A血浆胆固醇总量正常

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1、A.血浆胆固醇总量正常 B.血浆胆固醇总量增加 C.血中自由胆固醇量下降 D.血中胆固醇酯/胆固醇比值升高 E.血中胆固醇/胆固醇比值下降 20.能编码具有酪氨酸蛋白激酶活性的癌基因是:() A.mycB.myb C.sisD.src E.ras 二、问答题(每人答8题,生化专业第1、2题必答,其他专业任选8题,每题10分,共80分) 1.简述人类基因组计划的基本内容、进展以及蛋白质组学的概念。(生化专业必答) 2.何谓guanylate binding protein?请写出其亚基组成、主要类型及各类型主要功能,并用简头图示guanylate binding protein耦联的受体信号传递

2、途径。(生化专业必答) 3.试比较糖酵解、糖原合成与糖异生的原料、关键酶和产物的异同。 4.脂肪酸的-氧化与生物合成的主要区别是什么? 5.已知某一基因的cDNA序列,请设计一个实验从RNA获得这一cDNA片段,并简述其原理。 6.试比较原核生物与真核生物基因表达调控特点的异同。 7.以乙酰辅酶A为中心,说明体内糖、脂肪、氨基酸代谢的相互联系与转变。 8.请举例说明蛋白质一级结构与功能的关系。 9.简述成熟红细胞的代谢特点。 10.简述野生型P53基因的抑癌机理。 参考答案 一、选择题 1.A 2.C 3.A 4.B 5.E 6.A 7.A 8.E 9.C 10.C 11.A 12.C 13.

3、B 14.E 15.D 16.D 17.B 18.B 19.E 20.D 二、问答题 第1题 答案: 人类基因组计划的主要内容:遗传图分析;物理图分析;转录图分析;基因组序列测定;资料的储存与利用。 进展(由于时效性丧失,故省略) 蛋白质组学的研究试图比较细胞在不同生理或病理条件下蛋白质表达的异同,对相关蛋白质进行分类和鉴定。更重要的是蛋白质组学的研究要分析蛋白质间相互作用和蛋白质的功能。蛋白质组的研究不仅能为生命活动规律提供物质基础,也能为众多疾病机理的阐明及攻克提供理论根据和解决途径。通过对正常个体及病理个体间的蛋白质组比较分析,我们可以找到某些“疾病特异性的蛋白质分子”,它们可成为新药物

4、设计的分子靶点,或者也会为疾病的早期诊断提供分子标志。 第2题 答案: G蛋白:即鸟苷酸结合蛋白,是一类位于细胞膜胞浆面、能与GDP或GTP结合的外周蛋白,由、三个亚基组成。以三聚体存在并与GDP结合者为非活化型。当亚基与GTP结合,且二聚体脱落时变成活化型。G蛋白活化之后,可作用于腺苷酸环化酶或磷脂酶C等效应分子,产生第二信使,介导下游信号传导和后续的生物学效应。 根据亚基的不同将G蛋白分为六类: Gs:激活腺苷酸环化酶,产生cAMP第二信使,继而激活cAMP依赖的蛋白激酶。 Gi:抑制腺苷酸环化酶。 Gp:激活磷脂酰肌醇特异的磷酯酶C Gl:激活cGMP磷酸二酯酶,下调cGMP Go:大脑

5、中主要的C蛋白,可能调节离子通道 小G蛋白:一些原癌基因表达产物,有着广泛的调节功能。 信号传导途径图示:激素受体G蛋白酶(腺苷酸环化酶或磷脂酶C)第二信使蛋白 激酶酶或功能蛋白生物学效应。 第3题 答案:第4题 答案: 脂肪酸合成过程不是-氧化的逆过程,它们反应的组织,细胞定位,转移载体,酰基载体,限速酶,激活剂,抑制剂,供氢体和受氢体以及反应底物与产物均不相同。如图: 第5题 答案: 获得RNA 制备cDNA:以mRNA为模板,利用反转录酶合成与mRNA互补的DNA(cDNA),再复制成双链,DNA片段。由总mRNA制作的cDNA文库包含了所表达的各种mRNA信息,自然也含有我们感兴趣的编

6、码cDNA。 PCR扩增目的片段:根据已知cDNA的5和3端序列设计出引物,在DNA聚合酶作用下,PCR扩增目的cDNA。在引物设计时,5和3端引物分别带上不同的限制性内切核酸酶,以方便下一步定向克隆。 与载体连接:限制性内切核酸酶酶切扩增片段,产生粘性末端,与互补开环载体的粘性末端互补连接成具有自我复制能力的复制子。 转化、筛选:转化或转染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化子细胞,再进行扩增、提取获得大量同一DNA分子。 第6题 答案: 第7题 答案: 糖原、脂肪、蛋白质均能分解产生乙酰CoA,通过三羧酸循环彻底氧化产能。乙酰CoA是糖、 脂、氨基酸代谢相互联系的重要枢纽。 当摄入糖量超过消

7、耗时,糖代谢产生的乙酰CoA以柠檬酸的形式进入胞浆,一方面为脂肪酸的合成提供了原料,另一方面还可激活脂酸合成关键酶;加之,磷酸戊糖途径活跃提供大量NADPH,使胞浆内脂肪酸大量合成。然后与糖转变生成的。磷酸甘油进一步生成脂肪。此外糖还可经 乙酰CoA转变为胆固醇,并为磷脂的合成提供基本骨架。脂在体内则难转变为糖,偶数碳原子的 脂肪酸分解产生的乙酰CoA不能逆氧化脱羧反应生成丙酮酸,因而不能异生成糖。但是甘油及奇 数碳原子脂肪酸分解产生的丙酰CoA可转变为糖。 蛋白质分解产生的20种氨基酸(亮氨酸、赖氨酸除外),均可脱氨基生成。-酮成二酸,经草酰乙酸转变为磷酸烯醇式丙酮酸,再循酵解逆行途径转变为

8、糖;反之,糖代谢产生的。-酮戊二酸,可氨基化生成某些非必需氨基酸,但不能生成必需氨基酸。 氨基酸代谢可生成乙酰CoA及合成磷脂的特殊原料,故蛋白质可以转变为脂类。但乙酰CoA不能合成氨基酸,故偶数碳原子的脂肪酸不能转变为蛋白质。但是甘油和丙酰CoA可以通过中间代谢物,氨基化生成某些非必需氨基酸。 第8题 答案: 蛋白质一级结构是空间结构的基础,特定的空间构象主要是由蛋白质分子中肽链和侧链R基团形成的次级键来维持。在生物体内,蛋白质的多肽链一旦被合成后,即可根据一级结构的特点自然折叠和盘曲,形成一定的空间构象,获得一定功能。以核糖核酸酶为例说明。加入尿素(破坏氢键)和-巯基乙醇(破坏二硫键),导

9、致此酶的二、三级结构遭到破坏,酶活性丧失,但肽键不受影响,所以一级结构不变,采用透析去除尿素和-巯基乙醇后,仍能恢复正常的构象和功能。证明空间构象遭到破坏的核糖核酸酶,只要其一级结构未被破坏,松散的多肽链可循其特定的氨基酸顺序,卷曲折叠成天然的空间构象,酶活性又逐渐恢复至原来水平。 一级结构相似的蛋白质,其基本构象及功能也相似,例如,不同种属的生物体分出来的同一功能的蛋白质,其一级结构只有极少的差别,而且在系统发生上进化位置相距愈近的差异愈小。 在蛋白质的一级结构中,参与功能活性部位的残基或处于特定构象关键部位的残基,如果发生突变,那么该蛋白质的功能也会受到明显的影向。如镰刀型红细胞贫血发生的

10、原因是血红蛋白的一级结构发生了差错,血红蛋白-亚基的第6位氨基酸应该是谷氨酸,突变为缬氨酸,导致红细胞变形成镰刀状而极易破裂,产生贫血。 第9题 答案: 成熟红细胞不仅无细胞核,而且也无线粒体、核蛋白体等细胞器,不能进行核酸和蛋白质的生物合成,也不能进行有氧氧化,不能利用脂肪酸。血糖是其唯一的能源。红细胞摄取葡萄糖属于易化扩散,不依赖胰岛素。成熟红细胞保留的代谢通路主要是葡萄糖的无氧酵解和磷酸戊糖通路以及2,3-二磷酸甘油酸旁路(2,3-BPG)。 糖无氧酵解是红细胞获得能量的主要途径,一分子葡萄糖经酵解可产生2分子ATP,维持正常功能。 2,3-二磷酸甘油酸旁路产生2,3-BPG,可与血红蛋

11、白结合,使血红蛋白的构象更趋稳定,降低血红蛋白与O2的亲和力,可增加O2在组织的释放。 磷酸戊糖通路,为红细胞提供NADPH,能维持红细胞内还原型谷胱甘肽的含量,具有保护膜蛋白、血红蛋白及酶蛋白的巯基不被氧化,还原高铁血红蛋白等多种功能。 第10题 答案: P53基因是一种抑癌基因,对维持细胞的正常生长和抑制细胞恶性增殖过程起着重要作用,是染色体完整性和细胞生长状态的监视调控器。P53基因突变生具有癌基因活性,促进癌变。抑癌机制:细胞DNA受到损伤后,P53蛋白与DNA的相应部位结合,起特殊转录因子作用,活化P21基因转录,使细胞分裂终止止于G1期,阻止细胞无限制的增殖;抑制解链酶活性;与复制

12、因子A相互作用参与DNA的复制与修复;如损伤不能修复,P53基因则启动细胞的程序性死亡过程而引发细胞自灭,从而保证有癌变倾向的细胞不能继续生长。一、名词解释(共8题,共20分) .肽平面 2.Tm值 3.反式作用因子 4. CaM 5.内含子 6.Pribnow盒 7.操纵子 8.LPL 二、简答题(共4题,共30分) 1.试比较氨基甲酰磷酸合成酶I和的异同。(6分) 2.真核生物由hnRNA转变为mRNA包括哪些加工过程。(5分) 3.简述PCR的作用机理。(5分) 4.简述饥饿者为何易发生酸中毒。(6分) 5.限制性内切酶识别DNA的序列多属回文结构,基于上述认识,请完成下列结构。(4分)

13、 5GAA3 3 5 6.下列各化合物完全氧化时,每分子能产生多少个ATP(4分) (1)丙酮酸 (2)葡萄糖 (3)NADH (4)FADH2 三、问答题(共5题,共50分) 1.请分别指出DNA复制、RNA合成、蛋白质合成三个过程的忠实性是如何保持的(12分) 2.请写出四种由甘氨酸参与合成的不同类型的生物活性物质,并分别说明它们的主要功能。(10 分) 3.分别讨论氨甲酰磷酸和PRPP在代谢中的作用。(8分) 4.蛋白质分离纯化技术中哪些与它的等电点有关?试述这些技术分离纯化的原理。(12分) 5.生物体内的代谢在不同的水平上进行,试述“细胞水平的调节”。(8分)参考答案 一、名词解释(

14、共8题,共20分) 1.肽平面:由于肽键具有部分双键性质,不能自由旋转,所以连接在肽键两端的基团处于一个平面上,这个平面称为肽平面,也就是说参与肽键的6个原子C1、C、O、N、H、C2位于同一平面,各原子在此平面不可自由旋转。肽平面是蛋白质构象的基本单元。 2.Tm值:Tm表示使50DNA分子变性解链的温度。不同种类DNA有不同的解链曲线,也有不同的Tm,Tm随G+C含量呈线性增加。这是由于GC碱基对之间的氢键多于AT对之故。某些化学试剂能显著影响Tm值,例如甲酰胺能破坏氢键,使Tm大大降低。 3.反式作用因子:是影响基因转录的调节蛋白,包括基本转录因子和特异转录因子,基本转录 因子与RNA聚

15、合酶构成转录起始复合物,有人将它们称为RNA聚合酶的亚基,它们在所有的细胞中都存在,对于三种RNA聚合酶,除个别基本转录因子都是通用的。特异转录因子包括转录激活因子和转录抑制因子,前者与增强子结合增强基因转录,后者与沉默子结合抑制基因转录,转录因子。一般含有DNA结合域和转录激活域,前者是转录因子与DNA结合的位点,如锌指结构和碱性氨基酸组成的螺旋。后者是转录因子与转录起始复合物中某种蛋白质相互作用的位点,此外,某些转录因子还有蛋白质和蛋白质相互作用的结构域。 4.CaM:钙调蛋白为钙结合蛋白,参见钙调蛋白依赖性蛋白激酶途径传导的信号转导通路 CaM是一条多肽链组成的单体蛋白,含四个Ca2+结合位点。可以感受细胞对钙离子浓度的变化, 胞内Ca2+增加,Ca2+结合CaM,导致构像变化激活Ca2+-CaM激酶。Ca2+-CaM激酶可以磷酸化许 多蛋白的丝苏

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