定要认真细心，不能有丝毫马虎大意才行。接到试卷后不要急着答题，先简
12、略的浏览下卷间的篇幅及夹层面或背面有无试题（防止答漏题）以及试卷的说明和要求（或注意事项）。还要留意答案的相应位置。审题和解题应是同步进行的，每道题在解题前都必须用几秒到几十秒的时间先认真思考一下试题的意义和要解答的问题以及如何去解答。审题要注意试题里关键词和字的意义，特制一些棱模两可的词和字一定要区分清楚。有时一遍弄不懂的就要两遍三遍，知道弄懂题意后再动笔作答。审题要集中思想，专心致志，不要一心挂两头，瞻前顾后，分散精力，打乱思维。思考到那一题就好像全张试卷就只有这么一题。其他试卷题全都不存在似地。总之，思考试题时精力一定要高度集中，千万不可以思考了这一题又惦记着那一题。也不要怕审题耽误时间
13、，常言道磨刀不误砍柴工。题审好答案明朗了，下笔要流利些，顺当些，时间省在里面不说，更重要的是避免了不必要的失分。解题次序应自第一题起向后依次逐题解答。这一题解答结束了才能解答下一题，不能跳（挑）题或选题等乱解一通。这样容易出现答乱题或者在解这一题时大脑还同时想着那一题的混乱现象，最容易出差错。所以解题时为了集中思维，有秩序的解答，一定要按试题的顺序一题一题的解下去。这样才能避免精力分散，思维混乱，甚至答题张冠李戴等现象。解题时如遇到难度较大且繁杂，花费时间较多的试题或答到中途后面感觉棘手甚至答不下去的试题，可先暂放一下（记准要在答题处留足够多的答题位置）待试题解光后剩有时间的话再回头继续认真的
14、去解，总之，不要被难题繁杂题耽误太多时间。作文主要是要审好作文题，固作文分数多，写走了题失分也多。所以在动笔写文章前一定要先审好作文题。根据所给条件弄清楚要怎么写，写些什么，写什么体裁。必要时（时间许可）可将主题思想，分段及段落大意拟出来。所以作文的审题及准备工作费时较多。只有将主题思想扣准了，才能写出切入主题思想的文章，这才能得高分。选择题，改正题或只在答案里填写编号等一类试题，不仅要认真审题，而且还要一词一字地细细推敲，正确理解试题要表达什么意义，有时还要将待选的词或字代入试题，看选用哪个词或字去使试题的意义更完善，更恰当，这就是要选的正确答案。数理化的数字答案如不给计算器计算的话，就一定
15、要在草稿纸上用笔算计算出来再填到答案里。千万不能图省事心算来计算数学答案，这很容易算错或记错。所有试卷的卷面都要整洁，字迹要清晰，让阅卷人看的清楚舒服。尤其语文卷（包括作文）的卷面更要整洁，字迹更清晰工整，标点符号准确，少用错别字，潦草字或缺胳膊少腿的字。做好的试题不能轻易改动。整个试卷都解完了，如果还剩有时间只能用来解暂时丢来下未完成。其他已做好的试题不能轻易重审，更不能轻易的改动。因为试卷做完了，大多数人都认为任务完成了，万事大吉了，昏昏然了，思想马上就放松了。这时再回头看试题，眼睛都模糊了，字也看不清了，头脑好像被东西遮住似的，迷迷糊糊的。这样不经意的随便动笔，很容易让原来做对的题改错了，好好的得分题被改成失分题。所以一定要记住，千万千万不能将已做好的试题随意重新审查，随随便便改动。只能用这剩余时间重新审查丢下来未解或解完的试题以及确有把握确实做错的试题。就是这样子也不要急于动笔，可光将眼睛闭一会，让大脑稍事休息会，然后再重新振作精神，再通过认真审题，
