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1、人参皂苷Rg1促进坐骨神经损伤后修复的研究 目的 观察中药人参皂苷Rg1（GsRg1）对大鼠坐骨神经损伤后是否有促进神经功能恢复的作用。 方法 离断大鼠右侧坐骨神经后，立即在显微镜下缝合，左侧坐骨神经为空白对照，手术后，大鼠随机分为生理盐水组、GsRg1 2 mg 、4 mg、8 mg、12 mg组和甲钴胺组，分别腹腔内注射，手术2、4、8周后，通过测定坐骨神经功能指数（SFI），神经电生理方法检测运动神经传导速度（MNCV），据此评价坐骨神经再生和功能恢复情况。 结果 SFI检测示各组神经功能指数恢复明显高于生理盐水组，甲钴胺组与GsRg1 2 mg、12 mg组相比神经功能指数恢复无明显差
2、异，GsRg1 4 mg、8 mg组神经功能指数恢复明显高于GsRg1其他俩组及甲钴胺组。神经传导速度测定是各GsRg1剂量组及甲钴胺组也明显高于生理盐水组，GsRg1组中4 mg组、8 mg组高于GsRg1其他2组及甲钴胺组，GsRg1 2 mg组、12 mg组与甲钴胺组神经传导速度恢复相似。 结论 GsRg1可以促进神经再生和功能恢复，且最佳用药剂量为（48）mg/kg。 人参皂苷Rg1；坐骨神经；神经损伤；神经再生 R651.3 A 1673-9701（2016）14-0027-04 Objective To observe the effect of Rg1 in rats wheth
3、er the role of promoting neurological recovery after sciatic nerve injury. Methods After amputating the right sciatic nerve of rats we stitched it up immediately under the surgical microscope， leaving the left side sciatic nerve as the blank. After surgery， rats were randomLy divided into normal sal
4、ine group， GsRg1 2 mg， 4 mg， 8 mg， 12 mg group and methyl cobalamin group， respectively intraperitoneal injection， 4 and 8 weeks after surgery， by measuring the sciatic functional index （SFI）， neurophysiological method for detecting motor nerve conduction velocity （MNCV）， whereby evaluation of sciat
5、ic nerve regeneration and functional recovery. Results SFI detect nerve function index showed recovery in each group were significantly higher than saline group phase， mecobalamine group restore nerve function index had no significant difference compared with GsRg1 2 mg， 12 mg group， GsRg1 4mg， 8mg
6、group restore nerve function index was significantly higher in the other two groups and GsRg1 methylcobalamin group. Nerve conduction velocity：Each dose group of GsRg1 and Mecobalamin group was also significantly higher than Saline group， in GsRg1 group， 4 mg group and 8 mg group were all higher tha
7、n the other two groups of GsRg1， the recovery of GsRg1 2 mg group and 12 mg group were similar with nerve conduction velocity of Mecobalamin group. Conclusion GsRg1 can promote nerve regeneration and functional recovery and optimal dose of （4-8）mg/kg. Ginsenoside Rg1； Sciatic nerve； Nerve injury； Ne
8、rve rehabilitation从中医角度看人参具有补气固脱、宁心益智、养血生津、补脾益肺、大补元气之功效。从西医角度看，人参具有调节中枢神经系统、改善心肌功能、增加机体免疫功能、调节血糖、抗肿瘤、抗氧化等作用，李君庆等【1】通过对人参皂苷Rg1抗神经细胞凋亡作用机制的研究发现人参皂苷Rg1抗神经元凋亡是通过抑制DNA的断裂而发挥的作用。曾有文献报道，Schwann细胞能够促进周围神经的损伤修复，同时研究表明人参皂苷单体Rg1可促进Schwann细胞的分裂增殖及迁移【2】。张志军等【3】研究表明人参皂苷单体Rg1促进周围神经的损伤修复是通过影响内皮细胞的血管扩张及直接作用而完成的。上述资料
9、进一步支持人参皂苷单体Rg1可促进周围神经的再生。本研究进一步明确人参皂苷Rg1是否能够促进离断后缝合的坐骨神经功能恢复。1 资料与方法1.1 动物来源同种雄性大鼠体重（275±25）g，所有动物及饲料均购自内蒙古大学动物实验中心，实验动物的许可证号为：SCXK（蒙）2002-0001，购回的大鼠先进行适应性饲养57 d。根据内蒙古相关要求饲养。1.2 实验药物人参皂苷Rg1由吉林大学生化教研室提供。甲钴胺（瑞阳制药有限公司，国药准字H20050352），规格为0.5 mg。1.3 分组及方法每只大鼠行右侧坐骨神经离断后纤维吻合，随机分为6组，每组45只。4个实验组分别以2 mg
10、/（kg-d），4 mg/（kg-d），8 mg/（kg-d）和12 mg/（kg-d）腹腔注射人参皂苷Rg1，阳性对照组腹腔注射100 mg/（kg-d）甲钴胺（Mecobalamin），阴性对照组注射生理盐水，均连续给药8周。每只大鼠右侧为损伤侧，左侧为正常对照。配置相关试验溶液。大鼠坐骨神经损伤模型的建立：成年雄性Wistar大鼠，用10%的水合氯醛腹腔注射（3 mL/kg），达到麻醉要求后，俯卧位固定大鼠、脱毛、消毒手术视野，在无菌条件下于右下肢股后部做一纵切口，长约1.5 cm，手术显微镜下无菌分离大腿的各肌层，充分显露并游离坐骨神经，后在梨状肌下缘0.8 cm处将坐骨神经离断，随即
11、用无菌11-0无创伤尼龙线缝合，神经外膜处缝合4针，显微缝线留置于该损伤区外膜上作为标记，然后用无菌1-0线逐层关闭切口。所有操作均由一人完成。术后观察动物清醒后，分笼饲养，勤换垫料以防止足底溃疡发生。1.4 观察指标1.4.1 大鼠足踪分析和SFI 术后2、4及8周进行踪足分析和SFI（坐骨神经功能指数测定）测定。参考文献报道方法【4】，制做长60 cm三棱柱形大鼠足印走行记录暗箱，箱底铺设白纸，足底蘸墨汁白鼠通过后于白纸上留下足迹。收足印，测量从足跟到足尖的距离作为足印长度（PL）、从第15趾的距离作为大鼠足趾宽度（TS）、从第24趾的距离作为中间足趾距离（ITS），精确至毫米。将变量带入
12、Bain公式计算SFI。SFI=-38.3（EPL-NPL）/NPL+109.5（ETS-NTS）/NTS+13.3（EITS-NITS）/NITS-8.8。实验侧大鼠的足印用EPL表示；正常侧用NPL表示。实验侧足趾宽度用ETS表示；正常侧用NTS表示。实验侧中间足趾距离用EITS表示；正常侧用NITS表示。检测后SFI以-100代表神经完全离断，-11-100表示部分神经功能恢复，0±11表示神经功能完全正常。1.4.2 测定大鼠神经传导速度 用药后于2、4及8周再次麻醉动物。暴露坐骨神经吻合口远、近端及吻合口。BL-420 F电生理仪取坐骨神经检测并记录神经平均传导速度，记
13、录最大波幅值等数据。1.5 统计学方法将完整的临床资料和实验数据均输入计算机，运用统计软件包SPSS17.0进行处理，计量资料均以（x±s）表示，组间比较采用方差分析。P7.79x10-1）。2 mg、12 mg及甲钴胺三组间差异无统计学意义。三者之间差异显著性检验结果分别为：2 mg-甲钴胺：（t=1.08，P1.14x10-1）；12 mg-甲钴胺：（t=-0.23，P4.09x10-1）；2 mg-12 mg：（t=-1.56，P6.11x10-1）。见表1。2.2 测定神经传导速度手术后我们对人参皂苷剂量组、甲钴胺组及生理盐水组2、4、8周时的神经平均传导速度进行检测，见
14、表2。甲钴胺组及人参皂苷各剂量组各时间点神经平均传导速度值均显著优于对照组（P0.05），人参皂苷剂量组2 mg、12 mg及甲钴胺三组间相互比较差异无统计学意义（P0.05）。结果可见：方差分析的结果显示处理之间（F=22.90，P6.39x10-1）。（4）2 mg、12 mg及甲钴胺三组间相互比较差异无统计学意义。三者之间差异显著性检验结果分别为：2 mg-甲钴胺：（t=2.36，P1.32x10-1）；12 mg-甲钴胺：（t=-1.25，P3.21x10-1）；2 mg-12 mg：（t=-1.52，P3.28x10-1）。3 讨论在临床工作中坐骨神经损伤较为常见，坐骨神经损伤发病率
15、高，并发症多，致残率高。关于实验动物模型的选择，我们在前期实验进行的坐骨神经损伤模型的基础之上，已经掌握了丰富的经验，经过足踪分析及其他方面检测，证明利用坐骨神经离断后再于显微镜下缝合，这一手术操作方法简便易行，手术费用低，能较好的反映出坐骨神经损伤的模型【5】。与国内大部分实验的模型选择一致，能够代表坐骨神经损伤后的实验动物特性。另外在足踪分析方面，结合实际我们自制的大鼠足印采集设备，能够清晰的采集到大鼠后足的损伤侧与正常侧的图像，便于数据收集。人参皂苷Rg1是其中最为重要的单体之一，药理学作用相当广泛，尤其是人参皂苷Rg1的神经保护和营养作用更是受到关注。人参皂苷是人参生理活性的物质基础，
16、由于烯酸的作用，在分离甙元时分子侧链部分的羟基及烯键环合成人参二醇和人参三醇，均属于三萜类皂苷。本文结合临床及基础的最新研究，从周围神经损伤的治疗方面，以动物实验研究为主，对于大鼠的人参皂苷Rg1的剂量选择，我们参考其他国内的实验，分别选择2 mg，4 mg，8 mg，12 mg的剂量，便于药理学的分析，通过对大鼠足踪分析和坐骨神经功能指数测定，我们得出各时间点甲钴胺组及人参皂苷各组统计学上显著优于生理盐水组（P0.05），2 mg、12 mg及甲钴胺三组间相互比较差异无统计学意义（P0.05）。通过对术后2、4、8周各组别运动神经传导速度测定，我们得出各时间点运动神经传导速度值在统计学上实验各组均显著优于对照组（P0.05），2 mg、12 mg及甲钴胺三组间相互比较差异无统计学意义（P0.05）。对周围神经中人参皂苷发挥作用的机制的研究还尚未见报道，结合本研究，我们认为，随着生物学技
