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1、内分泌疾病实验室检查,第一节 有关糖尿病的检查,一、口服葡萄糖糖耐量试验(OGTT),二、胰岛素释放试验,三、C肽释放试验,四、谷氨酸脱羧酶(GAD)抗体,五、胰岛细胞抗体(ICA)检查,六、胰岛素自身抗体(IAA)测定,七、尿微量白蛋白测定,1. 禁食12-14小时,早晨空腹采抗凝静脉血2ml,测血糖, 口服75克葡萄糖(溶入200-300ml水中),3-5分钟 内全部服完,记录开始服糖时间,在服糖后2小时 (2小时的血糖值是诊断糖耐量异常或糖尿病的重要指 标)采抗凝静脉血2ml,测血糖,必要时可采服糖后 第1、3、4小时的血。,一、口服葡萄糖糖耐量试验(OGTT),2正常参考值: 空腹静脉
2、血浆血糖 6.1mmol / L 服糖2小时静脉血浆血糖7.8 mmol / L 3注意事项和影响因素: 试验中禁用茶、咖啡、食物和乙醇,禁烟,可站立、 慢走和端坐,不能激烈活动。 对糖代谢有影响的主要药物包括噻嗪类利尿剂、受体 阻断剂、口服避孕药、甲状腺激素、烟酸、利福平和 水扬酸等,试验前应停用3天以上,正在服用糖皮质激素 者不适于作糖耐量试验。,一、口服葡萄糖糖耐量试验(OGTT), 病人无急性疾病和影响试验的慢性疾病,每天至少摄入 碳水化合物150g,3天以上。 如已诊断糖尿病,可不作该试验(除非为作胰岛素或C肽释 放试验)。 儿童服葡萄糖按每公斤体重1.75g计算,总量不超过75g。
3、 血糖测定采用葡萄糖氧化酶法,血清与血浆血糖无明显差别, 采血后应尽早测血糖,不要超过3时,否则血糖会降低。 根据WHO糖耐量试验要求,葡萄糖应是75g无水葡萄糖 或82.5g含一分子水的葡萄糖。 由于受体内吸收等因素的影响糖耐量试验的结果重复性较差。,一、口服葡萄糖糖耐量试验(OGTT),2试验方法: 采用75克葡萄糖法同糖耐量试验。 采用馒头餐法,空腹采静脉血后,吃2两馒头(100克面粉) 3正常参考值(化学发光免疫测定法): 空腹胰岛素 627 m IU/ L,胰岛素浓度在服糖后(或馒头 餐后)0.5-1小时达高峰,可比空腹胰岛素浓度高数倍至10倍, 3小时后降至接近正常水平。,二、胰岛
4、素释放试验,4注意事项和影响因素: 如已确诊为糖尿病,为了解胰岛功能可考虑用馒头餐试验, 对糖耐量试验有影响的药物和疾病同样会影响胰岛素释放 试验。 试验当天早上不能使用降糖药物和胰岛素。 有些药盒不能区分胰岛素原和胰岛素原裂解产物,注射外源 性胰岛素产生的胰岛素抗体可干扰胰岛素测定。 正在使用胰岛素的病人,特别是中长效胰岛素,会影响测定 结果(测定值包括了内源性和外源性胰岛素),应测定C-肽 水平。 糖尿病人的胰岛细胞功能受糖尿病类型、体重、病程和 血糖高低等因素的影响。,二、胰岛素释放试验,5临床意义和应用: 用于了解胰岛细胞的功能,协助糖尿病的分型和指导治疗。 典型1型糖尿病胰岛素分泌曲
5、线低平, 2型糖尿病胰岛素分泌与病程、体重和血糖高低关系密切, 病程短、肥胖和血糖控制好者,胰岛素分泌曲线有一定峰值, 但峰值后延。 病程长、消瘦和血糖控制差者,胰岛素分泌曲线低平。 用于胰岛细胞瘤的诊断,胰岛细胞瘤病人有空腹低血糖 和不适当增高的胰岛素水平。 胰岛素自身免疫综合征时胰岛素水平较高,体内同时存在 胰岛素自身抗体。,二、胰岛素释放试验,1原理:同胰岛素释放试验。 2试验方法: 75克葡萄糖法见糖耐量试验。 馒头餐试验见胰岛素释放试验。 胰高血糖素刺激试验,胰高血糖素可刺激胰岛细胞分泌 胰岛素,其方法如下,清晨空腹静脉注射1mg胰高血糖素, 在注射前和注射后6分钟采静脉血测血糖和C
6、肽水平。,三、C肽释放试验,3正常参考值(化学发光免疫测定法): 空腹 C肽 2981324 pmol / L, 正常人采用75克葡萄糖法或馒头餐试验,C肽浓度在服糖后 (或馒头餐后)0.5-1小时达高峰,可比空腹C肽浓度高3-5倍, 3小时后降至接近正常水平。 胰高血糖素刺激后C肽峰值在6分钟左右。 4注意事项和影响因素: 见胰岛素释放试验。 胰高血糖素刺激试验禁用于对其成分过敏者和疑有肾上腺 腺瘤者,空腹血糖7mmol/L时试验结果不好分析,胰高血 糖素刺激试验与75克葡萄糖法或馒头餐试验比较重复性好、 时间短和不受慢性高血糖的影响。,三、C肽释放试验,5临床应用与分析: 了解胰岛细胞的分
7、泌功能, 协助糖尿病的分型, 特别是 正在使用胰岛素的病人。 帮助指导用药和胰岛素的使用,有报告认为胰高血糖素 刺激后C肽水平600 pmol /L时应考虑用胰岛素治疗。,三、C肽释放试验,1原理:GAD抗体是1型糖尿病自身免疫反应的重要抗体, 检测GAD抗体有助于1型糖尿病的诊断、预测和预防。 2采血方法:不抗凝静脉血2ml。 3正常参考值(酶联免疫吸附分析法): GAD抗体 1.00 阴性 1.05 阳性 1.001.05可疑 4注意事项和影响因素:不同的检测方法和药盒其特异性 和敏感性可能存在较大差别,结合胰岛细胞抗体(ICA)和 胰岛素自身抗体(IAA)其意义更大些。,四、谷氨酸脱羧酶
8、(GAD)抗体,5临床意义和分析 糖尿病的分型诊断,一般GAD抗体在1型糖尿病患者中其 检出率高于ICA和IAA,且可维持较长时间,有报告在空腹 血糖最初增高时(达糖尿病诊断标准),GAD抗体阳性率 可达8590%。 在1型糖尿病的一级亲属中筛查GAD抗体,结合ICA和IAA 检查以及HLA中易感基因检查,可预测1型糖尿病的发生 和发展。,四、谷氨酸脱羧酶(GAD)抗体,1原理:ICA是作用在胰岛细胞胞浆成份上的非特异性抗体, 是1型糖尿病自身免疫反应的重要抗体之一。 2采血方法:不抗凝静脉血2ml。 3正常参考值(酶联免疫吸附分析法): 正常人和2型糖尿病为阴性。 4注意事项和影响因素:同G
9、AD抗体。,五、胰岛细胞抗体(ICA)检查,5临床意义和应用: 阳性见于1型糖尿病,新发生的1型糖尿病ICA阳性率可达 50-80%,但随病程的延长阳性率迅速下降。 在1型糖尿病的一级亲属中筛查,结合谷氨酸脱羧酶(GAD) 抗体和胰岛素自身抗体(IAA)以及HLA易感基因检查,可帮 助预测1型糖尿病的发生和发展。,五、胰岛细胞抗体(ICA)检查,1原理:IAA是体内针对自身胰岛素产生的抗体,是1型糖尿病 自身免疫反应的重要抗体之一。 2采血方法:不抗凝静脉血2ml。 3正常参考值(酶联免疫吸附分析法): 正常人和2型糖尿病为阴性。 4注意事项和影响因素:目前IAA的测定方法不能区别IAA与胰
10、岛素治疗诱导产生的胰岛素抗体。其余同GAD抗体。,六、胰岛素自身抗体(IAA)测定,第二节 甲状腺和甲状旁腺疾病检查,一、TT3 和 TT4 的测定,二、FT3和FT4测定,三、TSH测定,四、TRAb测定,五、TGAb和TPOAb测定,六、完整PTH测定,七、降钙素(CT)测定,1原理:全部 T4和 20%的 T3由甲状腺滤泡上皮直接合成和分泌, 80% 的T3由T4在外周组织脱碘而来,血液中大部分甲状腺激素 与TBG呈可逆性结合,T3和T4与蛋白结合的量分别为99.7%和 99.97%,测定TT3和TT4分别代表结合与游离T3和T4的总量。 2采血方法:不抗凝静脉血12ml。,一、TT3
11、和 TT4 的测定,3正常参考值(化学发光免疫分析法): TT3 0.601.81g / L TT4 45.0109g/ L 4注意事项和影响因素: 受TBG的影响,雌激素(如妊娠、避孕药)可使TBG升高, 雄激素、水杨酸、皮质醇、严重肝肾疾病和低蛋白血症时 TBG下降。 血中存在的抗T3、抗T4 抗体可以干扰化验结果,使之出现 假性增高或降低(根据试验方法)。 采血时病人刚服用含T3的甲状腺激素,可使T3的水平升高。,一、TT3 和 TT4 的测定, 服用抑制T4转化为T3的药物如丙基硫氧嘧啶、普萘洛尔、 地塞米松、胺碘酮可影响T3值,使T3减少。 5临床应用和分析: 甲亢时多数情况TT3和
12、TT4平行增高,甲减时平行下降, 但在甲亢初期和复发早期TT3较TT4上升明显(在甲亢时T3以 更大的比例直接从甲状腺分泌),故更敏感,甲减时TT4较 TT3更敏感。 在T3型甲亢时TT3和FT3增高,TT4和FT4正常,见于甲亢初期、 复发早期和缺碘等情况。在T4型甲亢时TT4和FT4升高,TT3和 FT3正常,多见于甲亢伴有严重疾病或碘甲亢。 低T3综合征是由非甲状腺疾病引起的TT3 和FT3降低,如疾病 进一步加重,TT4和FT4也可降低。,一、TT3 和 TT4 的测定,1原理:FT3和FT4不受TBG的影响,是甲状腺激素中具有代谢活 性的部分,能更直接反应甲状腺的功能。 2标本采集:
13、不抗凝静脉血2ml。 3正常参考值(化学发光免疫分析法): FT3 1.814.31 ng/ L FT4 7.419.5 ng / L 4注意事项和影响因素:个别人体内存在抗T3和抗T4抗体, 可以干扰FT3、FT4的化验结果,在分析时要结合病人情况 以及TSH结果来判断病人的甲状腺功能情况。 5临床应用和分析:FT3和FT4较TT3和TT4敏感,在甲亢初期 或复发早期FT3和FT4升高可先于TT3 和TT4。,二、FT3和FT4测定,1原理:TSH由腺垂体分泌,作用于甲状腺,促进甲状腺激素 的合成和分泌,TRH可刺激TSH分泌,而甲状腺激素反馈抑制 TSH分泌。 2标本采集:空腹不抗凝静脉血
14、2ml。 3正常参考值(化学发光免疫分析法): TSH 0.206.20 mIU / L,三、TSH测定,4注意事项和影响因素: 不同化验方法,灵敏度不同,其意义有所不同, RIA不能区别正常人与甲亢病人, IRMA可区别绝大多数甲亢病人和正常人,称为sTSH, ICMA和TRIFMA为uTSH。 多巴胺、皮质醇可显著减少TSH的释放,在使用这些药物时 TSH水平可抑制到甲亢水平, 生长抑素和5羟色胺也可使TSH分泌减少。 在某些非甲状腺疾病和急性精神疾病,TSH水平急剧波动 使结果难以分析,应待病情稳定后重新评价或连续观察TSH 的动态变化。,三、TSH测定,5临床应用和分析: 原发性甲亢时
15、,sTSH和uTSH低于正常,较FT4和FT3更敏感, 一般可替代TRH兴奋试验。亚临床甲亢时TSH降低, FT3和FT4 在正常范围。服用过量甲状腺激素可使TSH降低。 原发性甲减时各种方法测定的TSH均较灵敏的升高, 亚临床甲减时,TSH升高,FT3和FT4在正常范围。 下丘脑和垂体病变所致甲减时,根据其病变性质和程度, TSH降低或正常偏低。单测TSH不能区别下丘脑性还是 垂体性甲减, TRH兴奋试验对鉴别两者有一定帮助。 垂体TSH瘤、异源性肿瘤(分泌TSH)、甲状腺激素抵抗综 合征(全身或垂体性抵抗)时,TSH升高或正常,同时有FT4 和或FT3增高。 用sTSH或uTSH监测正在治
16、疗中的甲亢或甲减,当甲功恢复 到正常时,TSH水平恢复到正常需要更长时间。,三、TSH测定,4注意事项和影响因素:大约10%的健康正常人有低水平的 TGAb和TPOAb,影响TGAb和TPOAb的其他因素包括: 用甲状腺激素替代治疗慢性淋巴细胞性甲状腺炎可使抗体 滴度轻中度降低。 甲状腺次全切或全切可使抗体滴度下降。 131I治疗使抗体滴度升高,峰值在23个月。 皮质醇和抗甲状腺药物治疗可降低抗体滴度。 患慢性淋巴细胞性甲状腺炎的儿童和孕妇抗体滴度较低, 孕妇产后升高。 干扰素可增加抗体的产生。,五、TGAb和TPOAb测定, 用于慢性淋巴细胞性甲状腺炎的诊断,在慢性淋巴细胞 性甲状腺炎时TPOAb水平的升高较TGAb更明显和常见。在诊断 时应结合病人的临床表现、甲状腺功能和其他实验室检查。 约50-90