生物分离工程期末复习题-修订编选

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1、1 填空题填空题 1. .根据吸附剂与吸附质之间存在的吸附力性质的不同，可将吸附分为 物理吸 附 、 化学吸附 和 交换 吸附； 2. 比表面积 和 孔径 是评价吸附剂性能的主要参数。 3. 层析操作必须具有 固定 相和 流动 相。 4. 溶质的分配系数大，则在固定相上存在的几率 大 ，随流动相的移动速度 小 。 5. 层析柱的理论板数越 多 ，则溶质的分离度越 大 。 6. 两种溶质的分配系数相差越 小 ，需要的越多的理论板数才能获得较大的 分离度。 7. 影响吸附的主要因素有 吸附质的性质 ， 温度 ， 溶液 pH 值 ， 盐 的浓度 和 吸附物的浓度与吸附剂的用量 ； 8. 离子交换树脂

2、由 网络骨架 （载体） ， 联结骨架上的功能基团 （活性 基） 和 可交换离子 组成。 9. 电泳用凝胶制备时，过硫酸铵的作用是 引发剂（ 提供催化丙烯酰胺和双丙 烯酰胺聚合所必需的自由基） ；甲叉双丙烯酰胺的作用是 交联剂（丙烯酰胺 单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺催化剂的作用下聚合而成的含酰胺基侧链的脂肪 族长链） ； TEMED的作用是 增速剂 （催化过硫酸胺形成自由基而加速丙烯 酰胺和双丙烯酰胺的聚合 ） ； 10. 影响盐析的因素有 溶质种类 ， 溶质浓度 ， pH 和 温度 ； 11. 在结晶操作中，工业上常用的起晶方法有 自然起晶法 ， 刺激起晶法 和 晶种起晶法 ； 12. 简单地说

3、离子交换过程实际上只有 外部扩散 、 内部扩散 和化学交换反 应 三步； 13. 在生物制品进行吸附或离子交换分离时，通常遵循 Langmuir 吸附方程，其 形式为 cK cq q 0 14. 反相高效液相色谱的固定相是 疏水性强 的，而流动相是 极性强 的； 15. 等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其 等电点 的不同； 16. 离子交换分离操作中，常用的洗脱方法有 静态洗脱 和 动态洗脱 ； 2 17. 晶体质量主要指 晶体大小 ， 形状 和 纯度 三个方面； 18. 亲和吸附原理包括 配基固定化 ， 吸附样品 和 样品解析 三步； 19. 根据分离机理的不同，色谱法可分为 吸附、

4、离交、亲和、凝胶过滤色谱 20. 蛋白质分离常用的色谱法有 免疫亲和色谱法， 疏水作用色谱法 ， 金 属螯合色谱法 和 共价作用色谱法 ； 21. SDS-PAGE 电泳制胶时，加入十二烷基磺酸钠（SDS）的目的是消除各种待 分离蛋白的 分子形状 和 电荷 差异，而将 分子量 作为分离的依据；加 入二硫叔糖醇的目的是 强还原剂，破坏半胱氨酸间的二硫键 ； 22. 影响亲和吸附的因素有 配基浓度 、 空间位阻 、 配基与载体的 结合位点 、 微环境 和 载体孔径 ； 23. 阳离子交换树脂按照活性基团分类，可分为 强酸性阳离子交换树 脂 、 弱酸性 和 中强酸性 ；其典型的活性基团分别有 、 、

5、； HSO3 COOH 2 )(OHPO 24. 阴离子交换树脂按照活性基团分类，可分为强碱性、 弱碱性 和 中强 碱性 ； 其典型的活性基团分别有、兼有以上两种基 OHCHRN 33) ( 2 NH 团； 25. 影响离子交换选择性的因素有 离子水合半径 、 离子价 、 离子强 度 、 溶液 pH，温度 、溶液浓度 、 搅拌速率 、和 交联度、膨胀度、 颗粒大小 ； 26. 离子交换操作一般分为 静态 和 动态 两种； 27. 依据电泳原理，现有电泳分离系统可分为 移动界面电泳、 区带电泳 和稳 态电泳 ； 28. 双相电泳中，第一相是 等电聚焦 ；第二相是 SDS-PAGE ； 29. 结

6、晶包括三个过程 过饱和溶液的形成 、 晶核的形成 和 晶体生长 ； 30. 过饱和溶液的形成方法有 热饱和溶液冷却 、 部分溶剂蒸发 、 真空 蒸发冷却法、 化学反应结晶法 和 盐析法 ； 31. 晶核自动形成时，体系总的吉布斯自由能的改变 G 由 表面过剩吉布斯自 由能 GS和 体积过剩吉布斯自由能 GV 组成； 32. 基本的离子交换过程由 外部扩散 、 内部扩散 和 化学交换 组 3 成； 33. 吸附包括 将待分离的料液通入吸附剂中 ， 吸附质被吸附到吸附剂表 面 ，料液流出 和 解吸 四个过程组成； 34. 大孔网状吸附剂有 非极性 ， 中等极性 和 极性 三种主要类型； 35. 亲

7、和吸附剂表面连接的“手臂链”的作用是 降低空间位阻的影响 ； 36. 分子筛色谱（凝胶色谱）的主要应用是 脱盐 、 生物大分子的分离 ； 37. 电泳系统的基本组成有 电泳槽 、 电源 、 灌胶模具 、 外循环恒温 系统 、 凝胶干燥器 、 电泳转移装置 、 电泳洗脱仪 和 凝胶扫描 和摄录装置； 38. 电泳后，样品的主要染色方法有 考马斯亮蓝 和 银染法 ； 39. 电泳过程中，加入溴酚兰的目的是 指示蛋白的迁移位置 ； 40. 固体可分为 晶体 和 无定形固体 两种状态； 41. 结晶的前提是 溶液达到过饱和状态 ；结晶的推动力是 过饱和 度 ； 42. 根据晶体生长扩散学说，晶体的生长

8、包括 溶质通过扩散作用穿过靠近晶 体表面的一个滞流层，从溶液中转移到晶体的表面 、 到达晶体表面的溶质 长入晶面，使晶体增大，同时放出结晶热 和 结晶热传递回到溶液中 三 个过程； 43. 影响晶体生长的主要因素有 杂质 、 搅拌 和 温度 ； 44. IEC 操作多采用 线性梯度 洗脱和 逐次 洗脱。 45. HIC（疏水性相互作用层析）主要采用 降低 流动相离子强度的线性梯度 洗脱法和逐次洗脱法；IEC（离子交换层析）主要采用 增加 流动相离子 强度的线性梯度洗脱法和逐次洗脱法。 46. 由于温度升高使分子和原子的热运动加剧，结合部位的静电作用、氢键及金 属配位键的作用会 减弱 ，疏水性相

9、互作用会 增强 。 47. 电泳是 荷电（电解质） 溶质在 电场 作用下，发生定向泳动的现象。 48. 电泳分离是利用 电解质 在电场中 泳动速度 的差别进行分离的。 49. 亲和层析的洗脱方法有 特异性洗脱 法和 非特异性洗脱 法。 50. 荷电溶质在电场中受到 电场 力和 黏性阻 力的作用。 4 51. 不连续凝胶电泳的凝胶层由 浓缩 层和 分离 层组成。 52. 不连续凝胶电泳的上层起 浓缩 作用，下层起 分离 作用。 53. 当微小晶体的半径时，则微小晶体会 自动溶解 ；当微小晶体的半径 c rr 时，则微小晶体会 自动生长 。 c rr 53. 结晶是从液相或气相中生成 形状一定 、

10、 分子（或原子、离子）有规 则排列 的晶体的现象。 54. 结晶是内部结构的质点元作 三维有序规则 排列的形状一定的固体粒子， 而沉淀是 无规则 排列的无定形的粒子。 55. 离子交换操作一般分为 和 两种； 56离子交换分离操作中，常用的洗脱方法有（pH 梯度） 和（离子强度（盐） 梯度） 。 57. 简单地说，离子交换过程实际上只有（外部扩散） ， （内部扩散）和（化学交 换反应） 三步； 58. 离子交换操作一般分为（动态）和（静态）两种； 59. 根据晶体生长扩散学说，晶体的生长包括（溶质借扩散作用从溶液中转移到 晶体的表面） 、 （溶质长入晶面放出结晶热）和（结晶热传递回到溶液中）三

11、个过 程； 60. 影响晶体生长速度的主要因素有（杂质） 、 （搅拌） 、 （过饱和度）和（温度） 。 选择题选择题 1. 凝胶过滤层析中，流动相的线速度与 HETP 关系。 A.无 B.线性减少 C. 线性增加 D. 对数 2. GFC 中溶质的分配系数在分级范围内随相对分子质量的对数值增大 而 。 A.线性增大 B.线性减少 C.急剧增大 D.急剧减少 3. 凝胶的分级范围越小，则分离度 。 A.越大 B.越小 C.小于 1 D.小于 0 4. 线性梯度洗脱过程中，流动相的离子强度线性增大，因此，溶质的 5 连续降低，移动速度逐渐增大。 A.溶解度 B.扩散系数 C.分配系数 D.分离度

12、5. 逐次洗脱过程中，流动相的离子强度阶跃增大，溶质的分配系数 降低。 A.逐渐 B.阶段式 C.线性 D.急剧 6. 当吸附操作达到穿透点时，应 B 操作。 A.继续吸附 B.停止吸附 C.停止再生 D.停止洗脱 7. 离子交换的分配系数与离子浓度呈 D 关系。 A.线性增加 B.线性减少 C.指数增加 D.指数减少 8. 凝胶过滤层析中，流动相的线速度与 HETP 成 C 关系。 A.无 B.线性减少 C.线性增加 D.对数 9.GFC 中溶质的分配系数在分级范围内随相对分子质量的对数值增大而 B 。 A.线性增大 B.线性减少 C.急剧增大 D.急剧减少 10. 凝胶的分级范围越小，则分

13、离度 A 。 A.越大 B.越小 C.小于 1 D.小于 0 11. 如果亲和作用主要源于静电引力，提高离子强度会 D 亲和作用。 A.增加 B.减弱 C.不影响 D.减弱或完全破坏 12. 如果亲和作用以氢键为主，提高离子强度会 D 亲和作用。 A.增加 B.减弱 C.不影响 D.降低或消除 13. 当亲和作用以疏水性相互作用时，提高离子强度会 A 亲和作 用。 A.增加 B.减弱 C.无影响 D.完全破坏 14. 在亲和分离操作中，许多亲和吸附的目标蛋白质用高浓度的盐溶液洗脱，说 明 D 在亲和作用中占主要地位。 A.疏水性相互作用 B.配位键 C.非共价键 D.静电力 15. C 的存在

14、可以抑制氢键的形成。 A.氧原子 B.氮原子 C.尿素和盐酸胍 D.NaCl 16. 电泳分离的机理是 B 分离过程。 6 A.液液相平衡 B.速率 C.分配平衡 D.筛分 17. 凝胶电泳时利用 D 使分子大小不同的电解质分离的。 A.静电作用 B.亲水作用 C.疏水作用 D.分子筛作用 18. 电解质溶质的迁移率是 C 下的泳动速度。 A.单位时间 B.单位溶质质量 C.单位电场强度 D.单位静电引力 19. 结晶是利用溶质之间 C 差别进行分离纯化的一种扩散分离操作。 A.浓度 B.静电引力 C.溶解度 D.扩散系数 20. 若亲和结合作用源于亲和分子与金属离子形成的配位键，则加入 可使

15、亲和结合作用消灭。 A.NaCl B.硅酸铵 C.EDTA（乙二胺四乙酸） D.SDS 21. 微小晶体的溶解度 B 普遍大颗粒晶体的溶解度。 A.低于 B.高于 C.接近 D.等于 22.线性梯度洗脱过程中，流动相的离子强度线性增大，因此，溶质的 C 连 续降低，移动速度逐渐增大。 A.溶解度 B.扩散系数 C.分配系数 D.分离度 23.逐次洗脱过程中，流动相的离子强度阶跃增大，溶质的分配系数 B 降低。 A.逐渐 B.阶段式 C.线性 D.急剧 24. 具有亲和作用的分子（物质）对之间具有“钥匙”和“锁孔”的关系是产生亲和 结合作用的 C 。 A.充分条件 B.充要条件 C.必要条件 D.假设条件 25. 若亲和结合作用源于亲和分子与金属离子形成的配位键，则加入 C 可使 亲和结合作用消灭。 A.NaCl B.硅酸铵 C.EDTA（乙二胺四乙酸） D.SDS 26、结晶过程具有很好的（ ） 。 A自范性 B均匀性 C选择性 D各向异性 27、晶体具有自发地生长为多面体的可能性，此性质称为晶体的（ ） 。 A自范性 B均匀性 C选择性 D各向异性 28、离子交换树脂对不同离子亲和能力的差别，表现在（ ）