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1、微专题突破一、与核酸有关的各种酶的比较名称作用参与生理过程应用作用位点(如下图)DNA连接酶连接两个DNA片段基因工程a限制性核酸内切酶切割某种特定的脱氧核苷酸序列aDNA聚合酶在脱氧核苷酸链上添加单个脱氧核苷酸DNA复制aRNA聚合酶在核糖核苷酸链上添加单个核糖核苷酸转录及RNA复制解旋酶使碱基间氢键断裂形成单个脱氧核苷酸链DNA复制及转录b逆转录酶以RNA为模板合成DNA逆转录、基因工程a 1在DNA连接酶的催化下形成的化学键和位置分别是()A氢键碱基与脱氧核糖之间B氢键碱基与碱基之间C磷酸二酯键磷酸与脱氧核糖之间D磷酸二酯键脱氧核糖与碱基之间【解析】本题考查DNA连接酶的作用。DNA连接
2、酶的作用只是催化DNA片段的“缝合”，能恢复被限制酶切开了的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，不能催化氢键形成。【答案】C2下列黏性末端属于同种限制性核酸内切酶切割而成的是() ABCD【解析】同种限制酶切割形成的黏性末端碱基能互补配对。【答案】B3下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是()ABCD【解析】将DNA分子切割成含有黏性末端的两个DNA片段的是限制性核酸内切酶，即；DNA聚合酶则可以催化DNA单链的合成，即；DNA连接酶可以连接具有相同黏性末端或平口末端的两个DNA片段，即；解旋酶催化DNA双螺旋
3、氢键的断裂，使DNA分子解旋，即。【答案】C二、DNA复制、PCR技术和DNA重组技术的比较DNA复制PCR技术DNA重组技术场所细胞核生物体外生物体外酶解旋酶、DNA聚合酶DNA聚合酶限制性核酸内切酶、DNA连接酶载体不需要不需要需要遵循原则碱基互补配对碱基互补配对碱基互补配对结果DNA分子DNA分子片段DNA分子4(2016新乡高二测试)下列有关PCR技术的说法，不正确的是()APCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术BPCR技术的原理是DNA双链复制C利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列DPCR扩增中必须有解旋酶才能解开双链DNA【解析】PC
4、R是利用DNA双链复制的原理，将基因的核苷酸序列不断地加以复制，使其数量呈指数方式增加。利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知的目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。扩增的过程是目的基因DNA受热变性后解旋为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶作用下进行延伸，如此重复循环多次。【答案】D5以下为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图。据图分析，下列说法正确的是()A催化过程的酶是RNA聚合酶B过程发生的变化是引物与单链DNA结合C催化过程的酶都是DNA聚合酶，都能耐高温D如果RNA单链中A与U之和占该链碱基含量的40%，则一个双链DNA中，A与U之和也占该DN
5、A碱基含量的40%【解析】据图分析可知，过程分别表示反转录、DNA的复制、变性、复性和延伸。过程由反转录酶催化完成；过程表示当温度降至5560 时，引物结合到互补DNA链上。过程表示DNA的复制，需在常温条件下完成；过程在表示Taq酶催化作用下从引物起始进行互补链的合成，需在7075 的高温条件下进行，但催化过程的酶都是DNA聚合酶；在DNA分子中有T无U。【答案】B6请回答基因工程方面的有关问题。(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片断，它是子链合成延伸的基础。 从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为_。
6、在第_轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图)，请分别说明理由。 第1组：_；第2组：_。(3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为_。 (4)用限制性核酸内切酶EcoR V、Mbo 单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb即1 000个碱基对)，请画出质粒上EcoR V、Mbo 的切割位点。 【解析】(1)依据图解特点，第四轮循环产物中可以得到16个DNA分子，其中有14个含引物A、B的DNA分子，一
7、个只含有引物B的DNA分子和一个只含引物A的DNA分子。从图解原DNA与引物A、B的比例关系分析，经三次复制后开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。(2)比较第1组引物的碱基顺序，可以发现引物与引物有两对碱基能发生互补配对，形成局部双链结构而失效；而第2组引物中，引物折叠后会发生碱基互补配对而导致失效。(3)在PCR反应体系中，引物首先与模板DNA单链互补配对形成局部双链DNA片段，然后在DNA聚合酶的作用下将单个脱氧核苷酸依次连接到引物链上。(4)分析本小题中图解可知，用EcoR V切割质粒只得到长度为14 kb的一个片段，说明该酶在质粒上只有1个切点；同理可以推测Mbo 在质粒上有2个
8、切点；由图中可以看出同时用两种限制性核酸内切酶切割时得到了3个片段，由此可以推测限制性核酸内切酶EcoR V的切点在5.5 kb和6 kb之间。具体切割位点见答案。【答案】(1)15/16三(2)引物与引物局部发生碱基互补配对而失效 引物自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效(3)DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上(4)见图 章末综合测评(一)(时间：45分钟，分值：100分)一、选择题(共8个题，每小题5分，共40分)1下列有关基因工程和酶的相关叙述，正确的是()A同种限制酶既可以切割目的基因又可以切割质粒，因此不具备专一性B载体的化学本质与载体蛋白相同C限制
9、性核酸内切酶不能切割烟草花叶病毒的核酸DDNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成氢键【解析】一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切割位点上切割DNA分子，因此具有专一性；载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等，成分不单一，载体蛋白的本质是蛋白质；烟草花叶病毒的核酸为RNA，而限制性核酸内切酶不能切割RNA；DNA连接酶可催化具有互补黏性末端或平口末端的DNA片段间磷酸二酯键的形成。【答案】C2(2016渭南高二检测)下列关于基因工程应用的叙述，正确的是() A基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B基因诊断的基本原理是DNA分子杂交C一种基因探针能检测水体中的各种病毒D原核基因不能用来进行真
10、核生物的遗传改良【解析】基因工程是生物工程技术的核心内容，能够按照人们的意愿，定向地改造生物的遗传性状。基因治疗是把正常的基因导入有缺陷的细胞，从而使其表达，达到治疗目的。基因诊断常用基因探针来进行，其遵循的原理是DNA分子杂交，具有很强的特异性，因此一种探针只能检测水体中的一种(类)病毒。所有生物共用一套遗传密码，所以原核基因也能用来进行真核生物的遗传改良。【答案】B3下列哪项不是转基因食物潜在的安全隐患()A转基因植物有可能合成对人体有直接毒性或潜在毒性的蛋白质B转基因植物合成的某些新蛋白质有可能成为某些人的过敏原C某些基因足以使植物体内某些代谢途径发生变化，导致转基因农作物营养成分的改变
11、D某些转基因生物可以合成干扰素，进入人体增强相应细胞的免疫力【解析】转基因生物引发的食物安全的理由主要有：对食物的安全性检测不够；担心出现滞后效应；担心出现新的过敏原；担心营养成分的改变等。D项属于转基因生物在生物制药方面的应用。【答案】D4与常规武器相比，生物武器具有()传染性强污染面积广，不易被发现有一定的潜伏期像核武器一样破坏建筑物自然条件下的大雪、低温、干燥、日晒等不影响生物武器的杀伤力ABCD【解析】生物武器不会像核武器那样破坏建筑物，但与常规武器相比，生物武器具有传染性强、污染面积广，不易被发现的特点，有一定的潜伏期，并且受自然条件影响大，大雪、低温、干燥、日晒等，能加速病菌的消亡
12、。【答案】A5下列关于蛋白质工程的叙述，正确的是()通过对蛋白质进行结构分析获取蛋白质的结构信息蛋白质的结构预测主要指根据蛋白质分子的氨基酸序列，来对其高级结构进行预测结构预测的目的是构建蛋白质的立体结构模型，从而进行结构和功能的研究以及蛋白质分子设计实施蛋白质工程的前提条件是基因工程可利用基因工程的方法对蛋白质进行改造所有蛋白质结构的改造都可以通过基因定点诱变技术来实现ABCD【解析】实施蛋白质工程的前提条件是了解蛋白质的结构和功能的关系，故错。对蛋白质结构分析主要是获取蛋白质的结构信息，以便将蛋白质分子的结构特性同其特定的功能有效地联系起来。对结构预测的目的是在了解蛋白质的氨基酸序列的基础
13、上来构建蛋白质的立体结构模型，从而进行结构和功能的研究以及蛋白质分子设计。定点诱变技术是创造新基因的一般方法，但通过基因的定点诱变技术并不能实现对所有蛋白质的改造，故错。【答案】C6已知某种限制性核酸内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如下图中箭头所指。如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被酶切断，则会产生a，b，c，d 4种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是() A3B4C9D12【解析】本题考查限制性核酸内切酶的作用与识图分析能力。若该线性DNA分子在3个酶切位点切断，得到4种长度不同的DNA片段；若在2个酶切位点切断，得到3种长度不同的DNA片段；若在1个酶切位点切断，得到2种长度不同的DNA片段。因此，最多能产生4329(种)长度不同的DNA片段。【答案】C7基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶的识别序列和切点是GGATCC，限制酶的识别序列和切点是GGATC。据图分析，下列有关说法正确的是()A该质粒分子由四种碱基组成B构建该表达载体的工具酶是限制酶和耐高温的 DNA聚合酶C本实验应采用Gene 作为载体的标
