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1、第 1 页 共 21 页 实验一：观察实验一：观察 DNADNA、RNARNA 在细胞中的分布（必修一在细胞中的分布（必修一 P26P26） 一实验目的：一实验目的：初步掌握观察 DNA 和 RNA 在细胞中分布的方法 二实验原理二实验原理 1 1 甲基绿甲基绿+DNA+DNA 绿色绿色 两种试剂不是单独使用，应混合使用两种试剂不是单独使用，应混合使用 吡罗红吡罗红+RNA+RNA 红色红色 2 2 8%8%盐酸：改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色休中的盐酸：改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色休中的 DNADNA 和蛋白质分离，有利于和蛋白质分离，有利于 DNA
2、DNA 与染色剂结合。与染色剂结合。 0.9%NaCl0.9%NaCl 溶液：保持口腔上皮细胞正常形态溶液：保持口腔上皮细胞正常形态 蒸馏水：配制染色剂，冲冼载玻片蒸馏水：配制染色剂，冲冼载玻片 三方法步骤三方法步骤 操作步骤操作步骤注意问题注意问题解释解释 取口腔上皮取口腔上皮 细胞制片细胞制片 载玻片要洁净，滴一滴质量分数为载玻片要洁净，滴一滴质量分数为 0.9%0.9%的的 NaClNaCl 溶液（生理盐水）溶液（生理盐水） 用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁 上轻刮几下取细胞上轻刮几下取细胞 将载玻片在酒精灯下烘干将载玻片在酒精灯下烘干 防止污迹干扰观察效
3、果防止污迹干扰观察效果 保持细胞原有形态保持细胞原有形态 消毒为防止感染，漱口避免取材失消毒为防止感染，漱口避免取材失 败败 杀死并固定装片；烘干时应来回移杀死并固定装片；烘干时应来回移 动，防止受热不均破裂动，防止受热不均破裂 水解水解 将烘干的载玻片放入质量分数为将烘干的载玻片放入质量分数为 8%8% 的盐酸（的盐酸（HClHCl）溶液中，用）溶液中，用 30300 0C C 水浴水浴 保温保温 5min5min 改变细胞膜的通透性，加速染色改变细胞膜的通透性，加速染色 剂进入细胞剂进入细胞 促进染色体的促进染色体的 DNADNA 与蛋白质分离与蛋白质分离 而被染色，细胞为死细胞而被染色，
4、细胞为死细胞 冲冼涂片冲冼涂片用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片 10S10S 洗去残留在外的盐酸洗去残留在外的盐酸 缓水流：防止细胞被冲走缓水流：防止细胞被冲走 染色染色 用吸水线除去多余的水分用吸水线除去多余的水分 滴滴 2 2 滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上 染色染色 5min5min 吸取染色剂吸取染色剂除去多余的染色剂并盖上盖玻片除去多余的染色剂并盖上盖玻片 观察观察 先低倍镜观察：选择染色均匀、色泽先低倍镜观察：选择染色均匀、色泽 浅的区域，移至视野浅的区域，移至视野 中央，调节清晰中央，调节清晰 后才换用高倍物镜观察：后才换用高倍物镜观
5、察： 使观察效果最佳使观察效果最佳 现象现象 细胞核大部分被染成绿色细胞核大部分被染成绿色 细胞质大部分被染成红色细胞质大部分被染成红色 细胞核也有小部分被染成红色细胞核也有小部分被染成红色 细胞质也有小部分被染成绿色细胞质也有小部分被染成绿色 结论结论 DNADNA 主要集中分布于细胞核中主要集中分布于细胞核中 RNARNA 主要集中分布于细胞质中主要集中分布于细胞质中 在细胞质中也有在细胞质中也有 DNADNA 分布分布 在细胞核中也有在细胞核中也有 RNARNA 分布分布 几种液体几种液体 的作用的作用 第 2 页 共 21 页 实验二：实验二： 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（必修
6、一检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（必修一 P18P18） 一实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质一实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 二实验原理：二实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应颜色反应。 1还原糖还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖如葡萄糖、果糖、麦芽糖）+ + 斐林试剂斐林试剂 砖红色沉淀砖红色沉淀。 甲液：甲液：0.1g/ml0.1g/ml NaOHNaOH 溶液溶液 乙液：乙液：0.05g/ml0.05g/ml CuSOCuSO4 4 溶液溶液 实质：实质：是还原糖（全部单糖、麦芽糖、果糖、乳糖）与新制的
7、 Cu ( OH ) 2反应生成砖 红色氧化亚铜（CuCu 2 2O O）。 2脂肪可以被脂肪可以被苏丹苏丹染液染成橘黄色染液染成橘黄色（或被（或被苏丹苏丹染液染成红色染液染成红色）。 3蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性 NaOHNaOH 溶液中能与双缩脲试剂中的溶液中能与双缩脲试剂中的 CuCu2+ 2+作用，产生紫色反应。 作用，产生紫色反应。） A A 液：液：0.1g/ml0.1g/ml NaOHNaOH 溶液溶液 B B 液液：0.01g/ml0.01g/ml CuSO
8、CuSO4 4 溶液溶液 实质：实质：在碱性条件下，肽键结构与铜离子肽键结构与铜离子反生络合反应，生成紫色络合物。 4. 淀粉遇碘变蓝色。淀粉遇碘变蓝色。 三实验材料三实验材料 1做还原糖鉴定还原糖鉴定实验：应选含糖高含糖高，颜色为，颜色为白色或近白色的白色或近白色的植物组织，如苹果、梨。（因因 为组织的颜色较浅，最好无色，防止颜色干扰且易于观察。为组织的颜色较浅，最好无色，防止颜色干扰且易于观察。） 2做脂肪的鉴定脂肪的鉴定实验：应选富含脂肪的含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡 34 小时（也可用蓖麻种子）。 3做蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定实验：可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清等富含
9、蛋白质的黄豆或鸡蛋清等。 四、实验试剂四、实验试剂 斐林试剂、苏丹或苏丹染液、双缩脲试剂、体积分数为 50%的酒精溶液，碘液、蒸 馏水。 五、方法步骤五、方法步骤 （一）可还原糖的鉴定（一）可还原糖的鉴定 操 作 方 法注 意 问 题解 释 1. 制备组织样液。 （去皮、切块、研磨、过滤） 苹果或梨组织液必须临时制备。 要取组织的颜色较浅，最好无组织的颜色较浅，最好无 色，易于观察。色，易于观察。 因苹果多酚氧化酶含量高，因苹果多酚氧化酶含量高， 组织液很易被氧化成褐色，组织液很易被氧化成褐色， 将产生的颜色掩盖。将产生的颜色掩盖。 2. 取 1 支试管，向试管内 注入 2mL 组织样液。 3
10、. 向试管内注入 1mL 新制 的斐林试剂，振荡（此 时呈现斐林试剂的颜色： 浅蓝色浅蓝色）。 应将组成斐林试剂的甲液、乙 液分别配制、储存，使用前才 将甲、乙液等量混匀成斐林试 剂； 切勿将甲液、乙液分别加入苹 果组织样液中进行检测。 斐林试剂很不稳定，易分斐林试剂很不稳定，易分 解。解。 甲、乙液分别加入时可能甲、乙液分别加入时可能 无无 CuCu ( ( OHOH ) )2生成。生成。4. 试管放在盛有 50-650C 温 水的大烧杯中，加热约加热约 2 2 分分 钟钟，观察到溶液颜色：浅蓝 色 棕色 砖红色（沉 淀） 最好用试管夹夹住试管上部， 使试管底部不触及烧杯底部， 试管口不朝向
11、实验者。 也可用酒精灯对试管直接加热。 防止试管内的溶液冲出试防止试管内的溶液冲出试 管，造成烫伤；管，造成烫伤； 缩短实验时间。缩短实验时间。 留适当样液与反应后溶液做对照，结论：组织样液中含有还原糖留适当样液与反应后溶液做对照，结论：组织样液中含有还原糖 水浴加热水浴加热 斐林试剂斐林试剂使用时：甲乙液等量混匀后立即使用使用时：甲乙液等量混匀后立即使用 双缩脲试双缩脲试 剂剂 使用时：先加使用时：先加 A 液后加液后加 B 液液 第 3 页 共 21 页 （二）脂肪的鉴定（二）脂肪的鉴定 显微镜观察法 操 作 方 法注 意 问 题解 释 花生种子浸泡、去皮、切下一些 子叶薄片，将薄片放在载
12、玻片的 水滴中，用吸水纸吸去装片中的 水。 干种子要浸泡 34 小 时，新花生的浸泡时 间可缩短。 因为浸泡时间短，不易切片，因为浸泡时间短，不易切片， 浸泡时间过长，组织较软，切浸泡时间过长，组织较软，切 下的薄片不易成形。切片要尽下的薄片不易成形。切片要尽 可能薄些，便于观察。可能薄些，便于观察。 取最理想的薄片，放在载玻片中 央 在子叶薄片上滴 23 滴苏丹苏丹或或 苏丹苏丹染液染液，染色 1 分钟。 染色时间不宜过长。 用吸水纸吸去薄片周围染液，用 50%酒精洗去浮色，吸去酒精。 酒精用于洗去浮色 防止浮色影响对橘黄色脂肪防止浮色影响对橘黄色脂肪 滴的观察。滴的观察。 酒精是脂溶性溶剂
13、，可将花酒精是脂溶性溶剂，可将花 生细胞中的脂肪颗粒溶解成油生细胞中的脂肪颗粒溶解成油 滴。滴。 用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴 上 12 滴蒸馏水，盖上盖玻片。 滴上清水可防止盖盖玻片时产滴上清水可防止盖盖玻片时产 生气泡。生气泡。 低倍镜下找到花生子叶薄片的最 薄处，可看到细胞中有染成橘黄 色或红色圆形小颗粒。 装片不宜久放。 时间一长，油滴会溶解在乙醇时间一长，油滴会溶解在乙醇 中。中。 花生种子匀浆 + 苏丹 III 染液 橘黄色 或 花生种子匀浆 + 苏丹 IV 染液 红 色 三、蛋白质的鉴定三、蛋白质的鉴定 操 作 方 法注 意 问 题解 释 制备组织样液 （浸泡、去皮研磨、过滤。
14、） 黄豆浸泡黄豆浸泡 1 1 至至 2 2 天，容易研磨成浆，天，容易研磨成浆， 也可购新鲜豆浆以节约实验时间。也可购新鲜豆浆以节约实验时间。 鉴定：加样液约 2ml 于试管 中 加入双缩脲试剂 A，摇 匀 再加入双缩脲试剂 B 液 34 滴，摇匀 溶液变 紫色 A 液和 B 液也要分开 配制，储存。 鉴定时先加 A 液后加 B 液。 CuSO4溶液不能多加。 先加先加 NaOHNaOH 溶液，提供一个碱性的环溶液，提供一个碱性的环 境。境。A A、B B 液混装或同时加入，会导液混装或同时加入，会导 致致 CuCu2+ 2+变成 变成 CuCu ( ( OHOH ) ) 2 2沉淀，而失沉淀
15、，而失 效。效。 否则否则 CuSOCuSO4 4的蓝色会遮盖反应的真实的蓝色会遮盖反应的真实 颜色。颜色。 可用蛋清代替豆浆。蛋清要先稀释。 如果稀释不够，在实验中蛋清粘在如果稀释不够，在实验中蛋清粘在 试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘 固在试管内壁上，使反应不容易彻固在试管内壁上，使反应不容易彻 底，并且试管也不易洗干净。底，并且试管也不易洗干净。 留适当样液与反应后溶液做对照留适当样液与反应后溶液做对照 第 4 页 共 21 页 附：淀粉的检测和观察 用试管取 2ml 待测组织样液，向 试管内滴加 2 滴碘液，观察颜色 变化。 碘液不要滴太多以免影响颜色观察以
16、免影响颜色观察 实验三：用显微镜观察多种多样的细胞（必修一实验三：用显微镜观察多种多样的细胞（必修一 P7P7） 一实验目的 （1）使用高倍显微镜观察几种细胞，比较不同细胞的异同点 （2）运用制作临时装片的方法 二实验原理：利用高倍镜可以看到某些在低倍镜下无法看到的细胞结构，例如：可以看 到叶绿体、线粒体等细胞器（能看到细胞器，无法看清细胞器结构能看到细胞器，无法看清细胞器结构），从而能够区 别不同的细胞。 光学显微镜光学显微镜 细胞显微结构图：不能显示细胞器的内部结构细胞显微结构图：不能显示细胞器的内部结构 电子显微镜电子显微镜 细胞亚显微结构图：能显示细胞器的内部结构细胞亚显微结构图：能显示细胞器的内部结构 三显微镜的使用：不
