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1、果蝇的遗传分析（双因子杂交试验）一、实验目的：通过两对性状个体杂交，观察F2的分离现象及其比例，了解两对非等位基因间的自由组合。同时掌握果蝇的杂交技术，并学会记录交配结果和掌握统计处理方法。二、实验材料： 灰体残翅 EEvgvg 黑檀体长翅 eeVgVg三、实验原理：果蝇的灰体基因（E）与黑檀体基因（e）为一对相对性状，位于R70.7位置，而长翅（Vg）与残翅（vg）为另一对相对性状，位于R67.0位置。这两对基因是没有连锁关系的，位于不同染色体上的非等位基因。根据非等位基因分离的自由组合定律，在F1代产生配子时，非等位基因的分离是独立的，它们彼此自由组合，产生四种基因型的配子 （EVg，Ev
2、g，eVg，evg），且它们的比例相同。这四种配子自由结合，因此在F2代会出现9种基因型的后代，若显性完全，就出现4种表型，比例为 9：3：3：1。 正交：灰体残翅EEvgvg（）黑檀体长翅（）eeVgVgP 灰体长翅EeVgvg F1 自交F2 EVg 1/4Evg 1/4eVg 1/4Evg 1/4EVg 1/41/16Evg 1/4eVg 1/4Evg 1/4四、实验内容：1、 选处女蝇：每组做正交1瓶，正交选灰体残翅为母本，黑檀体长翅为父本，将母本旧瓶中的果蝇全部麻醉处死，在8-12h内收集处女蝇5只，将处女蝇和5只黑檀体雄蝇转移到新的杂交瓶中，贴好标签，于25培养；2、 7d后，释放
3、杂交亲本；3、 再过4-5天，F1成蝇出现，在处死亲本7天后，集中观察记录F1表型；4、 选取5对F1代果蝇，转入一新培养瓶，于25培养，其余F1代果蝇处死；5、 7d后，处死F1亲本；6、 再过5d，F2成蝇出现，开始观察记录，连续统计7d；五、备注：1、保证杂交所用的亲本雌果蝇一定是处女蝇；2、杂交后倒掉亲本时，一定要倒干净，以免造成回交产生实验误差。同样在F1自交后，倒掉F1时一定要倒干净，以免造成F1和F2的混杂产生实验误差。六、实验结果F1： 观察结果统计日期灰体残翅（）黑檀体长翅（）灰体残翅数灰体长翅数黑檀体残翅数黑檀体长翅数10.2110.2801800F2： 观察结果统计日期
4、（） （）灰体残翅数灰体长翅数黑檀体残翅数黑檀体长翅数10.2911.101101111.1681238合 计92249对F2代的统计结果做x2测验：灰体残翅数灰体长翅数黑檀体残翅数黑檀体长翅数实际观察数（O）92249预期数（E）8.2524.752.758.25偏差（O-E）0.751.251.250.75(O-E)2/E0.0680.0630.5680.068自由度n13x2(O-E)2/E0.767七、分析讨论1. 果蝇的杂交实验中，为什么要收集处女蝇？简单描述如何收集处女蝇？因为雌性果蝇生殖器官有受精囊，可保存交配所用的大量的精子，能使大量的卵细胞受精。因此，在做果蝇杂交实验的时候，雌果蝇必须是处女蝇，保证实验结果的可靠性。雌蝇羽化出来 10h内一般不会交配，选择在这个时间段内收集雌蝇，均属处女蝇。2. 对杂交实验数据进行统计分析，并说明其遗传学意义；或计算遗传图距及基因顺序。由df（自由度）=4-1=3，当p=0.05时，查x2表得x2=7.82.实验所求得的x2值与查表所得x2相比较时，0.7677.82，统计学上认为在5%显著水准上差异不显著，观察频数与理论频数间的差异属于随机误差。遗传学上则可认为该次果蝇杂交实验结果符合孟德尔第二定律：两对基因之间的遗传是自由组合的。
