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1、梅毒的实验室诊断与临床意义,1,梅毒的历史,梅毒的起源地:美洲 梅毒的传播:1492年哥伦布第一次航行到美洲带回欧洲,然后传向全世界。 进入中国时间:1505年葡萄牙商人进入广州,将此病传遍大江南北。 中国旧称此病为:霉疮或杨梅疮,2,梅毒病原体,梅毒病原体为:梅毒螺旋体(TP) 由德国的霍夫曼和谢文定在1905年首先发现. 因透明不易染色,所以又称为苍白螺旋体。,3,梅毒流行病学统计,梅毒是世界三大慢性传染病之一(梅毒、麻风、结核)。 1999年全国报告梅毒80406例。 2009年全国报告梅毒327433例。 2010年全国报告梅毒385678例. 2012年全国报告梅毒448620 例.
2、 2012年广东全省报告新发梅毒病例数为53043例,是全国第一 。 2012年,在甲乙类传染病上报病例中梅毒位居第三。(病毒性肝炎、结核、梅毒),4,梅毒的疫情分析,梅毒发病率呈逐年大幅上升趋势,疫情形势严竣。 也说明实验室的检测范围扩大和技术水平的提高,从而发现确诊了更多梅毒病例。 中国预防与控制梅毒规划20102020年,要把梅毒病例每年的增速控制在5%以下。,5,梅毒实验室检查示意图,6,各期梅毒取材部位与检查方法,临床表现 取材部位 检查方法 一期梅毒 溃疡、淋巴结 显微镜检查 血液 血清学检查 二期梅毒 皮损、淋巴结 显微镜检查 血液 血清学检查 隐性梅毒 血液 血清学检查 三期梅
3、毒 血液、脑脊液 血清学检查 神经梅毒 血液 、脑脊液 血清学检查,7,梅毒显微镜检查法,梅毒显微镜检查法可分二类: 1.暗视野显微镜检查法 2.镀银染色检查法,8,暗视野显微镜检查法,溃疡部位取材,查找苍白螺旋体。 取材方法:1.清洗干净 2.取组织液或渗出液 3.刮取或压片 4.加一滴生理盐水 5.送实验室检查 注意:取材后需十分钟内立即送检 实验室暗视野显微镜直接查找活动的苍白螺旋体。,9,暗视野显微镜下的苍白螺旋体,10,镀银染色检查法,溃疡部位取材,镀银染色查找苍白螺旋体。 取材方法:1.清洗干净 2.取组织液或渗出液 3.刮取或压片 4.送实验室镀银染色 实验室普通显微镜下查找染成
4、棕褐色的梅毒螺旋体。,11,镀银染色梅毒螺旋体镜下形态,12,梅毒显微镜检查的临床意义,阳性:有诊断价值,可确认梅毒感染。 阴性:无否定价值,无诊断价值。 方法学优点:1.取材方便 2.制作简单 3.结果快速 方法学缺点:1.阳性率仅3060%,漏检率高,且只适 于一期、二期梅毒的筛查. 2.受制于取材不当、制片不当等因素。 3.需暗视野显微镜,基层医院一般无此 设备。 4.对检验技师技术经验水平要求较高。,13,梅毒实验室血清学检查,梅毒的实验室血清学检查方法有很多,可分为二类: 1.非梅毒螺旋体抗原血清试验 2. 梅毒螺旋体抗原血清试验 这二类试验都是以检测梅毒患者体内产生的相应梅毒抗体,
5、从而推断是否感染梅毒螺旋体。,14,梅毒螺旋体抗体的产生,人感染梅毒螺旋体后, 第14天产生第一次感染后的体液免疫应答,特异性抗体lgM,四周左右达到高峰,以反应素抗体为主,此抗体治疗后可消失。 第3周开始产生出现特异性抗体lgG,45周达到高峰,可保留终生。 第30天开始产生出现非特异性抗体lgM,很快达到高峰,以反应素抗体为主,治疗后可消失。 第40天开始产生出现非特异性抗体lgG,很快上升,1年后达到高峰,治疗后可消失.,15,梅毒抗体的产生时间与波峰图,人感染梅毒后,各抗体出现的时间与波峰图,16,非梅毒螺旋体抗原试验,非梅毒螺旋体抗原试验包括以下几种: VDRL 性病研究实验室(玻片
6、试验) USR 血清不需加热的反应素(玻片试验) RPR 快速血浆反应素(环状卡片试验) TRUST 甲苯胺红血清不需加热试验 原理:用一定比例的心磷脂、卵磷脂及胆固醇混合物作为非特异性梅毒螺旋体抗原,与患者血清中的抗体作抗原抗体结合反应试验,来检测患者体内的抗类脂类抗原的抗体(即非特异性梅毒螺旋体抗体),17,非梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义,1.适用于梅毒筛查、疗效观察、复发或再感染的检查; 2.抗体水平与疾病严重程度成正比; 3.评价、监测治疗效果,此抗体治愈后可消失。 4.此抗体不具有特异性,全身性疾病的活动期如:红斑狼疮,风湿病,类风湿关节炎,病毒性肝炎,麻风病,自身免疫性疾病等,都
7、有可能出现。 现在临床医学实验室基本上都采用TRUST或RPR来做梅毒螺旋体的非特异性抗体检测。,18,梅毒螺旋体抗原血清试验,梅毒螺旋体抗原血清试验包括以下几种: FTA-ABS 荧光螺旋体抗体吸收(试验) TPHA 梅毒螺旋体血凝试验 TPPA 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 原理:都是以梅毒螺旋体为抗原,与患者血清中的抗体作抗原抗体结合反应试验,来检测患者体内的特异性梅毒螺旋体抗体。以上各试验只是抗原的制备方法和结果显示方法上略有不同,基本原理都相同。,19,梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义,1.适用于梅毒筛查、及非梅毒螺旋体抗原血清试验阳性的确证试验。 2.特异性抗体可终生存在,故试验阳性不能作
8、为疗效观察的指标。 3. 试验阳性不能区分既往感染和现症感染,需结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行现症确认诊断。 现在绝大多数医学实验室采用TPPA来做梅毒螺旋体的特异性抗体检测。,20,梅毒血清学检验结果判读总结,非梅毒抗原血清试验 梅毒抗原血清试验 临床意义 (非特异性抗体)(特异性抗体) 阳性(+) 阳性(+) 诊断确认现症梅毒感染 阳性(+) 阴性(-) 排除梅毒,提示其他疾病 阴性(-) 阳性(+) 曾有感染,已治疗或自愈 阴性(-) 阴性(-) 健康人群,21,梅毒检验结果判读示总结图,22,梅毒筛查策略,梅毒筛查策略一: TRUST(阳性)TPPA (阳性) 诊断确认梅毒 TR
9、UST(阴性) 终止 检查 特点:传统方法,简便快速,漏检率高,适合于健康人群批量筛查. 梅毒筛查策略二: TPPA(阳性) TRUST(阳性) 诊断确认梅毒 TPPA(阴性) 否定梅毒 特点:敏感性高,特异性强,操作烦琐,不适宜大规模批量检查. 因此建议采取策略二做临床病人的梅毒筛查.,23,(先天)胎传梅毒,(先天)胎传梅毒:梅毒螺旋体通过母体胎盘传染给胎儿。早期胎传梅毒2岁;晚期胎传梅毒2岁; 1997年我国共报告先天梅毒109例,发病率为0.53/10万活产数;2009年我国共报告先天梅毒10757例,发病率为64.41/10万活产数。每年发病率增长49.2%. 对于疑似早期胎传梅毒的
10、,尤其是新生儿,实验室检查TRUST阳性和TPPA阳性者,不能过早下确认诊断结论,因为婴儿体内抗体有可能来自来母体,非胎儿自身产生。 研究调查:对99例检查TPPA为阳性的新生儿随访,6个月内自动转阴率为18.6%,2年内转阴率为74.4%.,24,区分梅毒抗体来源,那么如何区分抗体是来自母体还是婴儿自身感染产生呢? 和所有的细菌及病毒感染一样,在梅毒中特异性lgM抗体的合成是初次感染后的体液免疫应答,最先产生,随后才产生lgG抗体。lgM抗体分子量大(97万道尔顿),其不能通过胎盘屏障进入婴儿体内,lgG抗体分子量小(15万道尔顿)能通过胎盘。 所以只要在婴儿体内检查到特异性梅毒lgM抗体,即可确认为先天梅毒感染。,25,(先天)胎传梅毒的实验室诊断,当母亲为梅毒患者时,婴儿具有下列实验室3个指标之一,可确诊为胎传梅毒: 1.患儿检出19S-lgM(特异性梅毒lgM抗体)。 2.暗视野显微镜检查发现梅毒螺旋体。 3.患儿TRUST和TPPA均阳性,且抗体滴度持续升高。,26,谢谢!,27,