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1、Trizol 提取总 RNA一、实验所需试剂：trizol 1. 氯仿 普通试剂 实验前未开封或在工作台中使用过2. 异丙醇 普通试剂 实验前未开封或在工作台中使用过，使用前冰浴待用3. 75%酒精 用无水乙醇加 RNase-free h2o 配好，实验前未开封或在工作台中使用过，使用前冰浴待用二、实验所需物品：1. 1ml 枪头及枪头盒0.2ml 枪头及枪头盒10 微升枪头及枪头盒，用 1/1000 DEPC 泡过夜，高压 121 度 40 分钟，烤干备用0.5ml 1.5ml 的 EP 管用 1/1000 DEPC 泡过夜，高压 121 度 40 分钟，烤干备用2. 研钵、小勺、镊子、剪刀
2、：180 度 4 小时烘烤3. 1/1000 DEPC 水高压 121 度 40 分钟4. 枪 三种5. 多用途离心管架放入操作台内二、实验步骤：（一）1. 取液氮中的组织块，取出放研钵中加液氮研磨，研磨至粉末状。2. 加入适量 trizol 1ml （50-100mg/ml） ，吹打混匀，转移至 EP 管中，静置 5分钟。3. 每 1ml TRIZOL 加 0.2ml 氯仿，手动摇晃 15 秒，室温静置 2-3 分，12000g*15 分 ，4 度。4. 可见上层水相，中间混合相，下层酚相，吸取水相，转至新的 EP 管中。5. 加入等体积冰预冷的异丙醇，颠倒混匀，1ml trizol 加 0.5ml。15-30 度放 10分或-20 度沉淀 40 分，12000g*10 分 4 度。6. 吸去液体可见白色沉淀，加入 1ml 冰预冷 75%乙醇，混匀，洗涤，7500g*5分，4 度沉淀。7. 弃上清，晾干，溶于 Rnase-free H2O （每管 30-50 微升）8. -70 度保存。注意事项1. RNA 提取完的样本不能保存最好做 CDNA 再保存2. 注意操作是戴手套、帽子、口罩。3. 操作完把枪调回最大刻度。4. 操作时戴双层手套，操作时用外层，其他用里层。
