《亚精胺对淹水胁迫下玉米幼苗根系抗氧化代谢调控》由会员分享,可在线阅读,更多相关《亚精胺对淹水胁迫下玉米幼苗根系抗氧化代谢调控(10页珍藏版)》请在金锄头文库上搜索。
1、-范文最新推荐-1 / 10亚精胺对淹水胁迫下玉米幼苗根系抗氧化代谢调控摘 要:为了探讨亚精胺对淹水胁迫下玉米幼苗根系的抗氧化代谢调控机制,本实验以“郑单958” (耐淹水能力弱)和“ 浚单22”(耐淹水能力强)为材料,研究了在淹水胁迫下,亚精胺对玉米幼苗根系中抗氧化代谢酶活性及代谢产物含量的影响。结果表明:在正常生长情况下,两个品种的玉米幼苗根系中抗氧化代谢酶活性及代谢产物含量变化不明显;经过淹水处理,玉米幼苗根部的过氧化氢酶(CAT)活性,超氧化物歧化酶(SOD)活性,抗坏血酸氧化酶( APX)活性,过氧化物酶(POD)活性均下降,超氧阴离子
2、(O2-) 产生速率加快,植株生长发育受到影响;而外源亚精胺(Spd )处理后,玉米幼苗 CAT、SOD 、APX、POD活性增加,O2-产生速率降低。这些结果表明,亚精胺能通过增加玉米幼苗根部抗氧化酶的活性缓解淹水胁迫对玉米幼苗的伤害,从而促进玉米幼苗的生长。关键词:亚精胺;玉米幼苗;抗氧化代谢;淹水胁迫7539Regulation of Spermidine on Antioxidant Metabolism of Maize Seedling Roots under Waterlogging StressAbstract: In order to explore the regulati
3、on mechanism of spermidine on antioxidant metabolism of maize seedling roots under waterlogging stress, taking Zhengdan 958 (weaker anti -flood) and Xundan 22 (stronger anti-flood) as materials, this paper was carried out to study the effects of exogenous spermidine(Spd) on the activity of antioxida
4、nt enzymes and the content of metabolites of maize seedlings under waterlogging stress. Results are as follows: the activities of catalase (CAT),superoxide dismutase(SOD), ascorbic acid oxidase (APX) , peroxidase (POD) and the content of metabolites of maize seedling roots had no obvious change unde
5、r normal condition; under waterlogging stress, the activities of CAT, SOD, APX, and POD decreased and superoxide anion (O2-) generation rate increased . However, after treatment with spermidine, the activities of CAT, SOD, APX and POD increased and -范文最新推荐-3 / 10superoxide anion generation rate decr
6、eased in Maize seedling roots. The results showed that Spd could relieve the injury of waterlogging stress on maize seedlings via increasing the activity of antioxidase of maize seedling root, and promote the growth of maize seedlings. 亚精胺(Spd) 在缓解逆境伤害的方面有着重要作用6。Spd 不仅可以直接作为胁迫保护物质, 还可以作为胁迫信号传导中的信号分子
7、,构建抗胁迫机制6。外源Spd 还具有提高植物抵御干旱和高、低温伤害等的能力, 外施 Spd 可以提高玉米、小麦等植物的抗盐性和抗逆能力7。然而, 亚精胺对缓解作物涝逆境伤害的研究还鲜见报道。本试验通过在淹水胁迫下的玉米幼苗喷施 Spd,探究 Spd 对淹水胁迫下玉米幼苗根系抗氧化代谢的影响,进而探索 Spd 调控淹水胁迫下玉米幼苗根系抗氧化代谢的机理。以期明确涝胁迫对玉米根系抗氧化活性的抑制效应和外源 Spd 对其伤害的调控能力, 为玉米的涝灾害缓解技术研发提供理论依据。1.材料与方法1.1 供试材料用大塑料杯子种植浚单 22,郑单 958,吉祥一品,豫玉 23 四个玉米品种,在其长到三叶一
8、心时进行淹水处理,观察玉米幼苗的生长情况,记录黄叶率和叶片死亡率,选出最早死亡的品种和最晚死亡的品种,通过比较选出了浚单 22 是耐涝型品种,郑单 958 是不耐涝型品种,本实验以这两个品种作为实验材料(实验材料品种的筛选是在杜红阳老师课题组下完成的) 。1.2 材料处理精选饱满的郑单 958 和浚单 22 玉米种子各 360 粒,均匀播在底部有孔、装有粗沙的大塑料盆中(每盆15 粒) ,上面再覆上一层 1-2cm 的粗砂,放在温室中培养。待玉米幼苗长到三叶一心时定苗每盆 10 株(去除弱苗) ,共 36 盆,均分为 A、B、C 三组,A组用 Hoagland 营养液培养,同时叶面喷施清水;B
9、-范文最新推荐-5 / 10组用 Hoagland 营养液培养的同时加水至液面高于沙面 2cm 为宜,同时叶面喷施清水;C 组用含有亚精胺(1mmol/L)Hoagland 营养液培养的同时加水至液面高于沙面 2cm 为宜,同时叶面喷施 1mmol/L 的亚精胺。培养 0、2、4、6 天后分取 A、B 、C 组玉米幼苗根部作为实验材料。 FW: 样品鲜重(g ) ;0.1:OD240 每下降 0.1 为 1 个酶活力单位(U) ;T:加过氧化氢到最后一次读数的时间(min) 。1.4 超氧化物岐化酶(SOD)活性的测定按刘萍、李明军的比色法测定 SOD 活性9。具体方法: 1.4.1 酶液的制
10、备 :称取玉米根部 0.5g 剪碎,置于研钵(预冷)中,加入 5mL 预冷的 50mmol/L(pH7.8)磷酸缓冲溶液(分多次加入) ,在冰浴下研磨成匀浆后,置于3000r/min 离心 10min(24) 。上清液即为酶的粗提取液,测量其总体积并记录。1.4.2 酶活力的测定:取 3 支试管,编号,依次按表 2 加入试剂。用黑纸包上 2 号管,比色时作空白,与其他两管一起放在荧光灯(光强 60umol/m2 •s)下,照光 10min,然后把试管均罩上黑布,测定待测样品和无酶反应液在560nm 处的吸光度值。表 2 各溶液加入量试剂试管 1 试管 2 试管 3反应介质/ml3.9
11、3.93.9-范文最新推荐-7 / 10酶提取液/ ml0.10.10磷酸缓冲液/ ml000.1备注待测样品空白无酶反应液(对照)1.4.3 计算 SOD 的活力:SOD 总活力= (A0-As)×VT/(A0×0.5FW×V1)式中 SOD 总活力以每克鲜重酶单位表示;A0 为照光对照管的吸光度值;AS 为样品管的吸光度值;V1 为测定时样品的用量( ml) ;VT 为样液的总体积(ml) ; FW 为样品鲜重(g ) ;1.5 过氧化物酶(POD)活性的测定按刘萍和李明军的分光光度法测定 POD 活性10 。具体方法: 1.6.2 酶活力的测定取 3
12、个 50mL 洁净干燥的三角瓶,标上瓶号,并按下表准确地加入各项试剂:瓶号蒸馏水抗坏血酸偏磷酸将三角瓶放在水浴上加温至 1825,然后每隔2min 在瓶中依次加入酶液 2mL,将各瓶在 1825水浴中保温 30min 后,立即按原顺序向 、号瓶中加入偏磷酸 1mL(以终止酶的活力) 。待反应瓶冷却后,各加淀粉溶液 3 滴(作指示剂) ,用微量滴定管以 0.83mol/L 的碘液进行滴定,直至各瓶出现-范文最新推荐-9 / 10浅蓝色为止,记录滴定值。用每克叶组织每分钟氧化抗坏血酸的毫克数来表示抗坏血酸氧化酶的活力。计算公式如下:抗坏血酸氧化酶的活力mg/(g.min)=-(+)/2×0.44(B/A)/(W×t)式中圆圈内的数字为各号瓶中用 0.83mol/L 碘液滴定时耗用的碘液毫升数;0.44 为每毫升 0.83mol/L 碘液氧化抗坏血酸的毫克数;B 为酶提取液总体积(mL )A 为测定时酶液的用量(mL)W 为样品的鲜重(g )T 为酶促反应时间(min)1.7 超氧阴离子 O2-产生速率的测定 亚精胺对淹水胁迫下玉米幼苗根系抗氧化代谢调控(4):